五味子保肝作用的研究進(jìn)展

胡荻，魏國(guó)偉，曲中原

(1.哈爾濱商業(yè)大學(xué)藥學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150076；2.中央與地方共建高等學(xué)校藥學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，黑龍江 哈爾濱 150076；3.黑龍江省預(yù)防與治療老年病藥物研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，黑龍江 哈爾濱 150076)

肝病，包括病毒性肝炎，脂肪肝，肝纖維化，肝硬化和肝癌，是威脅人類健康的主要疾病之一[1]。盡管在過(guò)去幾十年中，肝臟疾病的治療取得了顯著進(jìn)展，但大多數(shù)治療方法仍未能產(chǎn)生令人滿意的結(jié)果[2]。鑒于常規(guī)化學(xué)藥劑引起顯著不良反應(yīng)，迫切需要新的預(yù)防和治療肝病的藥物。五味子[Schisandrachinensis(Turcz.)Baill.]為木蘭科藤本植物北五味子的成熟干燥果實(shí)，藥用價(jià)值極高，在神農(nóng)本草經(jīng)中被列為上品[3]。早在宋代，關(guān)于五味子保肝作用的藥方就已流傳于世[4]?，F(xiàn)代藥理研究表明，五味子可能具有多種治療作用，如保肝、抗炎和抗氧化作用[5-8]。國(guó)內(nèi)外研究表明，來(lái)自五味子的提取物及各種單體成分對(duì)酒精性肝損傷、非酒精性肝損傷、肝纖維化等各種原因引起的肝病都有治療作用，因此本文對(duì)五味子保肝方面的研究做一綜述，為五味子在此方面的研究提供理論依據(jù)。

1 五味子提取物的保肝作用

1.1 五味子提取物 Jang等[9]的研究調(diào)查了五味子提取物(SCE)對(duì)大鼠叔丁基過(guò)氧化氫(t-BHP)誘導(dǎo)的氧化性肝損傷的抗氧化活性和保肝作用。肝臟組織病理學(xué)評(píng)估顯示，用SCE預(yù)處理導(dǎo)致t-BHP誘導(dǎo)的病變發(fā)生率降低，例如中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，肝細(xì)胞腫脹和壞死。高劑量SCE處理可誘導(dǎo)Ⅱ期抗氧化劑/解毒酶表達(dá)，例如谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)和谷氨酸-半胱氨酸連接酶催化亞基(GCLC)。

Jang等[10]研究了五味子甲醇提取物(SC提取物)在體外和體內(nèi)對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)應(yīng)激誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝(NAFLD)的保護(hù)作用。研究結(jié)果顯示SC提取物顯著抑制了ER應(yīng)激標(biāo)記物的表達(dá)，并且還抑制了甘油三酯積累。在棕櫚酸鹽處理的HepG2細(xì)胞和HFD肥胖小鼠的肝臟中SC提取物抑制棕櫚酸鹽處理的HepG2細(xì)胞中炎性基因和脂肪生成基因的表達(dá)。

在邱炳勛等[11]的研究中，研究結(jié)果表明五味子提取物長(zhǎng)期給藥雖然可上調(diào)CYP450s活性，導(dǎo)致乙酰氨基(APAP)活性代謝產(chǎn)物生成量增加；但其同時(shí)激活Nrf2信號(hào)通路，上調(diào)抗氧化酶表達(dá)，增強(qiáng)抗氧化酶活性及GSH水平，最終可保APAP導(dǎo)致的急性肝損傷。

1.2 五味子木脂素提取物 在Hao等[12]的研究中，7周齡誘導(dǎo)肝損傷的雄性小鼠，口服給予五味子木脂素提取物(SLE)，連續(xù)給藥5 d。結(jié)果顯示，口服SLE顯著減少了應(yīng)激小鼠的肝損傷及減輕了應(yīng)激小鼠中皮質(zhì)酮的激發(fā)。SLE還通過(guò)防止自由基的過(guò)度產(chǎn)生和積累，顯著降低了氧化損傷和增加了肝細(xì)胞的抗氧化能力?？傊琒LE對(duì)應(yīng)激性肝損傷的保護(hù)作用得到了證實(shí)，五味子木脂素的保肝和抗應(yīng)激作用之間的相關(guān)性可能與其緩解生化穩(wěn)態(tài)應(yīng)激源的惡性效應(yīng)有關(guān)。

Chen等[13]探討了五味子木脂素提取物(SLE)對(duì)四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用及相關(guān)分子機(jī)制。結(jié)果顯示，SLE顯著降低了CCl4誘導(dǎo)的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT )/谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性，降低了肝臟病理改變。

1.3 五味子油籽提取物 在王小寧等[14]的實(shí)驗(yàn)中，建立了CCl4肝損傷小鼠模型，證實(shí)五味子種籽油高、中、低劑量組均可顯著降低肝組織丙二醛含量，升高谷胱甘肽和超氧化歧化酶水平，HE染色結(jié)果顯示五味子種籽油可顯著改善小鼠肝細(xì)胞水腫、壞死等病理?yè)p傷。

2 五味子多糖的保肝作用

早在1995年，睢大筼等[15]就對(duì)五味子粗多糖的保肝作用進(jìn)行了研究，他們用CCl4制造了小鼠的肝損傷模型，研究結(jié)果顯示，北五味子粗多糖可顯著縮短肝損傷小鼠的睡眠時(shí)間，可使肝損傷小鼠肝糖原含量顯著升高，提高了機(jī)體的 能量，有利于抵御外來(lái)有害物質(zhì)對(duì)肝臟的損害。

高普軍等[16]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明五味子粗多糖可使受損的肝功能恢復(fù)加快，促進(jìn)肝細(xì)胞生長(zhǎng)，同時(shí)提示五味子粗多糖保肝作用的機(jī)理主要是通過(guò)對(duì)抗脂質(zhì)過(guò)氧化，從而保護(hù)了肝細(xì)胞膜。

在Wang等[17]的研究中，五味子多糖(SCP)顯著降低肝臟血清甘油三酯(TG)，總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶指數(shù)，增加了血清高密度脂蛋白膽固醇指數(shù)。此外，SCP降低了肝TC和TG含量，并減輕了肝細(xì)胞的脂肪變性和壞死。在用SCP處理的非酒精性肝損傷小鼠中觀察到肝脂肪生成基因，脂肪酸合成酶和乙酰輔酶A羧化酶的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)以及肝X受體α(LXRα)的mRNA表達(dá)的顯著下調(diào)。 SCP還顯著降低了SREBP-2和3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMGCR)的肝臟表達(dá)。這些發(fā)現(xiàn)證明了SCP在NAFLD小鼠模型中的保肝作用可能是通過(guò)肝臟中LXRα/SREBP-1c/FAS/ACC和SREBP-2/HMGCR信號(hào)通路的下調(diào)來(lái)介導(dǎo)的。

Yuan等[18]通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)五味子酸性多糖對(duì)乙醇誘導(dǎo)的小鼠和細(xì)胞肝損傷具有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與抑制CYP2E1蛋白的表達(dá)，減輕乙醇誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷有關(guān)。

潘炎等[19]的研究證明了五味子酸性多糖分級(jí)產(chǎn)物高劑量可降低小鼠血清中ALT和AST水平，升高血清及肝組織中SOD活性、降低MDA含量，降低肝組織中TG含量，并可改善肝臟病理學(xué)變化，證實(shí)五味子酸性多糖對(duì)急性酒精性肝損傷具有保護(hù)作用。苑榮爽等[20]研究證實(shí)了五味子多糖對(duì)用高脂飲食誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝大鼠血脂具有一定的調(diào)節(jié)作用，其作用機(jī)制可能與抗氧化應(yīng)激有關(guān)。

3 五味子木脂素單體的保肝作用

3.1 Gomisin N 在Jang等[21]的研究中，研究了Gomisin N對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)應(yīng)激和肝脂肪變性的體外和體內(nèi)作用，Gomisin N降低了ER應(yīng)激和TG水平標(biāo)志物的表達(dá)。棕櫚酸預(yù)處理HepG2細(xì)胞后觀察到類似的效果。在注射衣霉素的小鼠中進(jìn)一步證實(shí)了Gomisin N的抑制作用。注射衣霉素后，Gomisin N降低小鼠肝臟ER應(yīng)激標(biāo)志物的表達(dá)，降低了TG水平。此外，Gomisin N降低了棕櫚酸鹽孵育的HepG2細(xì)胞中炎性和脂肪生成基因的表達(dá)。這些結(jié)果表明，Gomisin N抑制ER應(yīng)激并改善ER應(yīng)激誘導(dǎo)的肝臟脂肪變性。

3.2 五味子酯甲 在Li等[22]的研究中，組織病理學(xué)分析顯示五味子酯甲可降低酒精誘導(dǎo)的肝臟脂質(zhì)空泡。五味子酯甲以劑量依賴性方式抑制酒精誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激和肝臟中的炎癥反應(yīng)。同時(shí)，五味子酯甲治療降低了酒精性肝損傷(ALI)小鼠的乙醇脫氫酶(ADH)活性和乙醛脫氫酶(ALDH)活性，抑制了酒精誘導(dǎo)的肝臟中CYP2E1和CYP1A2的上調(diào)。此外，五味子酯甲抑制了ALI小鼠中NF-κB途徑的激活?？傊芯拷Y(jié)果表明，五味子酯甲能夠預(yù)防ALI，這可能有一部分是由酒精代謝和NF-κB途徑的調(diào)節(jié)引起的。數(shù)據(jù)表明五味子酯甲在治療ALI中具有治療潛力。

3.3 五味子醇乙(Schisandrol B、Gomisin A) Zeng等[23]的研究結(jié)果顯示，五味子醇乙可以保護(hù)小鼠免受石膽酸(LCA)誘導(dǎo)的肝內(nèi)膽汁淤積的影響。此外，五味子醇乙治療可降低膽汁淤積小鼠的死亡率。代謝組學(xué)和基因分析表明，五味子醇乙加速膽汁酸的代謝，促進(jìn)膽汁酸流入腸道，并誘導(dǎo)參與膽汁酸穩(wěn)態(tài)的PDR靶基因CYP3A11、UGT1A1和OATP2的肝臟表達(dá)。機(jī)理研究表明，五味子醇乙激活人PXR并上調(diào)人細(xì)胞系中的PXR靶基因。此外，五味子醇乙不能保護(hù)Pxr-null小鼠免受肝內(nèi)膽汁淤積引起的肝損傷，因此提供了五味子醇乙的作用是孕烷X受體(PXR)依賴性的遺傳證據(jù)。

Jiang等[24]的研究結(jié)果表明，五味子醇乙對(duì)APAP誘導(dǎo)的肝毒性具有顯著的保護(hù)作用，部分是通過(guò)激活NRF2/ARE途徑和調(diào)節(jié)NRF2靶基因，從而誘導(dǎo)解毒能力，提高抗氧化能力。

3.4 五味子乙素 Chen等[25]探討了五味子乙素對(duì)四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化的保護(hù)作用及相關(guān)分子機(jī)制。五味子乙素能有效減少肝功能改善和膠原沉積，證明五味子乙素能減輕肝損傷和大鼠肝纖維化的進(jìn)展。在體外研究中，顯示五味子乙素抑制了TGF-β誘導(dǎo)的HSC活化及TGF-β1刺激的Smad磷酸化和促分裂原活化蛋白激酶的信號(hào)傳導(dǎo)。該研究表明五味子乙素通過(guò)調(diào)節(jié)Nrf2-ARE和TGF-β/ Smad信號(hào)傳導(dǎo)途徑來(lái)預(yù)防肝纖維化的進(jìn)展，并且表明五味子乙素可用于治療肝纖維化。

白慧媛等[26]的研究表明，五味子乙素能通過(guò)激活Nrf2/ARE通路,在一定劑量范圍內(nèi)減輕氯氮平所致小鼠肝損傷,而高劑量五味子乙素未顯示出肝保護(hù)作用。

3.5 五味子甲素 王菊平等[27]研究了五味子甲素對(duì)急性肝內(nèi)膽汁淤積模型大鼠肝功能的保護(hù)作用，結(jié)果顯示，五味子甲素可以顯著升高急性肝內(nèi)膽汁淤積大鼠血清中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)的活性和總膽紅素(TBIL)的含量，降低肝勻漿中Na+、K+、ATP酶的活性，因此可得出結(jié)論，五味子甲素對(duì)急性肝內(nèi)膽汁淤積模型大鼠肝功能具有保護(hù)作用。在曹媛等[28]的研究中，五味子甲素可以發(fā)揮抗肝纖維化的作用，其機(jī)制可能與抑制細(xì)胞增殖、降低纖維化指標(biāo)的表達(dá)有關(guān)。

4 展望

肝臟功能障礙的原因是來(lái)自多方面的，各方面是相互協(xié)同非孤立存在的，而目前其針對(duì)性預(yù)防，治療方法和體系并不全面，有待進(jìn)一步研究與完善。五味子具有明顯的保肝作用，通過(guò)相關(guān)研究可以看出五味子對(duì)酒精性肝損傷、肝內(nèi)膽汁淤積、肝纖維化等多種肝臟疾病均有明顯抑制效果，其機(jī)制主要與其抗氧化能力和抑制相關(guān)酶與蛋白的表達(dá)的能力有關(guān)。雖然五味子保肝作用的藥理作用與機(jī)制已相對(duì)明確，但多數(shù)停留在動(dòng)物的研究層面，相關(guān)保肝藥物的臨床研究仍相對(duì)缺乏。此外，基于中藥及天然產(chǎn)物藥效普遍較弱的事實(shí)，對(duì)五味子中的主要活性成分進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾和改造以期獲得更為高效的衍生物也是一個(gè)重要的研究方向。