回神顆粒對中度創(chuàng)傷性腦損傷的機制以及臨床應用研究

楊金穎

天津市武清區(qū)中醫(yī)醫(yī)院制劑室 301700

創(chuàng)傷性腦損傷(Traumatic brain injury，TBI)是由各種原因創(chuàng)傷引起的腦組織損害，其發(fā)病率、病死率和致殘率均較高，是臨床常見疾病，其中中度TBI最為常見。回神顆粒是我院的院內(nèi)制劑，由人參、石菖蒲、鹿角、丹參、五味子等多味中藥組成，主要功效為補益五臟、化淤祛痰、開竅通絡?；厣耦w粒對中度創(chuàng)傷性腦損傷有顯著的保護作用，它可以通過改善機體應激狀態(tài)、減輕微循環(huán)紊亂狀態(tài)、改善機體認知功能，能抑制ICAM-1的表達來減輕其炎性反應，還能通過遏制鈣超載、減輕NMDAR-1及AQP-4的過度表達來減輕其腦水腫情況。關(guān)于回神顆粒的研究較多，本文總結(jié)了回神顆粒對中度創(chuàng)傷性腦損傷的保護作用機制和近年來回神顆粒的臨床應用，為更好地科研探索提供參考。

1 回神顆粒對中度創(chuàng)傷性腦損傷的保護作用機制

1.1 通過益氣扶正、活血化淤、開竅醒神等作用治療TBI 崔俊波[1]將36例中度TBI患者隨機分為對照組18例(采用西醫(yī)基礎(chǔ)治療)和治療組18例(在西醫(yī)基礎(chǔ)治療加用回神顆粒)，結(jié)果治療組的總有效率為73.3%，對照組為40.0%，兩組無顯著性差異。但是，兩組同期比較的多個神經(jīng)量表評分卻有顯著差異，其中治療組格拉斯哥昏迷評分(GCS)(3、7、15d)、簡化急性生理學評分(SAPS)(7、10、15d)、殘疾分級評分(DRS)(7、15d)、格拉斯哥預后評分(GOS)(7、10、15d)的改善均明顯優(yōu)于對照組(P<0.05)。說明回神顆粒可以改善機體應激狀態(tài)、減輕微循環(huán)紊亂狀態(tài)，而且能改善機體認知功能。

1.2 通過抑制ICAM-1的表達，遏制鈣超載、減輕NMDAR-1及AQP-4的過度表達來治療TBI 腦內(nèi)炎性反應參與腦創(chuàng)傷后繼發(fā)性腦損傷及損傷修復階段，黏附分子ICAM-1的水平影響顱腦損傷早期炎性反應損傷程度；創(chuàng)傷性腦水腫是TBI后最重要的繼發(fā)性病理生理反應，與腦水腫密切相關(guān)的是中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮性氨基酸谷氨酸離子型受體-N-甲基-D-天門冬氨酸受體1(NMDAR-1)和一種水通道蛋白(AQP-4)。實驗結(jié)果說明[2-4]，在轉(zhuǎn)錄水平上，回神顆粒抑制ICAM-1的表達；在分子水平上，回神顆粒能夠遏制鈣超載，并減輕NMDAR-1及AQP-4的過度表達；在NSS評分上，回神顆粒能夠明顯改善TBI大鼠的NSS評分，并改善其神經(jīng)功能和促進大鼠的生長發(fā)育。具體實驗結(jié)果[2-4]如下：崔俊波應用液壓性腦損傷裝置建立中度TBI模型，創(chuàng)傷壓力為(170±10)kPa，作用時間為(20±2)ms，他隨機將大鼠分為6組：正常組、假手術(shù)組、模型3d組、模型7d組、治療3d組、治療7d組。治療3d組和治療7d組大鼠在創(chuàng)傷后立即用2ml藥液(其中含回神顆粒0.27g)灌胃1次，之后兩組均每日早晚各灌胃1次，2ml/次藥液。他采用RT-PCR檢測6組動物損傷區(qū)腦組織內(nèi)ICAM-1、腦組織內(nèi)NMDAR-1和AQP-4的變化情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩個模型組的ICAM-1表達、NMDAR-1及AQP-4的表達均較正常組顯著增加(P<0.01)，治療3d組的ICAM-1的表達較正常組顯著增加(P<0.01)，而治療7d組中ICAM-1表達的升高沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)；治療3d組與模型3d組比較，ICAM-1、NMDAR-1及AQP-4的表達均明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；治療7d組與模型7d組比較，只有ICAM-1的表達明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。他采用雙光束熒光分光光度計測定6組動物腦細胞內(nèi)游離鈣濃度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，治療3d組較模型3d組明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，而模型3d組較正常組明顯升高(P<0.01)。他還采用光鏡和掃描電鏡觀察6組動物腦損傷區(qū)腦細胞的病理形態(tài)學改變，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩個模型組和兩個治療組均可見到明顯改變，而且兩個治療組較兩個模型組均明顯減輕。對于神經(jīng)損傷(NSS)評分，他分別于創(chuàng)傷后1d、3d、7d對正常組、假手術(shù)組、模型7d組和治療7d組進行評分，分別于創(chuàng)傷后1d、3d對模型3d組和治療3d組進行評分，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩個模型組和兩個治療組的每個時間點NSS評分均明顯降低(P<0.01)，而且兩個治療組的NSS評分較兩個模型組明顯提高，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。對于稱取每只動物的體重，他在造模前和取材前均分別稱重，結(jié)果模型組動物體重較正常組明顯下降(P<0.01)，治療組動物體重較正常組沒有明顯下降(P>0.05)，但比較每組動物造模前和取材前體重，發(fā)現(xiàn)模型組體重明顯下降(P<0.01)，治療組體重明顯有所增加(P<0.01)。

2 回神顆粒的臨床應用研究

2.1 對重型顱腦損傷腦保護作用 李傳勇等[5]對100例重型腦外傷患者隨機分成對照組40例(僅采用單純西醫(yī)治療)和研究組60例(在西醫(yī)治療基礎(chǔ)上使用回神顆粒治療)，兩組患者一般資料差異無顯著性。 結(jié)果研究組治療總有效率為93.3%，顱壓恢復情況及昏迷轉(zhuǎn)醒時間上均明顯優(yōu)于對照組(總有效率為80.0%)，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。說明回神顆粒能保護重型顱腦損傷所致的腦神經(jīng)細胞破壞，可使患者血腫明顯吸收，并縮小水腫區(qū)及軟化灶，很大程度降低殘死率，提高生存質(zhì)量。

2.2 治療周圍神經(jīng)損傷 趙廷浩等[6]探討回神顆粒對周圍神經(jīng)損傷的治療效果，他們對清潔級Wistar大鼠行左側(cè)坐骨神經(jīng)鉗夾損傷，制成神經(jīng)損傷模型，造模成功后使用回神顆粒治療。實驗結(jié)果表明回神顆粒能明顯促進坐骨神經(jīng)損傷后神經(jīng)組織形態(tài)，并促進失神經(jīng)支配腓腸肌肌細胞的恢復，回神顆粒組與模型組比較，腓腸肌肌細胞截面積差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

2.3 對PC12細胞損傷的保護作用 回神顆粒含藥腦脊液能減輕Aβ25-35所致的PC12細胞損傷，具有細胞保護作用。劉江等[7]采用PC12細胞建立24h Aβ25-35所致?lián)p傷模型，將實驗分成正常組、模型組，回神顆粒含藥腦脊液高劑量組(20%)、中劑量組(15%)和低劑量組(5%)以及空白腦脊液組。他們在PC12細胞中同時加入各劑量回神顆粒含藥腦脊液和20μmol/L Aβ25-35，培養(yǎng)24h后，使用MTT法檢測細胞活力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)回神顆粒含藥腦脊液各劑量組均比模型組能顯著提高Aβ25-35所致受損PC12細胞的生存率，且隨著濃度的增加，細胞存活率也逐漸提高，在20%濃度時達到最高。而且，回神顆粒含藥腦脊液可以在0～72h各時間點抑制神經(jīng)細胞的凋亡，但時間越早，其細胞凋亡率越低。張玉嶺等[8]采用腦脊液藥理學和PC12細胞培養(yǎng)相結(jié)合的方法，用回神顆粒含藥腦脊液在體外培養(yǎng)缺血缺氧損傷的PC12細胞，在PC12細胞損傷后的6h、12h、24h、72h，用流式細胞儀檢測細胞凋亡率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)損傷的PC12細胞模型在損傷6h已經(jīng)開始凋亡，24h則達到凋亡高峰，48～72h也仍然維持較高的水平。

2.4 治療血管性癡呆(VD) VD是腦血管疾病發(fā)生后的一種嚴重影響患者恢復的疾病。回神顆?？梢愿纳颇X組織的缺血缺氧狀態(tài)，并且恢復腦細胞的活力，治療效果可靠且持久。陳寶貴等[9]隨機將病例分為觀察組(118例，服用回神顆粒)，對照組(30例，服用西藥喜得鎮(zhèn))，采用國際通用智力量表(MMSE)評分標準，觀察兩組患者在時間定向力、空間定向力、語言功能等方面的改善情況，結(jié)果觀察組總有效率為89.83%，對照組為60.00%，對兩組有效病例追蹤觀察6個月，好轉(zhuǎn)維持率觀察組為99.06%，對照組為83.33%，惡化率觀察組為0.94%，對照組為16.67%。此外，崔俊波等[10]觀察回神顆粒治療VD的臨床療效和MMSE積分改善情況，他們將患者隨機分為治療組(118例，應用回神顆粒)和對服組(62例，應用喜得鎮(zhèn))，結(jié)果發(fā)現(xiàn)回神顆粒組對于輕度和中度VD療效明顯優(yōu)于喜得鎮(zhèn)組，而對于重度VD則兩組無差異；對有效病例6個月隨訪表明回神顆粒組好轉(zhuǎn)維持率明顯優(yōu)于喜得鎮(zhèn)組。

2.5 治療急性高血壓腦出血 高血壓腦出血是由顱內(nèi)血腫及腦水腫所致的顱壓高及神經(jīng)元損傷。陳慧媧等[11]研究回神顆粒對該病的療效，53例發(fā)病72h內(nèi)的高血壓腦出血患者被隨機分為治療組31例(在對照組用藥的基礎(chǔ)上加服回神顆粒)和對照組22例(采用西醫(yī)基礎(chǔ)治療)，兩組患者一般資料、神經(jīng)功能缺損及并發(fā)疾病比較差異無統(tǒng)計學意義。結(jié)果治療組有效率為90.3%，對照組為77.3%，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。關(guān)于血腫吸收情況，在出血量相近的基礎(chǔ)上，治療組吸收量和吸收率方面均明顯高于對照組(P<0.001)。

2.6 治療中風后運動性失語 運動性失語是腦卒中較為常見的并發(fā)癥，回神顆粒明顯改善言語表達的流利性、復述、命名、書寫等各種能力，為治療中風后運動性失語之良方。劉文通等[12]將79例中風后運動性失語患者隨機分為對照組(采用西醫(yī)基礎(chǔ)治療)及治療組(在對照組基礎(chǔ)上加服回神顆粒)，14d后治療組患者在言語表達的流利性、復述、命名、書寫等各方面的功能改善情況明顯優(yōu)于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而且連續(xù)6個月服用回神顆粒的臨床療效明顯優(yōu)于對照組(P<0.05)。

3 結(jié)語與展望

崔俊波建立中度TBI模型采用液壓性腦損傷裝置，液壓損傷法是密閉顱腔內(nèi)的壓力因為液壓裝置的驟然改變而間接造成的腦損傷。而是近十余年來應用最廣的顱腦創(chuàng)傷模型就是利用動物模型來模擬臨床腦損傷，其致傷機理類似于人類頭部撞擊后的腦變形。大鼠液壓沖擊腦損傷模型中動物容易獲得，致傷能量測定簡潔方便，具有較好的穩(wěn)定性和可重復性，能夠較好的重現(xiàn)臨床閉合性腦損傷。

ICAM-1是一種單鏈跨膜糖蛋白，屬于黏附分子免疫球蛋白超家族，它是評價顱腦損傷早期炎性反應損傷程度的重要指標。在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中，在多種炎性反應遞質(zhì)、細胞因子、缺血和缺氧再灌注或者應激反應等刺激下，ICAM-1表達也會明顯升高。NMDAR-1是中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮性氨基酸谷氨酸離子型受體，它介導的神經(jīng)元興奮毒性損傷與腦損傷的發(fā)生密切相關(guān)。水通道蛋白-4(AQP4)是一種膜通道蛋白家族成員，它在腦內(nèi)廣泛分布，對水跨膜轉(zhuǎn)運有高度選擇性，在腦外傷、腦出血、腦炎、腦水腫的過程中起著十分重要的作用。AQP4是膠質(zhì)細胞、腦腦脊液及血管間的水調(diào)節(jié)和轉(zhuǎn)運的重要物質(zhì)，對維持大腦水平衡起著重要作用，很有可能參與和介導了各種腦水腫的形成。

回神顆粒中人參性甘，微苦，平，歸肺、脾、心經(jīng)，能大補元氣，補脾益肺，安神益智，為君藥；石菖蒲辛苦燥溫通，芳香走竄，不但有開竅醒神之功，兼具化濕、豁痰，辟穢之效，鹿角味咸，性溫，歸肝、腎經(jīng)，具補腎助陽，強筋健骨之功，二者共為臣藥；其他藥均為佐使藥。全藥合用共奏補益五臟，化瘀祛痰、開竅通絡之功。

通過分析已有的文獻，回神顆粒在治療中度創(chuàng)傷性腦損傷、腦缺血和腦梗死、防治阿爾茨海默病有顯著效果，其作用機制包括改善腦組織缺血缺氧、抑制細胞凋亡保護腦細胞、促進損傷神經(jīng)修復、促進神經(jīng)功能和學習記憶功能、基因調(diào)控及基因表達等，對臨床的指導意義重大。但是，回神顆粒的藥味眾多，作用機制較復雜，對于其作用機制的研究還不夠深入、不夠透徹，尤其對中度創(chuàng)傷性腦損傷的研究機制相對不足，而且對有些疾病的作用機制還是空白?；厣耦w粒的藥理研究多是針對顆粒而言，沒有確切到具體的有效成分。所以應進一步研究回神顆粒的作用機制和有效成分，開展更多的藥理實驗，在分子水平和基因水平更深入地研究回神顆粒的作用機制，還可以更多的開展臨床試驗來深入研究回神顆粒的臨床療效，使回神顆粒的臨床研究更加完善，為回神顆粒的安全性評價和臨床研究提供更多科學數(shù)據(jù)。