產(chǎn)前診斷中胎兒性染色體嵌合體的發(fā)生率及其妊娠結(jié)局

王麗萍

（濟(jì)南市第二婦幼保健院，山東 濟(jì)南 250001）

產(chǎn)前診斷當(dāng)中染色體嵌合體現(xiàn)象比較常見，在臨床上可以分成常染色體嵌合和性染色體嵌合這兩種。性染色體嵌合的情況可能會(huì)導(dǎo)致胎兒性器官出現(xiàn)發(fā)育不全的問題，并且也會(huì)導(dǎo)致其他臟器的功能出現(xiàn)問題，甚至可能會(huì)導(dǎo)致胎兒出現(xiàn)智商低下等方面問題。在產(chǎn)前診斷當(dāng)中，比較常見的方法為羊水當(dāng)中胎兒脫落細(xì)胞培養(yǎng)及染色體核型分析檢查胎兒染色體，但是檢測的準(zhǔn)確度還沒有明顯的定論，因此本文進(jìn)行分析1995例胎兒羊水產(chǎn)前診斷病例中嵌合體的情況，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2010～2018年出現(xiàn)產(chǎn)前診斷指征，并且在我院產(chǎn)前診斷中心行羊水穿刺術(shù)，做胎兒羊水細(xì)胞培養(yǎng)及染色體核型分析的孕婦共1995例，孕婦的年齡在22～40歲的范圍內(nèi)，平均年齡為（30.1 2.28歲，孕周在17～25周的范圍內(nèi)，平均孕周為（22.5 0.56）周。

1.2 檢測方法

（1）患者在了解本次實(shí)驗(yàn)的情況下，進(jìn)行簽訂知情同意書，然后在超聲引導(dǎo)下，實(shí)施羊膜腔穿刺，從孕婦羊水當(dāng)中抽出20 ml進(jìn)行（開始抽取的的1～2 ml羊水需要除去），接著將樣本分別注入兩支10 ml一次性無菌離心管中，以1500 rpm離心10 min，除去上清，每管約留0.5 ml，吸管打散細(xì)胞制成細(xì)胞懸液，充分混勻，分別接種在2個(gè)裝有5 ml的完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，最后將其放置含5.0%CO2的37℃溫箱行開放式培養(yǎng)，培養(yǎng)5～7天。在這段時(shí)間內(nèi)，需要細(xì)心觀察細(xì)胞生長情況，并且根據(jù)生長情況進(jìn)行換液、傳代等操作。在發(fā)現(xiàn)羊水細(xì)胞貼壁生長，并且生長力比較旺盛，倒置顯微鏡下可以查看到多個(gè)細(xì)胞克隆的時(shí)候，可以獲得實(shí)驗(yàn)所需的細(xì)胞。每例羊水樣品在完成接種、培養(yǎng)、收獲、制片等操作的時(shí)候，都需要分別由兩名技術(shù)人員獨(dú)立完成，依據(jù)相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)，油鏡下進(jìn)行分析計(jì)數(shù)30個(gè)細(xì)胞，分析5個(gè)以上核型，發(fā)現(xiàn)嵌合體的時(shí)候增加計(jì)數(shù)和分析100個(gè)核型。

（2）患者在了解本次實(shí)驗(yàn)的情況下，進(jìn)行簽訂知情同意書，然后在超聲引導(dǎo)下，實(shí)施腹部抽取臍血1～2 ml，在獲得血樣之后需要采用血紅蛋白電泳方法進(jìn)行判斷有無污染母親血，接著將血樣注入無菌肝素鈉抗凝管，分別接種在2瓶外周血淋巴細(xì)胞完全培養(yǎng)液，最后將其放置在37℃的培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)68～72小時(shí)，制片過程和羊水保持一致。

1.3 嵌合體診斷標(biāo)準(zhǔn)

發(fā)現(xiàn)2種或2種以上的核型，參考臨床培養(yǎng)瓶法嵌合現(xiàn)象鑒別方案實(shí)施下一步操作：在2個(gè)或超過2個(gè)原位培養(yǎng)物當(dāng)中都會(huì)出現(xiàn)2種及以上的異常染色體核型，而且不同的核型也會(huì)存在2個(gè)及以上的細(xì)胞集落，并且異常核型是一致的，可以確定為“真性嵌合體”。

2 結(jié) 果

2.1 羊水細(xì)胞染色體核型及臍血或胎兒組織的染色體核型

在1995例產(chǎn)前診斷的患者當(dāng)中，經(jīng)過進(jìn)行檢測對(duì)應(yīng)的羊水標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)了8例嵌合體，其比例為0.40%，其中有4例為性染色體異常的嵌合體，4例數(shù)目異常染色體嵌合體。7例知情同意經(jīng)過臍血驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)有5例是真性嵌合體，與羊水中核型是相同的，其中有3例性染色體異常的嵌合體，2例數(shù)目異常的嵌合體，相符率為71.4%。

2.2 妊娠結(jié)局

在8例羊水細(xì)胞疑似嵌合體的孕婦當(dāng)中，有7例知情同意抽取臍靜脈血進(jìn)行臍血驗(yàn)證胎兒染色體。經(jīng)過驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)，有5例和羊水中核型是相同的，所以選擇終止妊娠。另外驗(yàn)證屬于染色體核型正常的2例孕婦選擇繼續(xù)妊娠，在胎兒出生之后，進(jìn)行6～12月的隨訪，沒有發(fā)現(xiàn)異常。未行臍血染色體檢查的1個(gè)病例，出生隨訪也未見異常。

3 討 論

本次研究當(dāng)中，在實(shí)施胎兒羊水細(xì)胞培養(yǎng)染色體核型分析的時(shí)候，發(fā)現(xiàn)的嵌合體情況達(dá)到了0.46%。在進(jìn)行臍血或胎兒組織培養(yǎng)驗(yàn)證之后，其相符率達(dá)到了71.4%。其中有2例經(jīng)過臍帶血驗(yàn)證確定為正常染色體核型的病例，在胎兒出生之后，進(jìn)行6～12月的隨訪，沒有發(fā)現(xiàn)異常。但是隨著時(shí)間的增加，幼兒逐漸發(fā)育，其各種表型特征也可能會(huì)出現(xiàn)，因此無法進(jìn)行排除嵌合體的可能，因此仍然需要長期的隨訪進(jìn)行確定驗(yàn)證羊水、臍血結(jié)果的準(zhǔn)確性[1-2]。如果發(fā)現(xiàn)羊水細(xì)胞培養(yǎng)是嵌合體，但是經(jīng)過臍血驗(yàn)證卻顯示為正常的染色體核型的時(shí)候，需要采用普勒超聲進(jìn)行仔細(xì)觀察，并且在胎兒出生之后，也需要進(jìn)行長期隨訪，確定幼兒是否屬于嵌合體，然后做好相關(guān)的治療準(zhǔn)備。

綜上所述，在產(chǎn)前診斷當(dāng)中，確定疑似胎兒羊水細(xì)胞染色體嵌合體的患者，需要及時(shí)實(shí)施胎兒臍帶血染色體分析，獲得正確的驗(yàn)證結(jié)果。