實(shí)驗(yàn)室檢測在豬病防控中的應(yīng)用

黃美芝 雷 婷

（廣西省南寧市隆安縣動物疫病預(yù)防控制中心，廣西南寧 532799）

在養(yǎng)豬業(yè)規(guī)模化與集約化的發(fā)展之下，豬病也變得更加復(fù)雜，增加了生豬的死亡率。如果只依靠獸醫(yī)或者飼養(yǎng)人員的臨床經(jīng)驗(yàn)、簡單診斷已經(jīng)無法準(zhǔn)確診斷，需要借助專業(yè)實(shí)驗(yàn)室檢測手段正確診斷。隨著我國飼養(yǎng)規(guī)模的不斷加大，我們的技術(shù)服務(wù)也要緊跟其發(fā)展速度，要充分利用現(xiàn)代化手段，采取科學(xué)的方式對豬病進(jìn)行防治，在預(yù)防的過程中，我們依據(jù)需要科學(xué)的實(shí)驗(yàn)、準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)來彌補(bǔ)以往依靠經(jīng)驗(yàn)診斷的不足。同時，我們要根據(jù)得出的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，結(jié)合臨床案例，進(jìn)行充分的討論分析，制定出適合的方案。

1 實(shí)驗(yàn)室檢測對豬病防控的意義

首先，為病毒病的防控免疫提供依據(jù)。豬場可以與檢測實(shí)驗(yàn)室合作進(jìn)行地區(qū)部分豬血液如A型口蹄疫等病毒病的抗體檢測，從而判斷是否進(jìn)行接種免疫。病毒都可能存在著免疫逃避的情況，因此要盡可能地避免新病毒或者新毒株疫苗的引進(jìn)，以減緩病毒變異或者免疫逃避性，提高防控的有效性。

其次，評價免疫效果。由于病原的種類、數(shù)量、接種人員與營養(yǎng)水平等存在差異，使得疫苗抗體水平也不同，因此為了制定出適合豬場最佳的疫苗程序，需要與實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行多次地聯(lián)合檢測。疫苗效果的評估中，也可通過實(shí)驗(yàn)室檢測比較不同疫苗保護(hù)性抗體出現(xiàn)的時間，維持時間、最高滴度和離散度等。

此外，用于確定疾病“元兇”，凈化疾病。為了確定豬病的最主要和真正的“元兇”，需要通過實(shí)驗(yàn)室檢測，由于豬場如今發(fā)病多為細(xì)菌與病毒多病原混合，如呼吸道疾病綜合征、高熱病等。臨床上也常采用免疫、淘汰和檢測手段結(jié)合進(jìn)行某些疾病的凈化，例如豬瘟等。

2 實(shí)驗(yàn)室檢測在豬病防控中的應(yīng)用

2.1 抗體檢測及應(yīng)用

抗體檢測，主要是指通過和已經(jīng)檢測出來的抗原在體外特異性結(jié)合，對選取的抗體進(jìn)行檢測。通過對抗體檢測，可以使飼養(yǎng)人員充分了解豬群的健康情況，預(yù)防豬病大規(guī)模發(fā)生，降低生豬的死亡率，保證養(yǎng)豬戶的經(jīng)濟(jì)收益，促進(jìn)我國養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。隨著養(yǎng)豬規(guī)模的不斷擴(kuò)大，豬病也變得越來越復(fù)雜，抗體檢測在養(yǎng)豬業(yè)變得也越來越重要了。與此同時，在飼養(yǎng)過程中，對抗體實(shí)時進(jìn)行檢測，可以減少大規(guī)模豬病的發(fā)生，提高豬病的防控能力。

首先，用于確定仔豬疫苗首免時間。以豬瘟為例，剛剛出生的仔豬體內(nèi)自帶母源抗體，當(dāng)仔豬體內(nèi)的抗體過低時接種疫苗，仔豬的豬瘟抗體極易感染，造成豬場不穩(wěn)定；當(dāng)仔豬體內(nèi)的抗體過高時接種疫苗，疫苗和仔豬體內(nèi)自帶的抗原體有可能會發(fā)生沖突，導(dǎo)致免疫失敗，也同樣會造成豬場的不穩(wěn)定。通過實(shí)驗(yàn)室大量的實(shí)驗(yàn)證明，仔豬在出生后20d左右對其進(jìn)行豬瘟的檢測為最佳時間。

其次，用于疫苗的選擇。豬病防控首先加強(qiáng)豬自身的免疫力。免疫是預(yù)防生豬養(yǎng)殖過程中發(fā)生疾病的有效措施，因此需要定期做好一系列的免疫接種工作，保證在養(yǎng)殖過程中，對豬進(jìn)行定期的疫苗注射工作，從而有效預(yù)防豬群傳染病。建議養(yǎng)殖戶在飼養(yǎng)時，堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，全進(jìn)全出，盡量不從外面購買仔豬，確實(shí)要引進(jìn)的，了解好疫情，做好檢疫和飼養(yǎng)隔離，確定新引進(jìn)的仔豬無疫病再混群飼養(yǎng)。同時以豬病的實(shí)驗(yàn)室診斷、病理變化、臨床癥狀和流行特點(diǎn)等為依據(jù)，有針對性與目的性進(jìn)行用藥，不能濫用抗生素，禁止長期、大劑量的使用退熱藥物和皮質(zhì)激素。這樣能夠避免生豬群體免疫力的降低以及病原微生物耐藥性的產(chǎn)生，增強(qiáng)豬病的治愈率。

此外，用于疫病的監(jiān)控。以豬繁殖與呼吸綜合癥抗體檢測為例，抽樣對抗體進(jìn)行檢測，若仔豬中豬繁殖與呼吸綜合癥抗體的S /P值大于1的比例占到三成，母豬中豬繁殖與呼吸綜合癥抗體S /P 值大于2的比例超過三成，上述情況出現(xiàn)其一，說明該豬場爆發(fā)豬繁殖與呼吸綜合癥的概率相當(dāng)高，需要提前做好豬病的預(yù)防工作。

2.2 病原檢測及應(yīng)用

通過檢測病原，可以準(zhǔn)確確定豬病爆發(fā)的原因，通過PCR能檢測出器官內(nèi)的病毒，為治療提供更多的依據(jù)，PCR需要大量的實(shí)驗(yàn)作為基礎(chǔ)，且要與臨床相結(jié)合才更加有說服力。比如，豬群出現(xiàn)了明顯的豬瘟癥狀，但是在做PCR時，檢測的結(jié)果卻為陰性，這樣就很容易將錯誤的診斷信息傳遞給飼養(yǎng)人員或者豬場的管理者，那么將不利于豬病的治療。因此，檢測機(jī)構(gòu)的操作人員應(yīng)當(dāng)有熟練的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)。與此同時，采用PCR做病源檢測時一定要準(zhǔn)確把握好時機(jī)和位置。每一種病毒都有其依附的氣管，而且隨著病毒發(fā)展程度的不同器官內(nèi)病毒的含量也不同。舉個例子來說，豬瘟的最佳采樣器官是扁桃體隱窩、脾臟以及腹股溝淋巴結(jié)；豬藍(lán)耳病的采樣器官是在豬的肺部。

2.3 豬病藥物的檢測

隨著在養(yǎng)殖過程中大量使用抗生素，藥物對細(xì)菌的作用越來越弱，并與病豬所在的位置有關(guān)，也就是說一種治療方案在A豬場的效果很好，但是將這種方案使用在B豬場，卻沒有什么效果。由于一些藥物國家藥監(jiān)局禁止生產(chǎn)，很多獸醫(yī)在豬病爆發(fā)后，大規(guī)模使用抗生素，使病豬的身體承受了更大的傷害，還增加了治療成本，不利于養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。因此，在治療過程中使用的抗生素，要經(jīng)過嚴(yán)格的檢測方可使用，這樣一來，避免了濫用藥物的情況出現(xiàn)，降低了用藥成本，減少了對病豬的傷害，有利于病豬盡快好轉(zhuǎn)。

3 豬病實(shí)驗(yàn)室檢測的要點(diǎn)

第一，明確送檢目的和樣品采集要求。根據(jù)豬場流行病學(xué)情況、免疫方案等確定檢測項(xiàng)目，如免疫抗體檢測、野毒抗原檢測，發(fā)病時取病料組織，豬場在發(fā)病時進(jìn)行采樣并進(jìn)行血液血清的分離，編號后進(jìn)行標(biāo)注。

第二，樣品采集。樣品采集要有隨機(jī)性和代表性，代表整個群體的檢測情況，確定合適的樣本數(shù)。血清按照樣本數(shù)量、群體要求至少5～10份，如1～2胎母豬，3～4胎母豬，后備母豬分別為1個群體。樣本數(shù)量越大也更能反映豬群的情況。

第三，分離血清。血液標(biāo)本要及時進(jìn)行血清分離，于室溫25℃下將采集管自然傾斜析出或者經(jīng)離心機(jī)離心3至5分鐘，轉(zhuǎn)速3000轉(zhuǎn)/min。注意避免溶血對檢測結(jié)果的影響。

第四，確定檢測時間、試劑和方法。免疫抗體檢測，豬瘟疫苗等一般在免疫后28d采血檢測，而藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒病、口蹄疫疫苗則須在免疫35d進(jìn)行采血檢測。檢測試劑要盡可能采用金標(biāo)準(zhǔn)試劑，優(yōu)先選擇敏感方法，如PCR與酶聯(lián)免疫吸附法。

第五，檢測項(xiàng)目與頻率。豬場在正常的情況下建議對不同階段的豬群進(jìn)行豬瘟、偽狂犬病、口蹄疫、藍(lán)耳病等實(shí)驗(yàn)室檢測。如豬瘟重點(diǎn)檢測抗原抗體，偽狂犬病檢測gB抗體，一年內(nèi)全面檢測項(xiàng)目次數(shù)3次及以上。

第六，科學(xué)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果分析。根據(jù)大量試驗(yàn)證明，檢測報告中，實(shí)驗(yàn)室的檢測數(shù)據(jù)占到三成左右，臨床案例、綜合分析以及具體的治療方案占到七成左右。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)僅僅是提供了依據(jù)，最終目標(biāo)還是解決豬病防治的問題，而關(guān)鍵就在于將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與具體的臨床案例相結(jié)合，找出根源所在，對癥下藥，制定科學(xué)合理的方案，徹底根治，不再反復(fù)發(fā)作。例如，在檢測時，發(fā)現(xiàn)豬場的豬發(fā)生豬瘟，那么病源是來自哪里，母豬還是仔豬？如果是因?yàn)槟肛i的問題導(dǎo)致豬瘟的發(fā)生，那么我們就要詳細(xì)分析接種的疫苗問題、日常飲食營養(yǎng)以及飼養(yǎng)過程中的管理等問題，將他們充分剖析，查找根源；如果是仔豬的原因?qū)е仑i場發(fā)生豬瘟，就要分析仔豬出生后的生長環(huán)境、接種的疫苗質(zhì)量、飼養(yǎng)過程中的管理等問題，找到根源所在。假若脫離了臨床實(shí)踐，單純的通過實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)很難找出主要原因，因此，在飼養(yǎng)過程中，我們一定要將實(shí)驗(yàn)室所出的數(shù)據(jù)和臨床實(shí)踐相結(jié)合，并具體分析，才能找到豬病發(fā)生的主要原因，并制定科學(xué)合理的治療方案，及時對豬病進(jìn)行有效的防治。