四川、西藏產(chǎn)野生當(dāng)歸揮し⒂統(tǒng)煞值腉C-MS分析

【摘?要】?目的：通過(guò)對(duì)比西藏林芝和四川平武兩地野生當(dāng)歸中揮發(fā)油的成份和含量，比較其差異性，為當(dāng)歸野生資源的開(kāi)發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。方法：采用水蒸氣蒸餾法提取分離揮發(fā)油，通過(guò)GC-MS測(cè)定分析揮發(fā)油中所含的成分和含量。結(jié)果：西藏林芝野生當(dāng)歸中揮發(fā)油含量為1.22%（mL/g），四川平武野生當(dāng)歸揮發(fā)油含量為1.16%（mL/g）;兩地野生當(dāng)歸中均未檢測(cè)出藁本內(nèi)酯;其中西藏林芝野生當(dāng)歸揮發(fā)油中檢測(cè)到35?個(gè)色譜峰，鑒定出22種化合物，其中含量最多的是2-氫正丁烯基苯酞（70.184%），其次是正丁烯基苯酞（9.288%）;四川平武野生當(dāng)歸揮發(fā)油中檢測(cè)到35?個(gè)色譜峰，鑒定出17種化合物，其中含量最多的是2-氫正丁烯基苯酞（92.551%），其次是正丁烯基苯酞（3.037%）。結(jié)論：造成兩地野生當(dāng)歸揮發(fā)油中的成分和含量差異及未檢測(cè)出藁本內(nèi)酯這一結(jié)果的原因還有待進(jìn)一步研究。

【關(guān)鍵詞】?野生當(dāng)歸;揮發(fā)油;藁本內(nèi)酯;GC-MS

【中圖分類號(hào)】R284?【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】?A【文章編號(hào)】1007-8517（2019）23-0041-04

Analysis?of?Volatile?Oil?Ingredients?in?Wild?Angelica?sinensis?from?Different?Origin

LI?Runhong

Qingyuan?City?Hospital，?Guangdong?province，??Qingyuan?511500，China

Abstract：Objective??By?comparing?the?composition?and?content?of?volatile?oil?in?wild?Angelica?of?Tibet?Linzhi?and?Sichuan?Pingwu，?the?differences?were?compared，?and?experimental?data?were?provided?for?the?development?and?utilization?of?wild?resources?of?Angelica?sinensis.?Methods??The?volatile?oil?was?separated?and?extracted?by?steam?distillation，?and?the?components?and?contents?contained?in?the?volatile?oil?were?analyzed?by?GC-MS.?Results??The?volatile?oil?content?of?wild?Angelica?sinensis?in?Tibet?was?1.22%?（mL/g），?and?the?volatile?oil?content?of?wild?Angelica?sinensis?in?Sichuan?was?1.16%?（mL/g）;?no?ligustilide?was?detected?in?wild?Angelica?in?the?two?places;?Thirty-five?chromatographic?peaks?were?detected?in?the?volatile?oil?of?Angelica?sinensis，?and?22?compounds?were?identified，?the?most?abundant?of?which?was?2-hydro-n-butenylphenylhydrazine?（70.184%），?followed?by?n-butenylphenylhydrazine?（9.288%）;?Sichuan?Pingwu?35?peaks?were?detected?in?wild?Angelica?volatile?oil，?and?17?compounds?were?identified.?The?most?abundant?one?was?2-hydro-n-butenylphenylhydrazine?（92.551%），?followed?by?n-butenylphenylhydrazine?（3.037%）.?Conclusion?The?reasons?for?the?difference?in?the?composition?and?content?of?the?volatile?oil?of?wild?angelica?in?the?two?places?and?the?result?of?not?detecting?the?ligustilide?remain?to?be?further?studied.

Keywords：?Wild?Angelica?Sinensis;Volatile?Oil;Ligustilide;GC-MS

當(dāng)歸為傘形科植物當(dāng)歸[Angelica?sinensis?（Oliv.）?Diels]的干燥根，具有補(bǔ)血活血、調(diào)經(jīng)止痛、潤(rùn)腸通便的功效[1]。揮發(fā)油是當(dāng)歸的有效成分之一，研究表明當(dāng)歸揮發(fā)油中含有藁本內(nèi)酯、正丁烯內(nèi)酯、當(dāng)歸酮、月桂烯等多種成分，具有廣泛的藥理活性。近年來(lái)當(dāng)歸揮發(fā)油在心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、腦神經(jīng)系統(tǒng)和抗腫瘤方面的相關(guān)研究取得了較好的成績(jī)?[2]。

當(dāng)歸主產(chǎn)于我國(guó)西北和西南海拔1800～3000?m的高寒地區(qū)，根據(jù)產(chǎn)地的不同又有秦歸（產(chǎn)甘肅、陜西）、云歸（產(chǎn)云南）和川歸（產(chǎn)四川）之分，其中甘肅岷縣為當(dāng)歸的道地產(chǎn)區(qū)。張宏意等[3]2008年通過(guò)實(shí)地調(diào)查甘肅、四川、云南、湖北、青海和西藏林芝等當(dāng)歸產(chǎn)區(qū)，發(fā)現(xiàn)野生資源稀少。孫紅梅等[4]通過(guò)對(duì)當(dāng)歸藥材資源調(diào)查與分析發(fā)現(xiàn)，由于需求量的增加，生態(tài)環(huán)境的破壞，導(dǎo)致野生資源匱乏，目前現(xiàn)在市場(chǎng)上流通的當(dāng)歸藥材商品均為栽培品種。本研究通過(guò)分析對(duì)比西藏林芝和四川平武的野生當(dāng)歸揮發(fā)油中的成分和含量，對(duì)比其差異性，以期為當(dāng)歸野生藥用植物資源的開(kāi)發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1?材料與方法

1.1?藥材?西藏林芝野生當(dāng)歸采于海拔?3100?m左右的灌木林下，土壤類型為灰棕色土壤，PH值微堿性;四川平武野生當(dāng)歸實(shí)地采于海拔?2700?m左右的灌木林下，土壤類型為棕色土壤，PH值微堿性。采集時(shí)間為2018年9月，經(jīng)廣東藥科大學(xué)張宏意博士鑒定為傘形科植物當(dāng)歸[Angelica?sinensis（Oliv.）?Diels]。分離根莖葉，除去須根和泥沙，待水分稍蒸發(fā)后，置于40℃烘箱中，烘48?h后粉碎過(guò)40目篩。

1.2?儀器?烘箱;粉碎機(jī);電熱套;?揮發(fā)油測(cè)定器;?冷凝管;?膠管;HP5890GC/HP5972MS氣/質(zhì)聯(lián)用儀;賽多利斯—sartor?ious/BP210D電子天平;島津AY120托盤(pán)電子分析天平（稱量樣品）;具塞錐形瓶;HH—6恒溫水浴鍋;國(guó)家統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)篩：40目，孔徑0.45mm，浙江上于縣杜浦江山篩具廠。

1.3?方法

1.3.1?樣品前處理?分別稱取兩地野生當(dāng)歸粉末50克（40目），置于2000mL圓底燒瓶中，加入800mL蒸餾水，置揮發(fā)油測(cè)定器中，共水蒸餾提取8h，靜置30min，收集得到黃褐色透明油狀物，封裝備用。取兩地當(dāng)歸揮發(fā)油樣品，用島津AY120托盤(pán)電子分析天平精密稱定10mg，用三氯甲烷溶解使?jié)舛葹?0mg/mL，作為樣品供試液備用。

1.3.2?色譜條件儀器?HP5890GC/HP5972MS?氣/質(zhì)聯(lián)用儀;色譜柱：?Cp?sil?5CB（Varian）??30m×0.25mm×0.25μm?（100%苯甲基硅氧烷）;柱溫：??50℃保持6min，2℃/min升溫至100℃保持10min，1℃/min升溫至160℃，2℃/min升溫至220℃保持15min;運(yùn)行146min;載氣：He氣;柱Flow=1.0mL/min?;進(jìn)樣方式：不分流;進(jìn)樣量：1μL;進(jìn)樣口溫度：280℃。

1.3.3?質(zhì)譜條件?離子源為EI;電離電壓：?70ev;電子倍培電壓：1?882mV?;質(zhì)譜Temp=171℃;Vacuum：65mTorr?;溶劑延時(shí)：6min;質(zhì)譜掃描范圍：50～550amu;質(zhì)量范圍：50～550m/z;樣品經(jīng)峰純度檢測(cè)：??Wiley?138譜庫(kù)檢索。

1.3.4?樣品定性、定量分析?分別取兩地野生當(dāng)歸揮發(fā)油樣品供試液，精密吸取1μL，按“1.3”項(xiàng)下色譜條件和質(zhì)譜條件進(jìn)樣測(cè)定，得到相應(yīng)的質(zhì)譜圖，與?Wiley?138譜庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)譜圖進(jìn)行對(duì)比分析，確認(rèn)兩地野生當(dāng)歸揮發(fā)油各成分，用峰面積歸一化法計(jì)算出各組分相對(duì)百分含量。

2?結(jié)果與分析

2.1?揮發(fā)油含量?取兩地野生當(dāng)歸各50?g粉末，照《中國(guó)藥典》（2015版）（通則2204乙法）項(xiàng)下?lián)]發(fā)油測(cè)定法測(cè)定揮發(fā)油含量，結(jié)果西藏林芝野生當(dāng)歸揮發(fā)油含量為1.22%（mL/g），四川平武野生當(dāng)歸揮發(fā)油含量為1.16%（mL/g）。

2.2?揮發(fā)油成分?通過(guò)對(duì)西藏林芝野生當(dāng)歸揮發(fā)油中各成分?GC—MS?分析，檢出的各成分與?Wiley?138譜庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)譜圖進(jìn)行對(duì)比分析，檢測(cè)到35?個(gè)色譜峰，鑒定出22種化合物，總含量占總檢出峰的?91.699?%?（色譜圖如圖?1?所示，化學(xué)成分見(jiàn)表?1）。其中含量最多的是2-氫正丁烯基苯酞（70.184%），其次是正丁烯基苯酞（9.288%），另外含量較多的還有十八碳二烯酸（3.171%）、十六烷酸（2.761%）、1.2-二烯基環(huán)丙烷（2.122%），石竹烯（1.428%）等，其他成分含量則較低（低于1%）。

四川平武野生當(dāng)歸揮發(fā)油中檢出的各成分與?Wiley?138譜庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)譜圖進(jìn)行對(duì)比分析，檢測(cè)到35?個(gè)色譜峰，鑒定出17種化合物，總含量占總檢出峰的?97.675?%?（色譜圖如圖?2?所示，化學(xué)成分見(jiàn)表?1）。其中含量最多的是2-氫正丁烯基苯酞（92.551%），其次是正丁烯基苯酞（3.037%），其他成分含量則較低（低于1%）。

通過(guò)對(duì)西藏林芝和四川平武兩地產(chǎn)野生當(dāng)歸揮發(fā)油成分的GC—MS分析對(duì)比（見(jiàn)表1），發(fā)現(xiàn)兩地?fù)]發(fā)油中共有8種相同的成分，分別是：β-羅勒烯、1，3-異苯并呋喃二酮、石竹烯、（+-）-裸丁二烯、β-法尼烯、β-紅沒(méi)藥烯、正丁烯基苯酞和2-氫正丁烯基苯酞;8種共同成分相對(duì)含量分別占總成分的81.709%（西藏林芝）和96.17%（四川平武）。

另外，西藏野生當(dāng)歸中還含有1-α-松油醇、9-甲基-十一碳烯、1-苯基辛酮、γ-欖香烯、β-蛇床烯、?1，3-苯二氧、4-甲氧-6-（2-丙烯基）、法尼烯、?1.2-二烯基環(huán)丙烷、十五烷酸、十六烷酸、十八碳二烯酸甲酯、13-二十二烯酸甲酯、十九烷酸甲酯、13-二十二烯酸甲酯等成分;四川平武野生當(dāng)歸中還含有2，4，6-三甲基-1，3-苯二胺、2，4，5-三甲基苯甲醛、1-苯基戊酮、（+）-香樹(shù)烯、喇叭烯、β-雪松烯、斯巴醇、2.3-二氫四甲基苯駢吡咯等成分。

3?討論

本研究結(jié)果顯示，西藏林芝野生當(dāng)歸揮發(fā)油的含量和成分比四川平武的多;而在所有成分中，含量最多的是2-氫正丁烯基苯酞，且四川平武的2-氫正丁烯基苯酞（92.551%）比西藏林芝（70.184%）的多;另外，在本研究中，西藏林芝和四川平武野生當(dāng)歸揮發(fā)油中都未檢測(cè)出藁本內(nèi)酯，有文獻(xiàn)曾報(bào)道過(guò)用水蒸汽蒸餾法提取當(dāng)歸揮發(fā)油會(huì)破壞藁本內(nèi)酯的結(jié)構(gòu)，使其分解產(chǎn)生其他物質(zhì)[5-6];也有研究表明當(dāng)歸揮發(fā)油很不穩(wěn)定，主要成分藁本內(nèi)酯在室溫容易異構(gòu)化[2];還有研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸屬于短日照植物，較長(zhǎng)的日照不利于以藁本內(nèi)酯為主的揮發(fā)性成分含量增加[7];因此，造成兩地野生當(dāng)歸揮發(fā)油中的成分和含量差異及未檢測(cè)出藁本內(nèi)酯這一結(jié)果的原因還有待進(jìn)一步研究。

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（收稿日期：2019-09-29?編輯：陶希睿）

基金項(xiàng)目：

作者簡(jiǎn)介：李潤(rùn)虹（1987-），女，漢族，本科，主管中藥師，研究方向?yàn)橹兴幣谥婆c分析。E-mail：runhong2006@163.com

通信作者：