肉仔雞胚期給養(yǎng)研究進展

■齊廣海 張海軍 馬友彪 武書庚 王 晶 楊林林

（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部飼料生物技術(shù)重點開放實驗室中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，北京100081）

隨著遺傳選育和飼料營養(yǎng)技術(shù)的進步，現(xiàn)代肉仔雞生長速度加快，出欄時間不斷提前，由此孵化期在整個生命周期中的比重不斷加大，孵化期的重要性與日俱增。胚蛋給養(yǎng)技術(shù)的進展，可以在孵化期進行營養(yǎng)干預(yù)，讓肉仔雞生長贏在起跑線上，可在較大程度上決定其出雛后的全期生長和雞體健康，提高養(yǎng)殖效益。本文從胚蛋給養(yǎng)的必要性出發(fā)，首先介紹胚蛋營養(yǎng)的概念和方式，然后按照胚期給養(yǎng)營養(yǎng)物質(zhì)的種類進行劃分，對胚蛋給養(yǎng)的研究及應(yīng)用進行了綜述，最后對胚蛋給養(yǎng)的研究方向和應(yīng)用前景進行了展望，旨在為肉雞胚蛋給養(yǎng)的研究和應(yīng)用提供借鑒和參考。

1 肉仔雞出殼前后生理和功能的變化

1.1 肉仔雞出殼前后體內(nèi)營養(yǎng)狀態(tài)的變化

肉仔雞出殼前后能量供給不足問題突出。與哺乳動物不同，家禽的胚胎發(fā)育過程與母體分離，胚胎發(fā)育需要的營養(yǎng)只能來源于種蛋。在孵化后期，胚胎小腸和肝臟的快速發(fā)育、肺呼吸和破殼活動等都需要消耗大量的能量，而種蛋內(nèi)的能量儲備有限，從孵化后期到進食前，雛禽一直處于能量緊缺狀態(tài)[1]。孵化后期能量不足時，胸肌中的蛋白質(zhì)會發(fā)生動員為糖異生提供氨基酸底物[2]，胸肌中肌纖維束橫截面積和肌纖維橫截面積會顯著下降，采食后骨骼肌才恢復(fù)生長。孵化后期胚胎營養(yǎng)供應(yīng)能力和尿囊的氧供應(yīng)能力已達到極限[1]，能量入不敷出，加之新生雛禽腸道發(fā)育不完全，不能充分利用采食的飼料中營養(yǎng)物質(zhì)，導(dǎo)致腸道發(fā)育減緩，礦物質(zhì)吸收不足，也會限制骨骼發(fā)育[3]。為了緩解肉仔雞孵化后期能量不足造成的肌肉降解和生長受阻等問題，有必要在孵化期即為胚胎發(fā)育提供營養(yǎng)。

1.2 肉仔雞出殼前后營養(yǎng)來源的變化及開食延遲

肉仔雞出殼前后經(jīng)歷內(nèi)源卵黃囊供養(yǎng)向外源飼料供養(yǎng)的轉(zhuǎn)變。雛雞出殼時卵黃囊約占體重的15%，出殼后幾天內(nèi)雛雞所需營養(yǎng)主要來源于卵黃囊[4]。雖然卵黃囊是維持雛雞生存的營養(yǎng)來源，而雛雞消化系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)的生長發(fā)育主要依賴于外源性早期飼料營養(yǎng)。剛出殼的雛雞消化器官在體積和功能上快速增長和發(fā)育，消化腺逐漸成熟且消化酶分泌增多，為適應(yīng)由利用卵黃囊的內(nèi)源性營養(yǎng)向利用飼料提供的外源性營養(yǎng)的轉(zhuǎn)換[5]?？焖侔l(fā)育的消化系統(tǒng)和營養(yǎng)來源供應(yīng)轉(zhuǎn)變對雛雞造成應(yīng)激，而胚胎期及早營養(yǎng)供給有助于肉雞順利渡過該階段。

生產(chǎn)中普遍存在的開食延遲現(xiàn)象對雛雞早期發(fā)育不利。一方面出殼跨度導(dǎo)致開食延遲，即所有先出殼的雛雞要等待大部分出殼后才能從孵化箱中出來，另外進行計數(shù)分裝、性別鑒定、接種疫苗等處理的時間，加上運輸?shù)臅r間，到達飼養(yǎng)場開始飼喂大都在出殼后的24～48 h，甚至72 h 之后。開食延遲造成雛雞動用體內(nèi)貯存的營養(yǎng)以維持機體的代謝和保持體溫，從而造成體重下降，消化器官發(fā)育不良，免疫力下降以及死淘率增加[6]。為了消除開食延遲對肉仔雞出殼后生長和健康的負面影響，有必要在孵化后期為胚胎提供營養(yǎng)。

2 肉仔雞超早期營養(yǎng)——胚蛋給養(yǎng)

2.1 胚蛋給養(yǎng)的概念

胚蛋給養(yǎng)（in ovo feeding，IOF），也稱卵內(nèi)給養(yǎng)或超早期營養(yǎng)，是指將外源營養(yǎng)液注射到家禽胚蛋中的早期給養(yǎng)方式。胚蛋給養(yǎng)起源于雞胚接種技術(shù)，將疫苗注射到家禽種蛋中，可使雛禽在出殼時至出殼后幾天就具有特異性主動免疫力，避免雛禽早期感染特定傳染病。近年來雞胚接種技術(shù)已經(jīng)迅速發(fā)展并得到了廣泛應(yīng)用，尤其在美國，超過90%的肉雞孵化場采用Embrex 公司等4 家公司研發(fā)的全自動胚蛋注射機來進行雞胚接種[7]。雞胚接種的普及也推動了胚蛋給養(yǎng)研究的不斷發(fā)展與深入，使得家禽早期的營養(yǎng)調(diào)控技術(shù)研究被提前到胚胎發(fā)育時期，成為一種極具應(yīng)用前景的新技術(shù)。目前，國內(nèi)外營養(yǎng)學(xué)家開展了大量的胚蛋給養(yǎng)研究，美國、以色列、波蘭和印度在胚蛋給養(yǎng)領(lǐng)域研究活躍，多數(shù)研究證實胚蛋給養(yǎng)對于增加雛雞糖原儲備，改善腸道發(fā)育，促進肌肉和骨骼生長等方面具有顯著效果。早期給養(yǎng)的營養(yǎng)素范圍也在不斷探索和擴大之中[7-10]。目前，大量研究表明，胚蛋給養(yǎng)碳水化合物、氨基酸、微量元素、維生素等均能對雛雞的早期發(fā)育提供裨益。

2.2 胚蛋給養(yǎng)的方法

胚蛋給養(yǎng)的注射部位和時間是影響胚蛋給養(yǎng)效果的關(guān)鍵因素，部位和時間的選擇應(yīng)結(jié)合胚胎在不同孵化階段發(fā)育的生理特征。胚蛋注射部位有：胚蛋的羊膜腔、氣室、卵白、卵黃囊和尿囊等，營養(yǎng)物質(zhì)經(jīng)以上部位給養(yǎng)后，均可不同程度地被胚胎吸收和利用，促進胚胎發(fā)育及出殼后生長[11-14]。Uni等(2003)[15]深入研究了家禽孵化后期（肉仔雞為孵化第17.5 d，火雞第23 d）羊膜腔注射的方法，并申請了專利，結(jié)果表明，經(jīng)羊膜腔給養(yǎng)蛋白質(zhì)或碳水化合物，可提高雛禽出殼重3%～7%，并可增加最終出欄體重。當前，羊膜腔注射在隨著自動胚蛋注射機的應(yīng)用得到了普遍的認同，多數(shù)報道選擇的時間是在孵化第17～19 d。也有報道認為，羊膜腔注射操作要求高，容易出現(xiàn)機械損傷，尤其是在采用人工注射的研究中。通過氣室注射外源物質(zhì)，因滲透作用被胚胎吸收利用，可最大限度地降低注射液體對胚胎產(chǎn)生的應(yīng)激，其促進雛雞胚胎發(fā)育和個體生長的作用已在較多文獻中得到證實[16-18]。氣室注射操作更為簡單、方便，對設(shè)備要求不高。0～4 胚齡氣室過小，不宜操作，而隨著胚胎的發(fā)育，15 胚齡以后注射到氣室內(nèi)會降低效果，故選擇氣室注射的較佳時間段是7～14 胚齡[19]。此外，除注射部位和時間之外，注射液的體積（多選用0.1～1 ml）、滲透壓以及消毒措施等也是影響胚蛋給養(yǎng)效果的重要因素。

3 不同營養(yǎng)物質(zhì)在胚蛋給養(yǎng)中的研究與應(yīng)用

3.1 胚蛋給養(yǎng)碳水化合物

胚蛋給養(yǎng)碳水化合物可以增加雞胚的能量儲備，促進雛雞腸道發(fā)育。葡萄糖和二糖類等碳水化合物是最早應(yīng)用于胚蛋給養(yǎng)的營養(yǎng)素，可以彌補孵化后期雞胚能量儲備的不足，改善體內(nèi)糖代謝能力[18，20-21]。Zhai 等[22-23]研究表明向孵化18 胚齡雞胚羊膜腔給養(yǎng)0.4 ml 碳水化合物混合液（葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和糊精）不影響孵化率，可增加出殼體重、肝臟糖原和葡萄糖濃度。Zhang 等[24]向愛拔益加肉仔雞種蛋每枚注射0.4 ml 濃度為15 mg/l一水肌酸和62.5 mg/l葡萄糖溶液，未影響孵化率和消化器官指數(shù)，可提高第19.5 胚齡雞胚肝臟糖原和肌肉肌酸、磷酸肌酸含量，有利于胚胎發(fā)育和后期生長?？茖毴庾须u胚蛋給養(yǎng)葡萄糖可顯著提高出殼重和生長期生產(chǎn)性能，然而注射組種蛋孵化率明顯降低[12]。與以上結(jié)果不同，羅斯308 肉仔雞胚蛋給養(yǎng)每枚70 μg 或140 μg D-葡萄糖對種蛋孵化率、生長各階段體重、采食量、飼料效率以及胴體組成均無明顯影響[25]。此外，胚蛋給養(yǎng)碳水化合物對禽類消化道功能完善以及骨骼肌生長發(fā)育也有較多報道。Smirnow 等[26]報道，注射1 ml 碳水化合物（15 g/l麥芽糖、15 g/l蔗糖和150 g/l糊精）提高了肉仔雞出殼當天腸道內(nèi)粘液素mRNA的表達豐度，說明注射碳水化合物促進了小腸杯狀細胞的發(fā)育，對小腸功能發(fā)育起到了促進作用。

除了營養(yǎng)性碳水化合物，一些功能性寡糖也可應(yīng)用于胚蛋給養(yǎng)。據(jù)報道，甘露寡糖可以作為二糖酶的特異性底物直接促進二糖酶的活性。肉仔雞胚胎17 胚齡羊膜腔給養(yǎng)每枚0.6 mg甘露寡糖，出殼時雛雞腸道蔗糖酶和氨基肽酶比對照組分別提高了36%和44%，成熟腸道細胞的數(shù)量增加，腸道上皮細胞屏障功能改善[27]?？茖毴庾须u胚蛋12 胚齡氣室注射每枚4.5 mg棉籽糖不影響雞的生長性能和胴體組成，可改善小腸絨毛形態(tài)，提高免疫機能[17]。碳水化合物可通過刺激腸上皮細胞增殖，增加腸絨毛表面積，提高刷狀緣水解酶活性，上調(diào)消化吸收相關(guān)基因mRNA表達水平，進而促進孵化后期小腸的發(fā)育和出殼時小腸功能的成熟[28]。胚蛋注射二糖可以抑制泛素蛋白酶體途徑和自噬溶酶體途徑關(guān)鍵基因的表達，緩解肌肉蛋白質(zhì)的降解[29]。由此可見，碳水化合物一方面提供糖類物質(zhì)作為直接的能量來源，另一方面作為活性營養(yǎng)因子刺激腸道的快速發(fā)育和功能。

3.2 胚蛋給養(yǎng)氨基酸

胚蛋給養(yǎng)氨基酸可促進肉仔雞腸道發(fā)育和早期生長。早期研究表明，肉仔雞胚胎7胚齡經(jīng)由卵黃囊給養(yǎng)氨基酸復(fù)合液可提高雛雞的出殼重[30]。胚蛋給養(yǎng)氨基酸方面，關(guān)于精氨酸、谷氨酰胺、蘇氨酸和蛋氨酸的文獻較多。大量研究表明，胚蛋給養(yǎng)精氨酸可促進消化器官發(fā)育，改善家禽生產(chǎn)性能[31-33]。肉仔雞胚蛋入孵前給養(yǎng)每枚10 mg 精氨酸可提高孵化率，在9 胚齡通過羊膜腔給養(yǎng)每枚10 mg 精氨酸能夠增加14 胚齡胚胎和出殼肉仔雞回腸的長度和重量[34]。肉仔雞胚蛋在18 胚齡經(jīng)羊膜腔給養(yǎng)精氨酸可提高出殼重，且給養(yǎng)“精氨酸+鳥氨酸”營養(yǎng)液可顯著提高肉仔雞7日齡體重[31]。胚蛋給養(yǎng)精氨酸的促生長作用與提高肝臟生長激素和胰島素樣生長因子基因表達有關(guān)[35]。Gao等[33]研究指出，17.5胚齡羊膜腔給養(yǎng)精氨酸（每枚6 mg），可以促進肉仔雞十二指腸發(fā)育，提高消化酶活性，增加胃饑餓素、血管活性腸肽和胰高血糖素樣肽-2的分泌，進而促進出雛后1周生長性能。

胚蛋給養(yǎng)谷氨酰胺（Gln）可調(diào)控肉仔雞的腸道發(fā)育和肌肉生長。肉仔雞胚蛋在18胚齡經(jīng)羊膜腔給養(yǎng)Gln，可促進出雛早期小腸黏膜發(fā)育，增加免疫器官指數(shù)，提高7 日齡體重和血漿中甲狀腺激素水平[36-38]。此外，Gln也可與其他營養(yǎng)物質(zhì)共同注射：于孵化23 d經(jīng)羊膜注射“雙糖+Gln”營養(yǎng)液可提高櫻桃谷肉鴨腸道蛋白含量，顯著增加空腸肌層厚度，該作用可能與Gln促進蛋白合成、抑制蛋白分解有關(guān)，并且胚蛋給養(yǎng)組1～7 日齡體增重顯著增加[39]。另有研究表明，胚蛋給養(yǎng)“金剛石納米顆粒+Gln”營養(yǎng)液可促進肉仔雞胸肌細胞增殖和分化[40]。

肉仔雞胚蛋給養(yǎng)蘇氨酸（Thr）和含硫氨基酸也能促進生長和調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。于14胚齡時每枚肉仔雞胚蛋經(jīng)卵黃囊給養(yǎng)10～40 mg Thr，30 mg Thr 顯著提高出雛重，10、20 mg 和40 mg Thr 顯著提高了出殼后1 周的飼料效率，20～30 mg Thr 提高了肉仔雞體液免疫反應(yīng)[41]。胚蛋給養(yǎng)Thr 和含硫氨基酸，提高了出雛后經(jīng)綿羊紅細胞注射刺激后血液中白細胞介素（IL）-2、IL-4 和腫瘤壞死因子-α表達，降低IL-12 和干擾素-γ基因表達[35]。

β-羥基-β-甲基丁酸（HMB）是亮氨酸代謝的中間產(chǎn)物，在肌肉蛋白質(zhì)代謝中發(fā)揮著重要作用，將其應(yīng)用于胚蛋給養(yǎng)中可促進肉禽肌細胞增殖與肌纖維肥大，增加出欄時的肌肉產(chǎn)量。本實驗室向17.5胚齡的雞胚羊膜腔給養(yǎng)每枚1 mg HMB，可提高肉仔雞出殼重，增加衛(wèi)星細胞有絲分裂活性，促進肉仔雞胸肌發(fā)育，加快肉仔雞前期生長，不影響種蛋孵化率和肉仔雞飼料轉(zhuǎn)化效率[8，19]。此結(jié)果與之前的研究結(jié)果相似[42]。?Mer 等[43]報道，胚蛋給養(yǎng)每枚2 mgHMB 組肉仔雞生產(chǎn)性能優(yōu)于對照組，并且改善回腸絨毛形態(tài)，提高新城疫抗體水平，說明胚蛋給養(yǎng)HMB在促進腸道健康方面也可發(fā)揮作用。

3.3 胚蛋給養(yǎng)礦物質(zhì)

胚蛋給養(yǎng)礦物質(zhì)尤其是微量元素對肉仔雞的機體生長、骨骼發(fā)育和免疫等有著重要的作用。無機、有機和納米微量元素均有不同效果。胚蛋給養(yǎng)微量元素銅或鋅可改善出殼后肉仔雞的生產(chǎn)性能。在18 胚齡羊膜腔給養(yǎng)納米鋅、銅、硒均未損害胚胎發(fā)育和孵化率，且改善了生長性能，其中給養(yǎng)每枚12 μg納米銅處理組胸肌率得到顯著提高[44]。Mroczek-Sosnowska等[45]向1胚齡肉仔雞種蛋氣室給養(yǎng)硫酸銅或納米銅（每枚15 μg銅）均可顯著改善肉仔雞生長性能、屠宰性能和肉品質(zhì)。此外，胚蛋給養(yǎng)納米銅顯著降低了血清中葡萄糖和膽固醇含量，且增加了鈣、磷、鐵的含量[46]。Sun 等[47]研究發(fā)現(xiàn)，9～10 胚齡肉仔雞種蛋給養(yǎng)50 μg 或100 μg 的賴氨酸螯合鋅能顯著降低胚胎死亡率，提高孵化率和健雛率，更有利于DNA 甲基化和組蛋白H3K9 乙酰化。本團隊在肉仔雞種蛋17胚齡給養(yǎng)右旋糖酐鐵（1.5 mg或7.5 mg鐵），發(fā)現(xiàn)出殼當天血清鐵含量和血液血紅蛋白含量均顯著提高（未發(fā)表資料）。

胚蛋給養(yǎng)微量元素也可促進骨骼礦化和改善免疫機能。17 胚齡羊膜腔給養(yǎng)有機微量元素混合液（銅、錳、鋅）可改善骨質(zhì)量，有利于骨骼礦化[48]。Mroczek-Sosnowska 等[49]在1 胚齡肉仔雞種蛋氣室給養(yǎng)0.3 ml 納米銅發(fā)現(xiàn)，肉仔雞股骨增殖細胞數(shù)量增加，并且提高了股骨重量和斷裂強度。在免疫方面，18 胚齡羊膜腔給養(yǎng)混合納米微量元素（銅、錳、鋅、硒）通過增強體液免疫從而促進了肉仔雞生長發(fā)育[50]。此外，18 胚齡羊膜腔給養(yǎng)每枚12.5、25 μg或50 μg 納米銀能夠提高肉仔雞21 日齡時抗綿羊紅細胞抗體滴度和血液Toll 樣受體2 和4 的mRNA表達[16]。

胚蛋給養(yǎng)微量元素對骨骼的影響可持續(xù)到出欄期。以色列耶路撒冷大學(xué)Uni教授曾指出，胚蛋給養(yǎng)礦物質(zhì)促進骨骼礦化的效果在7日齡后逐漸消退，但在14 日齡時又顯現(xiàn)，并且該作用在肉仔雞生長后期（28～54 d）的骨小梁形態(tài)上仍能得到體現(xiàn)，表明胚蛋給養(yǎng)對骨骼發(fā)育的影響是持續(xù)和深遠的。

3.4 胚蛋給養(yǎng)維生素

胚蛋給養(yǎng)維生素可影響肉仔雞的孵化率和骨骼生長。胚蛋給養(yǎng)維生素的研究主要集中于維生素C、D 和E。此外，在維生素A、葉酸和類維生素L-肉堿、吡咯喹啉醌（PQQ）上也有部分研究。Bhanja等[51]比較了在肉仔雞14 胚齡時給養(yǎng)各種維生素的效果，結(jié)果表明給養(yǎng)維生素A（100 IU/枚）或維生素C（50 mg/枚）可提高出雛重/入孵蛋重，而給養(yǎng)維生素E（0.5 IU/枚）或維生素B1（0.1 mg/枚）可增加肉仔雞出殼后14日齡和28 日齡體重。多篇研究報道指出，胚期給養(yǎng)維生素C 可對肉仔雞孵化率和/或出殼后生長有益。孵化中后期氣室給養(yǎng)每枚3～6 mg 維生素C，可以提高種蛋孵化率，增加出雛重[52-54]。也有報道羊膜腔給養(yǎng)維生素C 時僅見孵化率有提高的趨勢，未見對生長性能有明顯影響[55]。以上試驗結(jié)果，可能與注射時期或注射劑量有關(guān)。此外，白來航蛋雞胚胎心肌細胞在致糖尿病條件培養(yǎng)，細胞收縮和細胞活力的下降可通過培養(yǎng)液中同時添加維生素C（100 μM）和葉酸（1 mM）而得以恢復(fù)[56]。胚蛋給養(yǎng)維生素D對骨骼的影響也有較多的研究。Bello 等[57]報道每枚胚蛋經(jīng)由羊膜腔給養(yǎng)0.15～1.2 μg 25-羥基維生素D3對出殼后雛雞骨骼礦化無顯著影響，對生長和屠宰性能也無明顯效果。但該團隊在隨后的研究中，羊膜腔給養(yǎng)每枚0.2、0.6 μg 或1.8 μg 25-羥基維生素D3可顯著增加肉仔雞出殼后28 日齡的骨骼斷裂強度[58]。此外，也有研究指出胚蛋給養(yǎng)25-羥基維生素D3可增加骨骼灰分和骨骼硬度[59]。

胚蛋給養(yǎng)維生素可調(diào)節(jié)肉仔雞的免疫和抗氧化機能。14胚齡肉仔雞胚蛋給養(yǎng)每枚30 mg 維生素E，可提高孵化率并增加血液免疫球蛋白A 和M 的水平[60]。在17.5 胚齡羊膜腔給養(yǎng)60.4 IU 的維生素E 可提高肉仔雞孵化率，縮短孵化出雛的窗口時間。胚蛋給養(yǎng)維生素是提高胚胎抗氧化機能，改善孵化率的重要手段，羊膜腔給養(yǎng)維生素E[61]和維生素C[62]均展現(xiàn)了較好的效果。支麗慧等[63]研究表明，孵化期11 胚齡給養(yǎng)每枚45 μg 或90 μg 葉酸，可促進薩索肉仔雞早期生長，增加體重。但也有研究報道注射維生素對肉仔雞的孵化率和抗氧化機能無顯著影響[64]。

類維生素L-肉堿和吡咯喹啉醌（PQQ）也可應(yīng)用于胚蛋給養(yǎng)。L-肉堿為動物組織中必需的輔酶。胚蛋給養(yǎng)不同劑量（25～500 μg/枚）L-肉堿，可顯著提高雛雞出殼體重和胰島素樣生長因子-1水平，肝糖原含量隨L-肉堿劑量增加呈線性升高，孵化率和出雛時間不受影響[65]。胚期給養(yǎng)L-肉堿對白來航雞的孵化率[66]、肉仔雞的孵化率、生長和屠宰性能無顯著影響[67]。PQQ 是煙酰胺核苷酸和黃素核苷酸之外的第三種有機輔基，屬于一種新型類維生素。本實驗室研究發(fā)現(xiàn)，7 胚齡雞胚氣室給養(yǎng)1 ml PQQ（濃度為2 mmol/l）溶液，給養(yǎng)組肉仔雞展現(xiàn)出生長速度快，飼料效率高和胸肌率大等優(yōu)勢[68]。

3.5 胚蛋給養(yǎng)其他生物活性物質(zhì)

除碳水化合物、氨基酸、維生素、礦物質(zhì)之外，胚蛋給養(yǎng)植物提取物、益生菌和合生元等其他生物活性物質(zhì)也有研究報道，并且這些功能性成分在肉仔雞生長與健康的不同方面呈現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。

在植物提取物方面，開展的研究有花粉提取物、大豆黃酮、葡萄籽提取物、海帶提取物等。Coskun等[69]報道羊膜腔給養(yǎng)花粉提取液，可顯著提高肉仔雞的出雛重。胚蛋給養(yǎng)百里香和香料提取物對肉仔雞體液免疫有改善作用[70]，這可能與其抗菌和抗氧化作用有關(guān)。Hajati 等[71]研究表明，胚蛋給養(yǎng)4.5 mg 葡萄籽提取物（GSE），肉仔雞的孵化率和谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著提高，此外每枚胚胎注射4.5 mg 或6 mg GSE 可減少回腸大腸桿菌的數(shù)量。羊膜腔給養(yǎng)大豆黃酮增強小腸組織刷狀緣膜結(jié)構(gòu)完整性，調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)[72]。在肉仔雞胚蛋12 胚齡經(jīng)由氣室給養(yǎng)海帶提取物（含褐藻多糖和海帶多糖，每枚0.88 mg）可促進十二指腸發(fā)育[73]。

近年來，胚蛋給養(yǎng)益生菌或合生元，改善腸道健康的研究日漸增多。Oliveira 等[74]用枯草芽孢桿菌和糞腸球菌作為益生菌對羅斯308 肉仔雞進行胚蛋給養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)益生菌可提高肉仔雞對腸炎沙門氏菌的抵抗力。本實驗室在羊膜腔給養(yǎng)凝結(jié)芽孢桿菌上開展的研究表明，凝結(jié)芽孢桿菌可促進肉仔雞腸道乳酸桿菌的早期定殖，改善早期生長性能（未發(fā)表資料）。Teague等[75]研究指出，18胚齡肉仔雞雞胚羊膜腔給養(yǎng)1×104CFU 乳酸菌（FloraMaxR-B11）不影響馬立克疫苗的免疫效果和孵化率，但能提高肉仔雞7 d 體重和腸道完整性，同時降低肉仔對雞沙門氏菌的易感性。肉仔雞胚蛋于12 胚齡氣室給養(yǎng)含菊粉、低聚半乳糖和乳酸乳球菌的合生元，可提高雛雞腸道短鏈脂肪酸含量，維持腸道健康[76]。羊膜腔給養(yǎng)合生元（菊粉和屎腸球菌）提高腸道有益菌數(shù)量，維持小腸刷狀緣結(jié)構(gòu)完整，增加腸道短鏈脂肪酸數(shù)量，發(fā)揮調(diào)節(jié)腸道健康的作用[77]。

4 小結(jié)與展望

胚蛋給養(yǎng)在提高肉仔雞孵化率、促進胚胎/雛雞腸道發(fā)育，調(diào)節(jié)骨骼健康、免疫系統(tǒng)和肌肉生長等方面已展現(xiàn)出了良好的應(yīng)用前景。碳水化合物能夠增加糖原貯備，復(fù)合氨基酸可以促進雛雞出殼后發(fā)育和提高生產(chǎn)性能，維生素和植物提取物能夠調(diào)節(jié)雛雞的免疫機能，肌酸可促進肌肉發(fā)育，維生素D 和微量元素能夠促進骨骼發(fā)育。近五年來，胚蛋給養(yǎng)研究領(lǐng)域的論文數(shù)量快速增長，胚蛋給養(yǎng)的潛在價值得到了科研人員和肉雞生產(chǎn)企業(yè)的高度關(guān)注。

胚蛋給養(yǎng)技術(shù)目前尚未在生產(chǎn)中大規(guī)模應(yīng)用，可能與給養(yǎng)設(shè)備、孵化程序銜接和給養(yǎng)液標準化等方面配套不夠完善有關(guān)。為了充分利用胚蛋給養(yǎng)潛力，促進胚蛋給養(yǎng)技術(shù)進入生產(chǎn)應(yīng)用，今后需要在基礎(chǔ)和應(yīng)用研究兩方面開展工作。基礎(chǔ)研究方面：①加強對雞胚發(fā)育生物學(xué)的研究，包括腸道、肌肉、骨骼、免疫等系統(tǒng)的發(fā)生發(fā)育規(guī)律，確定營養(yǎng)素的給養(yǎng)時間和給養(yǎng)部位；②胚蛋給養(yǎng)單一或復(fù)合活性物質(zhì)調(diào)控肉仔雞早期發(fā)育和出雛后生長、健康和產(chǎn)品品質(zhì)的相關(guān)機理；③胚蛋給養(yǎng)設(shè)備研發(fā)，當前僅有羊膜腔給養(yǎng)設(shè)備，孵化早期的給養(yǎng)設(shè)備尚很缺乏，而腸道、肌肉等的發(fā)育在孵化早期已經(jīng)開始。應(yīng)用研究方面：①胚蛋給養(yǎng)液標準化，包括給養(yǎng)劑量和給養(yǎng)時間，單一或復(fù)合功能胚蛋給養(yǎng)液的標準化，胚蛋給養(yǎng)與疫苗接種的兼容性；②胚蛋給養(yǎng)與早期開食的銜接；③胚蛋給養(yǎng)效益核算，以每只雞為單元核算投入產(chǎn)出比。

目前，在充分發(fā)揮肉仔雞遺傳潛力和增加養(yǎng)殖效益方面，出雛后的優(yōu)化飼料配方和改善飼養(yǎng)管理的潛力已接近瓶頸，而在占肉仔雞生命周期三分之一的出雛前的營養(yǎng)干預(yù)方面尚有極大空間。通過胚蛋給養(yǎng)提升現(xiàn)代肉仔雞整體養(yǎng)殖效益，這一理念與做法已得到行業(yè)界的普遍認同。胚蛋給養(yǎng)的研究和應(yīng)用將會為肉雞產(chǎn)業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展做出更大貢獻。