微波輔助提取陜產(chǎn)瞿麥揮發(fā)油工藝優(yōu)化及其抗氧化活性

張 爽,問娟娟,楊創(chuàng)勃2,高 潔,賴普輝

(1.陜西國(guó)際商貿(mào)學(xué)院醫(yī)藥學(xué)院,陜西西安 712046; 2.陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院,陜西咸陽 712000)

瞿麥別名高山瞿麥,為石竹科石竹屬植物瞿麥(DianthussuperbusL.)或石竹(DianthuschinensisL.)的干燥地上部分。瞿麥性味苦,寒;具有利尿通淋,破血通經(jīng)之功效[1],其主要成分有皂苷類、環(huán)肽類、黃酮類、有機(jī)酸類、揮發(fā)油類、色素及多糖等,現(xiàn)代藥理研究表明:瞿麥具有抗腫瘤、利尿、興奮子宮、抗菌、免疫調(diào)節(jié)及抗氧化等作用[2-3]。瞿麥?zhǔn)且环N觀賞植物,同時(shí)它又是一種常用的傳統(tǒng)中藥,主要用在一些復(fù)方制劑中。目前瞿麥被進(jìn)一步開發(fā)成茶飲品—石竹茶(藥材名瞿麥),廣泛流行于北京、上海、青島等城市。

揮發(fā)油是一類次生代謝物質(zhì),是多種中草藥中的重要組成部分,它具有抗炎、抗過敏、抗微生物、抗氧化、抗病毒及抗腫瘤等多種生理活性[4]。目前,對(duì)于揮發(fā)性物質(zhì)提取的方法有許多,除傳統(tǒng)的壓榨法、有機(jī)溶劑浸提法、水蒸氣蒸餾法外,還有一些新興方法如:超臨界萃取法[5]、微波輻射法[6]、超聲輔助提取法[7]、酶輔助法[8]、離子液體輔助萃取法[9]等。因提取方法不同,所得化學(xué)組分不同,對(duì)中藥的藥理藥效也會(huì)產(chǎn)生影響。目前關(guān)于瞿麥中的揮發(fā)油的成分已有報(bào)道,余建清等[10]采用水蒸氣蒸餾法提取瞿麥中揮發(fā)油,對(duì)其成分進(jìn)行了GC-MS聯(lián)用技術(shù)進(jìn)分析,證實(shí)瞿麥中含有三十多種揮發(fā)油成分,其主要組分為6,10,14-三甲基-2-十五酮、植物醇、醋酸牻牛兒酯、正己醇和醋酸金合歡酯等。

微波能是一種由離子遷移和偶極子轉(zhuǎn)動(dòng)而引起分子運(yùn)動(dòng)的非離子化輻射能,它是一種能直接作用到細(xì)胞內(nèi)部的加熱方式,微波輔助萃取可以使溶質(zhì)快速的進(jìn)入溶劑,使溶出的效率更快,有效成分的得率更高[4]。目前,文獻(xiàn)中關(guān)于瞿麥中揮發(fā)油的提取方法及抗氧化活性方面的研究未見報(bào)道,本實(shí)驗(yàn)采用響應(yīng)曲面法對(duì)微波輔助提取陜產(chǎn)瞿麥中的揮發(fā)油進(jìn)行了工藝優(yōu)化,同時(shí)對(duì)微波輔助提取得到的瞿麥中的揮發(fā)油和相同條件下以超聲(功率120 W)輔助提取得到的揮發(fā)油的抗氧化活性進(jìn)行了研究,以期為瞿麥在醫(yī)藥、食品、工業(yè)等方面的開發(fā)和應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

瞿麥 陜西省眉縣藥材總公司,經(jīng)鑒定為石竹科植物瞿麥(DianthussuperbusL.)的帶花全草;正己烷、焦性沒食子酸、無水硫酸鈉、磷酸氫二鈉、氯化鈉、濃鹽酸、磷酸二氫鈉 均為國(guó)產(chǎn)分析純;三羥甲基氨基甲烷(Tris) 北京華業(yè)寰宇化工有限公司;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH) 上海如吉生物公司;2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT) 上海佳倫生物科技有限公司。

篩子(40目) 浙江上虞市道墟張興紗篩廠;SHZ-DШ真空泵 河南省予華儀器有限公司;TGL-15B離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠;電熱鼓風(fēng)干燥箱 上?，槴\實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;微波萃取儀XH100B 北京詳鋯發(fā)展有限公司;FA2004精密電子天平(萬分之一) 上海越平科學(xué)儀器有限公司;UV2400紫外可見分光光度計(jì) 天津精密科學(xué)儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 陜產(chǎn)瞿麥揮發(fā)油的提取 稱取5.0000 g已處理好的瞿麥粉末(過40目篩),將有機(jī)溶劑按一定比例和藥材一起加入微波萃取儀中,根據(jù)實(shí)驗(yàn)的要求在一定液料比、功率、時(shí)間條件下,回流提取后冷卻至室溫。抽濾,將濾液用無水碳酸鈉進(jìn)行干燥,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀適量回收溶劑(溫度在溶劑沸點(diǎn)以下),水浴蒸干,即得陜產(chǎn)瞿麥揮發(fā)油。

1.2.2 不同溶劑對(duì)陜產(chǎn)瞿麥揮發(fā)油得率的影響 準(zhǔn)確稱取已處理好的瞿麥粉末(過40目篩)5.0000 g,分別采用不同提取溶劑(乙醚、正己烷、石油醚)對(duì)瞿麥進(jìn)行揮發(fā)油微波輔助提取,微波溫度為25 ℃,時(shí)間為6 min,功率為300 W,液料比為20∶1 mL/g,根據(jù)瞿麥揮發(fā)油的得率確定最佳溶劑。

1.2.3 微波輔助提取陜產(chǎn)瞿麥中揮發(fā)油的單因素實(shí)驗(yàn) 以正己烷為提取溶劑,選定液料比、提取溫度、提取功率、提取時(shí)間四個(gè)因素,以瞿麥中揮發(fā)油的得率為考察指標(biāo),進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)。

1.2.3.1 液料比對(duì)陜產(chǎn)瞿麥揮發(fā)油得率的影響 精密稱取5.0000 g瞿麥粉末于三角瓶中,將微波功率調(diào)至300 W,在30 ℃的條件下,微波輔助提取6 min,考察不同液料比(10∶1、15∶1、20∶1、25∶1、30∶1 mL/g)對(duì)瞿麥樣品中揮發(fā)油得率的影響。

1.2.3.2 提取溫度對(duì)陜產(chǎn)瞿麥揮發(fā)油得率的影響 精密稱取5.0000 g瞿麥粉末于三角瓶中,設(shè)定提取液料比20∶1 mL/g,在微波功率為300 W的條件下提取6 min,考察不同提取溫度(30、35、40、45、50 ℃)對(duì)瞿麥樣品中揮發(fā)油得率的影響。

1.2.3.3 提取時(shí)間對(duì)陜產(chǎn)瞿麥揮發(fā)油得率的影響 精密稱取5.000 g瞿麥粉末于三角瓶中,設(shè)定提取液料比20∶1 mL/g,在微波功率為300 W、提取溫度為45 ℃的條件下,考察不同提取時(shí)間(3、4、6、8、10、12 min)對(duì)瞿麥樣品中揮發(fā)油得率的影響。

1.2.3.4 微波功率對(duì)陜產(chǎn)瞿麥揮發(fā)油得率的影響 精密稱取5.0000 g瞿麥粉末于三角瓶中,設(shè)定液料比為20∶1 mL/g,溫度45 ℃,提取時(shí)間為6 min,考察微波功率分別為(300、400、500、600、700 W)時(shí)對(duì)瞿麥樣品中揮發(fā)油得率的影響。

1.2.4 響應(yīng)面試驗(yàn) 在單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上,根據(jù)響應(yīng)面 Box-Behnken設(shè)計(jì)原理,以液料比、功率、溫度為自變量,瞿麥揮發(fā)油得率為響應(yīng)值,采用3因子3水平的響應(yīng)面分析法,利用Design Expert 10.0.7統(tǒng)計(jì)分析軟件建立回歸模型,確定提取瞿麥中揮發(fā)油的最佳工藝參數(shù)。試驗(yàn)因素設(shè)計(jì)如表1。

表1 響應(yīng)面試驗(yàn)因素水平表Table 1 Factors and levels of response surface experiment

1.2.5 陜產(chǎn)瞿麥揮發(fā)油得率的測(cè)定 按照1.2.1的提取方法,精密稱定提取得到的揮發(fā)油質(zhì)量,計(jì)算揮發(fā)油得率,其計(jì)算公式為:

陜產(chǎn)瞿麥揮發(fā)油得率(%)=B/A×100

式中：A:瞿麥粉末的質(zhì)量;B:揮發(fā)油的質(zhì)量。

1.2.6 瞿麥中揮發(fā)油體外抗氧化活性實(shí)驗(yàn) 在優(yōu)選出最優(yōu)工藝基礎(chǔ)上,對(duì)微波輔助提取得到的瞿麥中的揮發(fā)油,和同等條件下超聲(功率120 W)輔助提取得到的瞿麥中揮發(fā)油的抗氧化活性與BHT的抗氧化活性進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)。

1.2.6.1 DPPH·清除率的測(cè)定 采用比色法測(cè)定瞿麥中揮發(fā)油的清除DPPH·的能力[11-12]。分別將微波輔助提取和超聲輔助提取的揮發(fā)油用少量的正己烷溶解,配成不同濃度梯度的瞿麥揮發(fā)油溶液,取不同濃度的瞿麥揮發(fā)油溶液2.0 mL,置于10 mL具塞比色管中,加入3.0 mL預(yù)先配制好的0.04 mg/mL DPPH·溶液,常溫避光反應(yīng)30 min,在波長(zhǎng)(517 nm)處測(cè)定瞿麥揮發(fā)油的吸光值A(chǔ)實(shí)驗(yàn);將3.0 mL正己烷加到2.0 mL不同濃度的瞿麥揮發(fā)油樣品中做樣品對(duì)照,測(cè)其吸光值A(chǔ)對(duì)照;將2.0 mL正己烷加到3.0 mL的DPPH·溶液中作空白對(duì)照,測(cè)其吸光度A空白,BHT做陽性對(duì)照,每個(gè)樣品進(jìn)行三次平行實(shí)驗(yàn),取平均值,計(jì)算清除率。

清除率(%)=[A空白-(A實(shí)驗(yàn)-A對(duì)照)]/A空白×100

清除率(%)=(A空白-A實(shí)驗(yàn))/A空白×100

1.3 數(shù)據(jù)處理

每個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果均做三次平行實(shí)驗(yàn),采用SPSS Statistics 17.0計(jì)算平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差及抗氧化實(shí)驗(yàn)的IC50值,響應(yīng)曲面的數(shù)據(jù)采用Design Expert 10.0.7分析處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溶劑對(duì)陜產(chǎn)瞿麥揮發(fā)油得率的影響

由圖1可以看出,乙醚作為溶劑提取瞿麥中的揮發(fā)油時(shí)得率最高,正己烷次之,揮發(fā)油得率最低的是石油醚。但是考慮到乙醚的沸點(diǎn)較低(沸點(diǎn)為34.6 ℃),易揮發(fā),溶劑不容易回收,因此用沸點(diǎn)較高的正己烷(沸點(diǎn)69 ℃)作為提取溶劑。

圖1 溶劑對(duì)揮發(fā)油得率的影響Fig.1 Effect of solvents on yield of volatile oil

2.2 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 液料比對(duì)陜產(chǎn)瞿麥揮發(fā)油得率的影響 由圖2可知,揮發(fā)油的得率在液料比為20∶1 mL/g之前,隨著液料比的增加而逐漸上升,這可能是因?yàn)閾]發(fā)油的浸出受溶劑用量的影響,導(dǎo)致藥材內(nèi)外部之間提取成分溶液產(chǎn)生濃度差,有利于揮發(fā)油發(fā)生傳質(zhì)過程,快速溶出。在液料比較低時(shí),短時(shí)間內(nèi)揮發(fā)油的溶出達(dá)到平衡,不利于揮發(fā)油的進(jìn)一步溶出,但液料比太大時(shí)受溶解度的約束作用變小,且溶劑用量過多導(dǎo)致后續(xù)蒸發(fā)困難[14]。因此,確定液料比為20∶1 mL/g。

圖2 液料比對(duì)揮發(fā)油得率的影響Fig.2 Effect of liquid-to-material ratios on yield of volatile oil

2.2.2 提取溫度對(duì)陜產(chǎn)瞿麥揮發(fā)油得率的影響 由圖3可知,當(dāng)溫度升高時(shí),提取的瞿麥中揮發(fā)油的得率逐漸上升,當(dāng)提取溫度達(dá)到45 ℃時(shí)揮發(fā)油得率達(dá)到最高值,之后呈現(xiàn)下降的趨勢(shì),這可能是由于隨著提取溫度升高,細(xì)胞內(nèi)部壓力超過了細(xì)胞壁膨脹的能力,致使細(xì)胞破裂,導(dǎo)致?lián)]發(fā)油自由流出,被周圍溶劑溶解,使揮發(fā)油的提取得率逐漸升高,但隨著溫度繼續(xù)上升,導(dǎo)致部分有效成分揮發(fā)或降解,得率反而下降。所以提取溫度選擇45 ℃較為合適。

2.2.3 提取時(shí)間對(duì)陜產(chǎn)瞿麥揮發(fā)油得率的影響 由圖4可知,隨著提取時(shí)間的增加揮發(fā)油得率呈先增加后減小的變化趨勢(shì),但從圖中揮發(fā)油得率的變化數(shù)值來看,揮發(fā)油的得率隨時(shí)間的增加變化不大,當(dāng)提取時(shí)間為6 min時(shí)揮發(fā)油得率最高。這可能是因?yàn)槲⒉ㄝ椛渥饔眉铀倭吮惠腿∥镉行С煞窒蜉腿∪軇┙缑鏀U(kuò)散,因而在一定時(shí)間內(nèi)揮發(fā)油的得率會(huì)呈現(xiàn)升高的趨勢(shì),但在其它條件不變的情況下,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),瞿麥中的揮發(fā)油可能逐漸被提取完全,因此揮發(fā)油的得率變化不大,將提取過程中提取時(shí)間確定為6 min,在后續(xù)響應(yīng)曲面法優(yōu)選最佳提取工藝時(shí)不再考察提取時(shí)間。

圖4 微波時(shí)間對(duì)揮發(fā)油得率的影響Fig.4 Effect of microwave time on the yield of volatile oil

2.2.4 微波功率對(duì)陜產(chǎn)瞿麥揮發(fā)油得率的影響 由圖5可知,當(dāng)微波功率增加時(shí),瞿麥中揮發(fā)油的得率逐漸上升,當(dāng)功微波率達(dá)到500 W時(shí)揮發(fā)油的得率達(dá)到最高,之后隨微波功率的增加揮發(fā)油的得率逐漸下降,其原因可能是,這可能是因?yàn)楫?dāng)微波輻射功率越大時(shí),越有利于被萃取物有效成分向萃取溶劑界面擴(kuò)散,因此,當(dāng)功率增大時(shí)會(huì)使揮發(fā)油的得率增大,但微波功率增大的同時(shí),溶劑的溫度也隨之升高,在高溫下一部分揮發(fā)油被揮發(fā),從而使其提取率下降[6]。因此微波功率選擇500 W。

圖5 微波功率對(duì)揮發(fā)油得率的影響Fig.5 Effect of microwave power on the yield of volatile oil

2.3 響應(yīng)曲面試驗(yàn)結(jié)果

2.3.1 響應(yīng)曲面優(yōu)化試驗(yàn) 在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,以液料比(A)、微波功率(B)、提取溫度(C)三個(gè)因素為自變量,瞿麥揮發(fā)油得率為響應(yīng)值,利用Design Expert 10.0.7分析軟件,采用三因素三水平的響應(yīng)曲面法優(yōu)化瞿麥中揮發(fā)油的提取工藝,實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見表2。

表2 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)結(jié)果Table 2 Results of response surface optimization experiment

2.3.2 響應(yīng)面回歸模型建立與分析 用Design Expert 10.0.7統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析,分析結(jié)果見表3。經(jīng)擬合得到的三元二次回歸方程為:

揮發(fā)油得率=-56.20375+0.86095A+0.062400B+1.56095C-6.05000E-004AB+2.60000E-003AC-5.50000E-005BC-0.017280A2-4.94500E-005B2-0.017280C2

表3 方差分析表Table 3 Variance analysis table

2.3.3 響應(yīng)面交互作用分析 根據(jù)Design Expert 10.0.7統(tǒng)計(jì)分析軟件可得到響應(yīng)曲面3D圖與等高圖曲線見圖6～圖8。圖6～圖8直觀地反映出各因素之間交互作用對(duì)陜產(chǎn)瞿麥中揮發(fā)油提取率的影響。響應(yīng)曲面3D圖中曲線的彎曲度反應(yīng)了因素對(duì)響應(yīng)值的影響,彎曲度越大影響越顯著。等高圖的形狀反應(yīng)了兩因素交互作用對(duì)響應(yīng)值的影響,等高圖為圓形表示不顯著,橢圓形時(shí)表示顯著[16]。圖6表示在最佳提取溫度條件下,液料比和微波功率兩因素的交互作用對(duì)陜產(chǎn)瞿麥中揮發(fā)油得率的影響。圖中液料比的曲線較為平緩,表明液料比對(duì)提取率的影響較弱,微波功率較液料比對(duì)提取率的影響較強(qiáng),等高線圖為橢圓形說明微波功率與液料比交互作用對(duì)揮發(fā)油得率的影響較為極為顯著,與方差分析結(jié)果一致。當(dāng)液料比在20∶1 mL/g、微波功率為500 W附近時(shí),揮發(fā)油的得率較大。圖7表示在最佳微波功率條件下,液料比和提取溫度兩因素的交互作用對(duì)陜產(chǎn)瞿麥中揮發(fā)油得率的影響。圖中液料比的曲線較提取溫度平緩,表明提取溫度對(duì)揮發(fā)油得率的影響較液料比更顯著。當(dāng)液料比在20∶1 mL/g、提取溫度為45 ℃附近時(shí),揮發(fā)油的得率較大。圖8表示在最佳液料比的條件下,微波功率和提取溫度兩因素的交互作用對(duì)陜產(chǎn)瞿麥中揮發(fā)油得率的影響。圖中提取溫度的曲線較提取微波功率平緩,表明微波功率對(duì)揮發(fā)油得率的影響較提取溫度更顯著,隨著微波功率的升高揮發(fā)油的得率呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)。當(dāng)微波功率在500 W、提取溫度為45 ℃附近時(shí),揮發(fā)油的得率較大,與方差分析結(jié)果一致。

圖6 液料比和微波功率交互作用對(duì)揮發(fā)油得率的影響Fig.6 Effect of interaction of liquid-to-material ratio and microwave power on volatile oil yield

圖8 微波功率和提取溫度交互作用對(duì)揮發(fā)油得率的影響Fig.8 Effect of Interaction between microwave power and extraction temperature on volatile oil yield

2.3.4 驗(yàn)證試驗(yàn) 求導(dǎo)回歸方程,得到響應(yīng)曲面法優(yōu)化陜產(chǎn)瞿麥中揮發(fā)油提取工藝的條件為:微波功率483.713 W,液料比19.8954∶1 mL/g,提取溫度45.8905 ℃,理論預(yù)測(cè)揮發(fā)油得率為3.27%?？紤]到實(shí)際實(shí)驗(yàn)情況,工藝條件修正為:微波功率500 W,液料比20∶1 mL/g,提取溫度46 ℃,在此實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行三次平行實(shí)驗(yàn),測(cè)定揮發(fā)油得率,三次結(jié)果的平均值為3.19%±0.46%。與模型預(yù)測(cè)值總體吻合,說明此模型能較好地預(yù)測(cè)陜產(chǎn)瞿麥中揮發(fā)油的得率,用響應(yīng)曲面法優(yōu)化出的工藝是合理可靠的。

2.4 瞿麥揮發(fā)油抗氧化活性的研究

2.4.1 清除DPPH·的測(cè)定結(jié)果 DPPH·是具有單電子的穩(wěn)定自由基,當(dāng)將具有氧化性的物質(zhì)加到體系中時(shí),該物質(zhì)就會(huì)和DPPH·的單電子配對(duì),使其吸光度值減小,計(jì)算清除率,進(jìn)而判斷抗氧化活性的大小[11]。此方法被國(guó)內(nèi)外廣泛用于天然抗氧化劑的篩選,圖9的變化趨勢(shì)顯示了通過微波輔助提取得到的瞿麥中揮發(fā)油和超聲輔助提取得到的瞿麥中揮發(fā)油清除DPPH·的能力強(qiáng)弱,并以BHT作為對(duì)照。陜產(chǎn)瞿麥中的揮發(fā)油對(duì)DPPH·的清除能力在實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi)與濃度呈較好的量效關(guān)系。濃度在0.4～0.9 mg/mL之間,超聲輔助提取和微波輔助提取得到的揮發(fā)油對(duì)DPPH·的清除率迅速上升,清除率分別達(dá)到了60.08%和51.12%。但濃度在0.9 mg/mL之后,超聲輔助提取得到的揮發(fā)油對(duì)DPPH·的清除率變化緩慢,而微波輔助提取得到揮發(fā)油對(duì)DPPH·的清除率繼續(xù)上升,直到濃度到達(dá)1.0 mg/mL,清除率達(dá)到61.02%時(shí),數(shù)據(jù)變化才趨于平緩,但最終兩種不同提取方法得到揮發(fā)油對(duì)DPPH·的清除率相當(dāng)。清除DPPH·能力的大小通常用半清除率(IC50)表示,IC50是當(dāng)清除率達(dá)到50%時(shí)所需要的抗氧劑濃度[13],超聲輔助提取得到的揮發(fā)油的IC50值為0.73 mg/mL,微波輔助提取得到的揮發(fā)油的IC50值為0.82 mg/mL。說明超聲輔助提取得到的揮發(fā)油比微波輔助提取得到的揮發(fā)油對(duì)DPPH·的清除能力強(qiáng)。另外,兩種不同提取方式獲得的揮發(fā)油對(duì)DPPH·的清除率均低于BHT對(duì)DPPH·的清除率。說明陜產(chǎn)瞿麥中的揮發(fā)油對(duì)DPPH·有一定的清除能力,但沒有BHT的清除能力強(qiáng)。

圖9 不同提取方法揮發(fā)油對(duì)DPPH·的清除能力的影響Fig.9 Effect of volatile oil extracted by different methods on DPPH· scavenging ability

圖10 不同提取方法揮發(fā)油對(duì)超氧陰離子自由基的清除能力Fig.10 Effect of volatile oils extracted by different methods on superoxide anion radicals scavenging ability

3 結(jié)論

通過響應(yīng)曲面法對(duì)微波輔助提取陜產(chǎn)瞿麥中的揮發(fā)油進(jìn)行了條件的優(yōu)選,建立了合理可靠的回歸模型,其模型優(yōu)選出的微波提取陜產(chǎn)瞿麥中揮發(fā)油的最優(yōu)工藝:微波功率500 W,液料比20∶1 mL/g,提取溫度 46 ℃,在此實(shí)驗(yàn)條件下得到的揮發(fā)油得率可達(dá)3.19%±0.46%,與模型預(yù)測(cè)的基本相符。

陜產(chǎn)瞿麥中的揮發(fā)油對(duì)DPPH·具有一定的清除能力,從半抑制濃度IC50值來看,超聲輔助提取得到的揮發(fā)油的IC50值為0.73 mg/mL,微波輔助提取得到的揮發(fā)油的IC50值為0.82 mg/mL。說明超聲輔助提取得到的揮發(fā)油對(duì)DPPH·自由基的清除能力略大于微波輔助提取得到的揮發(fā)油。

對(duì)于以上抗氧化實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,究其原因可能與兩種不同的提取方法的機(jī)制有關(guān)。超聲輔助提取法是利用超聲波穿透強(qiáng)的優(yōu)勢(shì),利用擊碎、擴(kuò)散、機(jī)械振動(dòng)等簡(jiǎn)單物理方法,達(dá)到提取分離目的的物理破碎過程。微波輔助提取法是利用微波能的離子遷移和偶極子轉(zhuǎn)動(dòng)而引起分子運(yùn)動(dòng),同時(shí),微波能能直接作用到細(xì)胞內(nèi)部,極性不同的分子吸收微波能力的不同,可使基體物質(zhì)的某些組分被選擇性加熱,使被萃取物質(zhì)從基體或體系中分離，從而導(dǎo)致兩種方式提取得到的揮發(fā)油的結(jié)構(gòu)或極性略有不同,對(duì)不同自由基的清除能力不同。因此,在評(píng)價(jià)中草藥的抗氧化活性時(shí),應(yīng)采用多種提取方法及多種抗氧化活性評(píng)價(jià)方法進(jìn)行綜合評(píng)判。