郜李彬 曹征宇 顧韻莉 周亞輝 (上海市浦東新區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心 201201)
東云(Echeveria agavoidesLemaire)是景天科擬石蓮花屬多肉植物,原產(chǎn)于墨西哥多州。東云的形態(tài)特征是具有形狀鋒利的葉片,且其葉片形狀和排列方式與龍舌蘭屬植物相似,因此已成為近年來逐漸流行的一類觀賞植物,具有極高的觀賞價值和收藏價值。目前,東云大多采用葉插繁殖和分株繁殖的方式,但存在繁殖系數(shù)低、擴繁速度慢等問題,而利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)[1],可建立東云組織培養(yǎng)與快速擴繁體系,對滿足其市場需求具有現(xiàn)實意義。為此,本文擬以東云組培苗為試驗材料,通過采用不同種類和不同梯度的植物生長調(diào)節(jié)素,設(shè)計25種增殖培養(yǎng)基進行增殖試驗,以期篩選出適合東云組培苗增殖的培養(yǎng)基配方,從而提高東云的增殖系數(shù),達到快速繁殖的目的。
供試材料為誘導(dǎo)獲得的東云組培苗。
1.2.1 增殖培養(yǎng)
將誘導(dǎo)獲得的東云組培苗放在無菌操作臺上,按照2葉1心的標(biāo)準(zhǔn)切割分離成單株,然后轉(zhuǎn)接入25種增殖培養(yǎng)基中(均添加蔗糖3%、瓊脂5%,pH 5.8),每瓶接種1株,接種深度為0.5 cm,每個培養(yǎng)基配方重復(fù)10次,放入無菌培養(yǎng)室培養(yǎng),培養(yǎng)溫度(25±2) ℃,光照強度2000 lx,光照時間12 h/d。
1.2.2 培養(yǎng)基的篩選
供試的增殖培養(yǎng)基配方為:(1)MS(對照);(2)MS+NAA 0.1 mg/L;(3)MS+NAA 0.5 mg/L;(4)MS+NAA 1.0 mg/L ;(5)MS+NAA 2.0 mg/L;(6)MS+BA 0.5 mg/L;(7)MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L;(8)MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L;(9)MS+BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L;(10)MS+BA 0.5 mg/L+NAA 2.0 mg/L;(11)MS+BA 1.0 mg/L;(12)MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;(13)MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;(14)MS+BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L;(15)MS+BA 1.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L;(16)MS+BA 2.0 mg/L;(17)MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;(18)MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;(19)MS+BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L;(20)MS+BA 2.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L;(21)MS+BA 5.0 mg/L;(22)MS+BA 5.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;(23)MS+BA 5.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;(24)MS+BA 5.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L;(25)MS+BA 5.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L。
經(jīng)過35 d的增殖培養(yǎng)后,對各培養(yǎng)基配方中的東云組培苗進行觀察,每個處理中隨機選取5瓶進行增殖系數(shù)的統(tǒng)計,結(jié)果見表1、2。
由表1可知,培養(yǎng)基配方(1)—(5)中的東云組培苗均未有增殖現(xiàn)象出現(xiàn),增殖系數(shù)為0;其余20種增殖培養(yǎng)基配方中的東云組培苗均有不同程度的增殖生長,其中培養(yǎng)基配方(22)MS+BA 5.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L中的東云組培苗增殖系數(shù)最高,達5.0;培養(yǎng)基配方(23)、(12)的東云組培苗增殖效果也較理想,增殖系數(shù)分別達3.6、3.4,僅次于配方(22);培養(yǎng)基配方(11)、(13)、(18)、(24)、(16)、(25)、(17)的東云組培苗增殖效果差異不大,增殖系數(shù)在2.0~2.8之間;其余培養(yǎng)基配方的東云組培苗增殖效果不太理想,增殖系數(shù)都在1.8以下。由表2可知,培養(yǎng)基配方(22)的東云組培苗增殖系數(shù)在5%和1%差異顯著性水平下,均顯著高于其他培養(yǎng)基配方,表明該培養(yǎng)基的增殖效果最好。
表1 不同培養(yǎng)基配方東云組培苗增殖系數(shù)統(tǒng)計
表2 不同配方東云增殖系數(shù)新復(fù)極差比較
試驗結(jié)果表明:植物生長調(diào)節(jié)素BA和NAA對東云組培苗的增殖生長非常重要,培養(yǎng)基配方(1)—(5)中由于不含有植物生長調(diào)節(jié)素BA,接種在這5種配方內(nèi)的東云組培苗均未出現(xiàn)增殖生長現(xiàn)象。BA的濃度對東云組培苗的增殖最為重要,在BA濃度為5.0 mg/L時,東云組培苗的增殖效果最好,而較低的BA濃度(0.5 mg/L)促進東云組培苗分叉叢生,增殖效果不佳。適量濃度的NAA配合一定量的BA能更好地促進東云組培苗增殖生長,在NAA濃度為0.1 mg/L時,增殖效果最好。經(jīng)綜合考慮,東云組培苗的最佳增殖培養(yǎng)基配方為MS+BA 5.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,增殖系數(shù)可達5.0。