中醫(yī)藥治療骨關(guān)節(jié)炎作用機理研究概述※

崔世奎 楊海燕 何寶豐*

（重慶市銅梁區(qū)中醫(yī)院風(fēng)濕病科，重慶 400021）

中醫(yī)治療骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）臨床療效確切，不良反應(yīng)少，手段豐富，形成了大量系統(tǒng)的治療方法和有效方劑。近年中醫(yī)人開展了中醫(yī)治療骨關(guān)節(jié)作用機理的研究，試圖通過現(xiàn)代科學(xué)理論闡釋中醫(yī)藥治療方法的作用機理，為其提供現(xiàn)代醫(yī)學(xué)證據(jù)，現(xiàn)就我國當(dāng)代中醫(yī)治療骨關(guān)節(jié)炎作用機理的研究作一概述，以期有所發(fā)現(xiàn)。

1 對IL-1β水平的研究

OA關(guān)節(jié)滑液、關(guān)節(jié)軟骨及其基質(zhì)中均能檢測出高水平的IL-1β或IL-1，且在OA的動物模型中，關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞和基質(zhì)中免疫組化均呈陽性反應(yīng)，強度與OA病情程度成正比［1］。梁延琛等［2］觀察補腎活血方對骨關(guān)節(jié)炎（OA） 大鼠關(guān)節(jié)滑液白細(xì)胞介素1β（IL-1β） 及關(guān)節(jié)滑膜基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9） 表達(dá)的影響，補腎活血方灌胃可以抑制OA大鼠關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞分泌IL-1β及關(guān)節(jié)滑膜中MMP-9mRNA表達(dá)。補腎活血方可降低OA關(guān)節(jié)滑液中IL-1β的水平，同時使關(guān)節(jié)滑膜中MMP-9mRNA表達(dá)明顯減少。姚東文等［3］研究發(fā)現(xiàn)補腎活血湯可降低膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎（KOA） 患者關(guān)節(jié)液IL-1β、TNF-α的濃度，補腎活血湯可能在一定程度上是通過降低膝關(guān)節(jié)液中IL-1β、TNF-α的含量，升高TGF-β1的水平而發(fā)揮治療KOA的作用。盧思儉［4］觀察益腎方對兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型滑液IL-1β、TNF-α的影響，并與模型組和空白對照組進(jìn)行了對比，發(fā)現(xiàn)益腎方對兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型關(guān)節(jié)滑液IL-1β、TNF-α的水平有下調(diào)作用，降低OA關(guān)節(jié)滑液中IL-1β的水平是中醫(yī)治療骨關(guān)節(jié)炎的機理之一。

2 對滑膜MMP-9mRNA表達(dá)的研究

浙江中醫(yī)藥大學(xué)陳益丹等［5］采用不同針灸方法對膝骨關(guān)節(jié)炎模型細(xì)胞因子及基質(zhì)金屬蛋白酶影響的比較研究發(fā)現(xiàn)，針刺、溫針灸、電針均能調(diào)節(jié)膝骨關(guān)節(jié)炎模型血清中異常的 IL-1β、TNF-α、TGF-β1、MMP-1 水平，使軟骨退行性變的部分因素得到控制，從而起到延緩軟骨退變的作用，說明調(diào)控MMP-9mRNA表達(dá)也是中醫(yī)藥的作用靶點之一。

3 清骨橋蛋白 （OPN）及MMP（基質(zhì)金屬蛋白酶）

郭建利［6］研究了金天格膠囊對老年絕經(jīng)后膝骨關(guān)節(jié)炎患者血清骨橋蛋白（OPN）、基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）-3、白細(xì)胞介素 （IL）-1β及轉(zhuǎn)化生長因子（TGF） -β1水平的影響。金天格膠囊在治療后期可通過抑制OPN活性，減少炎癥因子的分泌，緩解炎癥反應(yīng)，抑制軟骨破壞。這可能與破壞OPN與MMP-3聯(lián)合形成的復(fù)合體有關(guān)，通過抑制OPN的表達(dá)，從而抑制kβ抑制因子信號通路，最終抑制MMP-3的表達(dá)。

4 TNF-α 的研究

曲保忠等［7］將新西蘭大白兔30只，隨機分為空白對照組、模型組、用藥組，每組10只。除空白對照組，均用Hulth法建立實驗性骨關(guān)節(jié)炎模型。造模成功后用藥組穿蛭膏右膝關(guān)節(jié)外敷，3 d，1次，4周后實驗家兔攝取側(cè)位X線片并采用放免法檢測關(guān)節(jié)沖洗液中細(xì)胞因子IL-1β和TNF-α的含量。與對照組相比，模型組關(guān)節(jié)液中IL-1β的含量和TNF-α的含量明顯升高（P＜0.05），與模型組相比，用藥組關(guān)節(jié)液中IL-1β的含量和TNFα的含量水平下降（P＜0.05）。以上研究表明，TNF-α是骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病的重要炎癥因子，穿蛭膏能夠降低TNF-α含量。

5 IL-6

嵇波等［8］觀察了膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎的兔子中IL-1β、IL-6及TNF-α水平。骨關(guān)節(jié)炎模型組IL-1β、IL-6、TNF-α含量較空白對照組均顯著升高，而采用針刀和電針治療組與空白對照組相比無顯著差別，與骨關(guān)節(jié)炎模型組相比則含量顯著下降。說明針刀松解法和電針均能阻抑膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎兔血清中IL-1β、IL-6及TNF-α的生成，提示兩種療法可能通過減少上述細(xì)胞因子的生成，在減輕關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞和滑膜細(xì)胞的結(jié)構(gòu)損傷、功能改變，阻抑基質(zhì)金屬蛋白酶的生成及減輕軟骨基質(zhì)的降解等方面發(fā)揮作用。

6 細(xì)胞因子CTXⅡ、COMP

細(xì)胞因子CTXⅡ、COMP在骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病中具有一定的作用。戚晴雪等［9］研究了低頻超聲促透通絡(luò)止痛中藥可能是通過降低血清中軟骨基質(zhì)相關(guān)細(xì)胞因子CTXⅡ、COMP和MMP3含量，減緩軟骨基質(zhì)的退變所致，從而減緩或阻止膝關(guān)節(jié)軟骨的退行性變。

7 ON

管劍龍等［10］研究發(fā)現(xiàn)，OA患者體內(nèi)ON含量較正常顯著增高，且關(guān)節(jié)液中ON含量明顯高于血清中，ON水平與病情程度成正相關(guān)，癥狀越重，血清和關(guān)節(jié)液中ON含量越高，提示在OA患者中內(nèi)源性O(shè)N過量釋放。因此ON也成為了中醫(yī)治療骨關(guān)節(jié)炎的重要研究對象。

戴政文等［11］將膝骨關(guān)節(jié)炎的模型兔分為4組，分別為模型組、HA組、鹿瓜多肽Ⅰ組、鹿瓜多肽Ⅱ組。各組分別給予對應(yīng)的藥物關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射治療。6周后抽取關(guān)節(jié)液，檢測關(guān)節(jié)液中NO、IL-1β的含量。結(jié)果：治療前各組NO、IL-1β含量均無顯著性差異，治療后鹿瓜多肽Ⅰ組關(guān)節(jié)液中NO、IL-1β含量與HA組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。鹿瓜多肽Ⅱ組關(guān)節(jié)液中NO、IL-1β含量與其他組相比均明顯降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義P＞0.05）。說明鹿瓜多肽注射液可以明顯抑制OA模型中關(guān)節(jié)液NO、IL-1β含量從而發(fā)揮膝關(guān)節(jié)OA的治療作用。

8 軟骨與葡糖氨基聚糖 （GAG）

有研究證明，軟骨與葡糖氨基聚糖在骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病中有著重要的作用，因此劉曉陽等［12］通過觀察骨關(guān)節(jié)炎模型兔的關(guān)節(jié)液中細(xì)胞因子PGE2和IL-1β的含量及關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)中葡糖氨基聚糖的含量；同時電鏡下觀察關(guān)節(jié)軟骨的表面光滑程度、軟骨細(xì)胞排列情況、軟骨基質(zhì)分布、細(xì)胞核數(shù)量、滑膜細(xì)胞及滑膜下組織。研究發(fā)現(xiàn)，消腫止痛散對關(guān)節(jié)液中PGE2、IL-1β的含量均有顯著降低作用，且GAG的含量隨治療的延長而增加；因此可以推定消腫止痛散通過提高GAG的含量是其治療作用之一。

9 細(xì)胞因子Bax、Bcl-2

細(xì)胞因子Bax、Bcl-2也是骨關(guān)節(jié)炎重要靶點之一。王興桂等［13］采用苗藥組方熏洗對家兔早期膝骨關(guān)節(jié)炎模型軟骨細(xì)胞因子Bax、Bcl-2影響的實驗研究，研究發(fā)現(xiàn)關(guān)節(jié)軟骨中Bcl-2的表達(dá)水平較高，Bax的表達(dá)較低，該研究表明苗藥組方作用于機體對凋亡的調(diào)控，主要是通過上調(diào)Bcl-2表達(dá)，下調(diào)Bax的表達(dá)，從而來保護(hù)軟骨細(xì)胞免受凋亡達(dá)到治療目的。

10 PGE2

周效思等［14］研究威靈仙對兔膝骨關(guān)節(jié)炎（OA） 關(guān)節(jié)液中白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子（TNF-α）、前列腺素E2（PGE2）含量的影響。研究發(fā)現(xiàn)威靈仙治療組關(guān)節(jié)滑液IL-1β、TNF-α、PGE2的含量低于OA模型生理鹽水對照組，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），而與正常對照組比較關(guān)節(jié)滑液 IL-1β、TNF-α、PGE2含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；OA模型生理鹽水對照組關(guān)節(jié)滑液IL-1β、TNF-α、PGE2的含量與正常空白對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。威靈仙水提取液不但可以降低兔膝骨關(guān)節(jié)炎局部IL-1β、TNF-α水平發(fā)揮治療作用，還能降低PGE2發(fā)揮治療作用。

11 金屬蛋白酶組織抑制因子 （TIMPs）

TIMPs屬于MMPs抑制物的一種，目前已發(fā)現(xiàn)包括TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3、TIMP-4共4種亞型。包飛等研究發(fā)現(xiàn)，電針干預(yù)后，OA軟骨細(xì)胞MMP-1、MMP-3表達(dá)顯著下調(diào)，TIMP-1表達(dá)上調(diào)［15］，表明電針可以糾正二者之間的失衡從而起到抑制ECM過度降解的作用［16］。TIMPs也成為了中醫(yī)治療骨關(guān)節(jié)炎的研究靶點。

12 G蛋白偶聯(lián)信號傳導(dǎo)系統(tǒng)

G蛋白偶聯(lián)信號傳導(dǎo)系統(tǒng)由G蛋白偶聯(lián)受體、G蛋白和效應(yīng)器分子組成，是一類重要的細(xì)胞跨膜信號傳導(dǎo)系統(tǒng)。G蛋白偶聯(lián)信號傳導(dǎo)系統(tǒng)主要有Gas、Gai、Gaq和Gao型蛋白組成，不同的G蛋白能特異地將受體和與之相適應(yīng)的效應(yīng)酶偶聯(lián)起來，活化相應(yīng)酶和離子通道，產(chǎn)生重要的第2信使，參與軟骨退變。G蛋白偶聯(lián)信號傳導(dǎo)系統(tǒng)可能是治療OA的潛在靶點。鄭文偉等［17］研究獨活寄生湯對骨關(guān)節(jié)炎軟骨退變的影響及其作用機制，結(jié)果顯示，獨活寄生湯可以升高Gas、Gao、Gaq蛋白的表達(dá)水平，降低Gai蛋白的表達(dá)水平，提示獨活寄生湯可能會通過激活G蛋白偶聯(lián)信號傳導(dǎo)通路，延緩OA軟骨退變。

總之，中醫(yī)藥治療骨關(guān)節(jié)炎具有明顯的抗炎鎮(zhèn)痛和改善骨質(zhì)代謝的作用，對關(guān)節(jié)軟骨也有一定的修復(fù)作用。當(dāng)代中醫(yī)除了在中醫(yī)理論指導(dǎo)下治療骨關(guān)節(jié)炎取得了明顯臨床療效，總結(jié)了許多有效方劑和治療方法外，還開展了中醫(yī)藥治療機理的研究，用現(xiàn)代科學(xué)方法研究證實中醫(yī)藥治療骨關(guān)節(jié)炎的作用靶點，不同的治療方法其可能作用的靶點有所區(qū)別，通過分析發(fā)現(xiàn)中醫(yī)藥治療骨關(guān)節(jié)炎療效確切，中醫(yī)治療能夠多靶點、多途徑發(fā)揮治療作用。