烏蕨的化學(xué)成分、藥理作用及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究進(jìn)展*

王亞敏 陳樂 廖衛(wèi)波 彭智祥 李雪 黃斌

（江西省中醫(yī)藥研究院 南昌330046）

烏蕨[Stenoloma chusanum（L.）Ching]又名小葉野雞尾、細(xì)葉鳳凰尾等，為多年生草本，系陵齒蕨科烏蕨屬植物[1]。根據(jù)民間中草藥的使用經(jīng)驗，烏蕨具有清熱解毒、抗炎、抗菌、抗腫瘤、護肝等作用，主治感冒發(fā)熱、咽喉炎、毒傷等[2～3]。近十年來，國內(nèi)外對烏蕨有效成分及藥理作用的研究仍然較少，從烏蕨中分離得到的化學(xué)成分也比較簡單；藥理、毒理作用方面的研究大多集中在提取物上，對活性化學(xué)成分的研究很少，但近兩年對烏蕨抗炎解毒作用的研究較為突出。本文詳述了烏蕨的抗氧化、抗菌、抗酪氨酸酶、抗炎、肝保護、抗腫瘤、降血糖、解毒及質(zhì)量控制指標(biāo)成分，為烏蕨的進(jìn)一步開發(fā)研究提供了理論基礎(chǔ)?，F(xiàn)綜述如下：

1 化學(xué)成分

黃酮類、酚酸類、揮發(fā)油類等是烏蕨中主要化學(xué)成分。近幾年，有學(xué)者采用液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS）聯(lián)用技術(shù)、高效逆流色譜（HSCCC）、超高效液相色譜（UHPLC）、制備高效液相色譜技術(shù)（prep-HPLC）從烏蕨中分離得到了苯丙素類、萜類、生物堿類等化學(xué)成分。

1.1 黃酮 烏蕨中的黃酮類化合物主要有黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、異黃酮、色原酮等。黃酮類化合物是烏蕨的主要活性成分之一，具有抗氧化、抗炎、抑菌、止血等藥理作用。其他黃酮類化合物主要有芹菜素[4]、牡荊素、山萘酚[5]、芹菜素-7-O-β-β-D-葡萄糖苷、山萘酚-3-O-β-吡喃葡萄糖苷[6]、orientin、orientin-2-О-β-D-glucopyranoside[2]、quercetin-3-rhamnoside、luteolin-7-O-glucoside、apigenin-8-C-glucoside、quercetin-3-O-rhamnoside、kaempferol-3-O-rutinoside、Alpinumisoflavone、Apigenin-7-O-rutinoside、Apigenin-7-O-glucoside[7]、glucosyl-vitexin、Rhamnosylvitexin[2]、木犀草素[8]、quercetin-3-O-galactoside、6-hydroxy-2-methylchromone、vitexin-4',5,7-trimethylether和3,5,7-thrihydroxy-4′-methoxyflavanone[9]。

1.2 酚酸類成分 酚酸類化合物同樣為烏蕨的主要活性成分，具有抑菌、抗炎的藥理作用，包括3,4-二羥基苯甲酸、咖啡酸、丁香酸[8]、香草酸、龍膽酸[7]、原兒茶醛、原兒茶酸[6]、2,5-二羥基苯甲酸甲酯[9]、4-О-β-D-（6-О-gentisoylgucopyranosyl）vanillic acid和 2-О-β-D-（6-О-gentisoylgucopyranosyl）gentisicacid等[2]。研究表明，烏蕨地上部分總黃酮含量和總酚酸含量明顯高于地下部分，其含量表現(xiàn)出明顯的季節(jié)性變化，2月份達(dá)到其最高水平，分別為（24.63±1.34）%和（9.58±1.34）%[8]。

1.3 苯丙素類 從烏蕨中分離的苯丙素類及萜類化合物均較少，苯丙素類有秦皮乙素[8]、秦皮素、6,7-二羥基香豆素[2]和Chlorogenic acid[7]。

1.4 萜類 從烏蕨中分離得到的萜類暫時只報道了Bisabolenone 和 Barringtogenol B[9]。

1.5 生物堿類 目前，從烏蕨中分離得到的生物堿成 分 有 Repanduline、Pyracrimycin[8]、Daurisoline、Hernandezine、Theophyline、1-Methyl-7-hydroxy-βcarboline、Na-ethylaspidospermidine[9]。

1.6 揮發(fā)油類 目前，烏蕨揮發(fā)油成分研究相對較多，羅婭君等[10]應(yīng)用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）技術(shù)從烏蕨中檢測出32種脂肪酸，脂肪酸檢出量為87.65%，其中飽和脂肪酸占總量的53.13%，不飽和脂肪酸占脂肪酸總量的46.87%。陶晨等[11]從烏蕨揮發(fā)油中鑒定出24種成分，主要有芳樟醇、松油醇和香葉醇。

1.7 其他 陳曉清等[12]從烏蕨中分離出脂肪酸、脂肪醇、甾體和多糖等化合物。

2 藥理作用

2.1 抗菌 陶晨等[4，11]報道，烏蕨中抗菌活性成分有芹菜素、丁香酸和原兒茶酸，且為主要抑菌活性成分。陳曉清等[12]研究顯示，烏蕨中提取得到的多糖對動植物病原菌具有較強的抗菌活性。陳明等[13]研究發(fā)現(xiàn)，烏蕨具有明顯的抗菌作用，其丙酮提取浸膏抗菌作用強于水提浸膏。吳曉寧等[14]研究顯示，烏蕨水提物和醇提物能顯著抑制多種細(xì)菌，尤其是對金黃色葡萄球菌的作用顯著，烏蕨乙酸乙酯提取物與烏蕨丙酮提取物均有一定抑菌作用，而正丁醇提取物抑菌作用不強。張秀珍[15]研究表明，烏蕨中提取得到的多糖對細(xì)菌和真菌均有較好的抑制作用。廖建良等[16]研究表明，烏蕨乙醇提取物能抑制金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌和枯草桿菌，尤其是對金黃色葡萄球菌的效果更佳；烏蕨的水提取物的抑菌效果明顯。趙雨川等[17]研究表明，烏蕨醇提物對CTX-M型產(chǎn)ESBLs大腸桿菌具有抑菌作用，且與β-內(nèi)酰胺類藥物有不同程度的相加作用，與喹諾酮類藥物表現(xiàn)出拮抗作用。烏蕨揮發(fā)油能明顯抑制枯草芽孢桿菌、傷寒沙門氏菌[18]。Ren等[8]發(fā)現(xiàn)烏蕨中含有的丁香酸、原兒茶酸、芹菜素有抑菌活性；香草酸-4-О-β-D-（6-О-龍膽?；?吡喃葡萄糖苷和龍膽酸-2-О-β-D-（6-О-龍膽?；?吡喃葡萄糖苷對白色念珠菌、紅色毛癬菌、須毛癬菌、大小孢子菌、新型隱球菌、絮狀麥皮癬菌和黑曲霉均有一定促抑制作用，最小抑制濃度為 25～100 μg/ml。

2.2 抗氧化 岳銀等[3]闡明，烏蕨總黃酮對大豆油有一定的抗氧化效果，且呈量效關(guān)系；維生素C、檸檬酸、酒石酸能增強其抗氧化作用。吳曉寧等[18]發(fā)現(xiàn)，烏蕨總黃酮具有較強的抗氧化活性，且與抗氧化作用有量效關(guān)系。盧海嘯等[19]研究表明，烏蕨水提部位具有體內(nèi)抗氧化活性，可提高小鼠體內(nèi)超氧化物歧化酶、全血谷胱甘肽-過氧化物酶的活性，且呈一定的量效關(guān)系，能降低血清中丙二醛的含量，保護小鼠。羅婭君[20]闡明，烏蕨的不同提取物抗氧化能力各不相同，超聲水提液清除羥自由基能力較好，優(yōu)于乙醇提取物和丙酮提取物；超聲水提液清除超氧自由基的能力優(yōu)于丙酮提取物、水提取物和乙醇提取物。李天運[21]研究表明，烏蕨中6,7-二羥基香豆素和香草酸有較好的抗氧化活性，效果均優(yōu)于維生素C。

2.3 抗絡(luò)氨酸酶 Wu等[9]研究表明，烏蕨的石油醚提取物（PF）、氯仿提取物（CF）、醋酸乙酯提取物（EF）、正丁醇提取物（NF）、水提取物（WF）均有抗氧化活性和酪氨酸酶抑制活性。不同提取物的2,2-二苯基-2-苦味酰肼（DPPH）自由基清除能力與濃度（10～80 μg/ml） 呈正相關(guān)，DPPH 自由基清除能力為：EF＞NF＞CF＞W(wǎng)F，且乙酸乙酯提取物濃度在50～80 μg/ml時，其DPPH自由基清除能力超過維生素C。2-聯(lián)氨-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸自由基清除能力：EF＞NF＞CF＞W(wǎng)F，且各組分的清除能力均弱于維生素C。該5種提取物均具有酪氨酸酶抑制活性，在濃度50～500 μg/ml范圍內(nèi)呈劑量依賴性，且PF提取物的酪氨酸酶抑制作用強于熊果苷，其他組分的酪氨酸酶抑制作用與熊果苷相比較無顯著差異。李天運[21]研究表明，烏蕨中的芹菜素有較好的抗酪氨酸酶活性，效果明顯優(yōu)于熊果苷。

2.4 抗炎 陳樂等[22]研究表明，烏蕨水煎液有一定的抗炎效果，且有明顯的抗毛細(xì)管通透性增高的作用。蔡建秀等[23]發(fā)現(xiàn)，烏蕨總黃酮及水提液均能減輕二甲苯致小鼠的耳腫脹，縮短出血時間。陳明等[24]發(fā)現(xiàn)，烏蕨提取物可顯著抑制冰醋酸導(dǎo)致的小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高，能顯著降低實驗小鼠血清中環(huán)氧化酶-2（COX-2）、前列腺素E2（PGE2）、腫瘤壞死因子 α（TNF-α）和一氧化氮（NO）水平，其抗炎機制可能與抑制炎癥因子合成及釋放有關(guān)。

2.5 肝保護 蔡建秀等[23]研究發(fā)現(xiàn)，烏蕨總黃酮可降低四氯化碳（CCl4）性肝損傷小鼠的血清ALT活性，具有保肝作用。周青等[25]發(fā)現(xiàn)，烏蕨保肝作用與抗脂質(zhì)過氧化有關(guān)，能顯著降低CCl4中毒小鼠血清和肝組織中的丙二醛含量，升高NO水平，提高超氧化歧化酶活性和總抗氧化能力。

2.6 降血糖 陳明等[26]研究顯示，烏蕨具有良好的降糖作用，可調(diào)節(jié)胰島素敏感性，降低胰島素信號子IRS-1和IRS-2的表達(dá)而達(dá)到有效治療2型糖尿病的作用。烏蕨提取物對鏈脲佐菌素（STZ）所致1型糖尿病大鼠有降血糖作用，其降糖作用可能與升高糖尿病大鼠血清葡萄糖激酶（GCK）含量和降低醛糖還原酶（AR）含量有關(guān)，可改善糖尿病大鼠胰島損傷，促進(jìn)胰島β細(xì)胞分泌胰島素[13]。

2.7 抗腫瘤 吳麗珍等[27]研究發(fā)現(xiàn)，烏蕨具有明顯的體內(nèi)抗腫瘤活性，烏蕨醇提取物能提高荷瘤小鼠血清及腫瘤組織細(xì)胞因子IL-6、IL-10、IL-17水平，升高荷瘤小鼠機體細(xì)胞因子水平，增強機體免疫功能，而發(fā)揮抑瘤作用。

2.8 解毒 盧海嘯等[28]研究表明，烏蕨水提部位可提高血液膽堿酯酶的活性，顯著降低樂果致小鼠急性中毒的死亡率；烏蕨的抗氧化作用也是烏蕨解毒作用機制之一。楊敬格等[29]研究表明，烏蕨水浸膏的70%乙醇溶解物，可顯著降低砷中毒的小鼠死亡率，并提高小鼠對砷的耐受性。

3 質(zhì)量控制

到目前為止，烏蕨沒有嚴(yán)格的質(zhì)量控制指標(biāo)，質(zhì)量控制還停留在性狀鑒別與顯微鑒別方面。段萍等[30]研究采用高效液相色譜法（HPLC），以乙腈-0.4%磷酸溶液為流動相進(jìn)行梯度洗脫，測定了烏蕨中原兒茶酸和葒草苷的含量，平均含量分別為0.907 0 mg/g、1.415 1 mg/g，線性關(guān)系良好。金浩鑫等[31]采用HPLC法，以乙腈-0.1%磷酸水溶液（11:89）為流動相，測定了小兒清炎合劑君藥烏蕨中的葒草苷含量，葒草苷平均含量為115.47 μg/ml，該含量測定方法簡便、結(jié)果準(zhǔn)確。涂瓊等[32]采用HPLC法，以甲醇-1%冰醋酸溶液（12:88）為流動相，測定小兒清炎合劑中原兒茶醛的含量，平均含量為36.14 mg/L，該方法線性關(guān)系良好，結(jié)果穩(wěn)定。葒草苷、原兒茶酸和原兒茶醛是烏蕨目前質(zhì)量控制的主要指標(biāo)成分，含量測定方法穩(wěn)定、準(zhǔn)確，為烏蕨的質(zhì)量控制提供依據(jù)。

4 毒副作用

陳明等[33]研究發(fā)現(xiàn)，烏蕨水提液灌胃，小鼠未出現(xiàn)明顯中毒癥狀，對豚鼠皮膚無致敏作用，對家兔皮膚、眼無明顯刺激；烏蕨水煎液對家兔無明顯慢性毒性。

5 總結(jié)

目前，烏蕨的有效成分及藥效研究仍不充分，研究者們可對其藥理、藥效活性成分進(jìn)行更深入的研究，為進(jìn)一步開發(fā)烏蕨這一藥用植物提供基礎(chǔ)。