• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    正交試驗優(yōu)化超聲波-復合酶水解法提取中華鱉油的工藝

    2022-11-11 08:43:12單錢藝沈岳明張明興唐嘉誠陳彥婕包建強
    食品工業(yè)科技 2022年22期
    關(guān)鍵詞:精制蛋白酶水解

    單錢藝,沈岳明,張明興,唐嘉誠,陳彥婕,包建強,4,5,

    (1.上海海洋大學食品學院,上海 201306;

    2.上海市靜安區(qū)市場監(jiān)督管理局,上海 200072;3.寧波市明鳳漁業(yè)有限公司,浙江寧波 315464;

    4.上海水產(chǎn)品加工及貯藏工程技術(shù)研究中心,上海 201306;

    5.農(nóng)業(yè)部水產(chǎn)品貯藏保鮮質(zhì)量安全風險評估實驗室(上海),上海 201306)

    中華鱉作為我國最為常見的養(yǎng)殖鱉類,截止至2020年我國鱉類養(yǎng)殖產(chǎn)量已高達33.26萬噸,二十年間其養(yǎng)殖產(chǎn)量增長近十倍[1]。中華鱉油脂對動脈硬化有很好的預防作用,能減輕機體中膽固醇的沉積[2],調(diào)節(jié)胰島素抵抗(IR)[3],也逐步得到中老年消費者認可。

    國內(nèi)水產(chǎn)品加工副產(chǎn)物傳統(tǒng)油脂提取方法有壓榨法、稀堿水解法、超聲波有機溶劑提取法等。傳統(tǒng)物理提油法如壓榨法工藝簡單,但浪費嚴重,提油效率較低;稀堿水解法所得產(chǎn)物過氧化值和酸值過高;超聲波有機溶劑提取法易溶劑殘留、污染環(huán)境等問題。而目前新興的油脂提取方法有亞臨界流體萃取法、超臨界流體萃取法、復合酶水解法等。超臨界流體萃取法提取效率高,但其設(shè)備成本問題應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)仍有局限性。目前復合酶水解法以反應(yīng)溫和、工業(yè)化生產(chǎn)難度低等優(yōu)點在油脂加工中得到普及,Rubio-Rodriguez等[4]發(fā)現(xiàn)酶水解后產(chǎn)生的酶解液含有多種氨基酸還可再利用制作成各類風味調(diào)味品。由于酶價格昂貴,酶解時間長等問題,采用超聲波-復合酶水解法可進一步降低成本、提高提油率。此法已被應(yīng)用于核桃油、木棉籽油、柑橘皮油、米胚油、辣木籽油等植物油脂的提取[5-9],但此法應(yīng)用于提取動物油脂卻鮮有報道。本實驗以中華鱉加工副產(chǎn)物為原料,以超聲波協(xié)同復合酶水解方式,研究料液比、蛋白酶用量、酶比例、酶水解時間、酶水解溫度、超聲功率和超聲時間對中華鱉油提取率的影響,獲得最佳提取工藝條件,同時對其精制對其理化性質(zhì)、脂肪酸組分進行分析。為今后規(guī)?;C合利用中華鱉加工副產(chǎn)物提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    養(yǎng)殖中華鱉加工副產(chǎn)物(包括頭部、頸部、足部)中的淡黃色脂肪塊、鮮活中華鱉(平均每只在1300 g左右) 寧波市明鳳漁業(yè)有限公司;超聲波-復合酶水解法所得中華鱉油 實驗室自制;中性蛋白酶(200000 U/g)、堿性蛋白酶(200000 U/g)、酸性蛋白酶(100000 U/g)、木瓜蛋白酶(180000 U/g)、胃蛋白酶(120000 U/g)、胰蛋白酶(130000 U/g) 四川寶順生物科技有限公司;氯化鈉、氫氧化鉀、冰乙酸、氫氧化鈉、磷酸、石油醚、乙酸乙酯、正已烷、無水乙醇、三氟化硼甲醇溶液(14%)均為化學純,甲醇、正已烷均為色譜級 國藥集團化學試劑有限公司;37種脂肪酸甲酯混標 美國默克公司;食品級白土紅宇漂土科技有限公司。

    LXJ-IIB型飛鴿牌低速大容量多管離心機 上海安亭科學儀器廠;HB10型德國艾卡數(shù)顯型加熱鍋德國IKA公司;DHG-9073BS-III型新苗恒溫鼓風干燥機 上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司;DKS28型精宏恒溫水浴鍋 上海精宏實驗設(shè)備有限公司;JJ-2型組織搗碎勻漿機 武漢格萊莫檢測設(shè)備有限公司;力辰旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海力辰儀器科技有限公司;PB-10型酸度計 德國Sartorius公司;電烘箱上海雋思實驗儀器有限公司;ME204E型梅特勒-托利多電子天平 瑞士Mettler Toledo公司;KQ-300VD型三頻數(shù)控超聲波清洗機 昆山舒美超聲儀器有限公司;UV3000PC型美譜達紫外分光光度計 上海美譜達儀器有限公司;Nexis GC-2030型島津氣相色譜儀(含氫火焰離子檢測器) 日本島津公司。

    1.2 實驗方法

    1.2.1 樣品前處理 將活中華鱉洗凈急殺,從中華鱉頭部、頸部、足部取出30 g左右淡黃色塊狀脂肪,用蒸餾水洗凈血水并瀝干,將其勻漿呈糜狀,分6份以每份5 g左右進行分裝,為防止其氧化變質(zhì),將脂肪塊抽真空密封,于-18 ℃低溫冰柜存放。實驗前將樣品于0~4 ℃冰箱解凍,備用。

    1.2.2 蛋白酶的篩選 依據(jù)實驗選定的六種蛋白酶的不同最適酶解溫度[10-11],按料液比1:1來添加蒸餾水和解凍后的脂肪塊勻漿,不同種蛋白酶均以2%酶用量(占油重,下同),酶解2 h,另不添加蛋白酶作空白樣進行實驗對照。以中華鱉油提取率為參考指標來判斷提取效果,從中選取提取效果較好的兩種蛋白酶,按蛋白酶用量占油重質(zhì)量,以對應(yīng)蛋白酶比例(以下簡稱酶比例,即中性蛋白酶與堿性蛋白酶之比)分別準確稱取中性蛋白酶與堿性蛋白酶并對其混合作為復合蛋白酶,pH控制在7.5~8.5范圍內(nèi)進行酶解。

    1.2.3 中華鱉油的提取 中華鱉加工副產(chǎn)物脂肪勻漿于0~4 ℃解凍,將解凍后5 g左右樣品按料液比1:2添加蒸餾水及2%蛋白酶用量(中性蛋白酶與堿性蛋白酶按1:1混合),進行20 min(功率180 W)超聲處理,并在50 ℃恒溫條件下進行2 h酶解反應(yīng),酶解后在在離心機中離心(轉(zhuǎn)速5000 r/min,時間25 min),離心后提取酶解液上層油脂層,稱重并計算得到中華鱉油提取率,平行試驗三次取平均值。中華鱉油提取率(%)=提取后鱉油的質(zhì)量(g)/提取前脂肪塊的總質(zhì)量(g)×100。

    1.2.4 單因素實驗設(shè)計

    1.2.4.1 料液比對中華鱉油提取率的影響 蛋白酶用量為2%,酶比例為1:1,酶水解時間為2 h,酶水解溫度為55 ℃,超聲功率為180 W,超聲時間為20 min,料液比為 1:0.5、1:1、1:1.5、1:2、1:2.5、1:3進行酶解反應(yīng),以中華鱉油提取率高低來確定料液比。

    1.2.4.2 蛋白酶用量對中華鱉油提取率的影響 料液比為1:2,酶比例為1:1,酶水解時間為2 h,酶水解溫度為55 ℃,超聲功率為180 W,超聲時間為20 min,蛋白酶用量為0.8%、1.2%、1.6%、2%、2.4%、2.8%進行酶解反應(yīng),以中華鱉油提取率高低來確定蛋白酶用量。

    1.2.4.3 酶比例對中華鱉油提取率的影響 料液比為1:2,蛋白酶用量為2.4%,酶水解時間為2 h,酶水解溫度為55 ℃,超聲功率為180 W,超聲時間為20 min,酶比例為 2:1、1.5:1、1:1、1:1.5、1:2進行酶解反應(yīng),以中華鱉油提取率高低來確定酶比例。

    1.2.4.4 酶水解時間對中華鱉油提取率的影響 料液比為1:2,蛋白酶用量為2.4%,酶比例為1:1.5,酶水解溫度為55 ℃,超聲功率為180 W,超聲時間為20 min,酶水解時間為 0.5、1、1.5、2、2.5、3 h進行酶解反應(yīng),以中華鱉油提取率高低來確定酶水解時間。

    1.2.4.5 酶水解溫度對中華鱉油提取率的影響 料液比為1:2,蛋白酶用量為2.4%,酶比例為1:1.5,酶水解時間為2 h,超聲功率為180 W,超聲時間為20 min,酶水解溫度為 45、50、55、60、65、70 ℃ 進行酶解反應(yīng),以中華鱉油提取率高低來確定酶水解溫度。

    1.2.4.6 超聲功率對中華鱉油提取率的影響 料液比為1:2,蛋白酶用量為2.4%,酶比例為1:1.5,酶水解時間為2 h,酶水解溫度為65 ℃,超聲時間為20 min,超聲功率為 140、180、220、240、260、300 W進行酶解反應(yīng),以中華鱉油提取率高低來確定超聲功率。

    1.2.4.7 超聲時間對中華鱉油提取率的影響 料液比為1:2,蛋白酶用量為2.4%,酶比例為1:1.5,酶水解時間為2 h,酶水解溫度為65 ℃,超聲功率為220 W,超聲時間為 10、15、20、25、30 min,進行酶解反應(yīng),以中華鱉油提取率高低來確定超聲功率。

    1.2.5 正交試驗設(shè)計 在單因素實驗的結(jié)果基礎(chǔ)上,進行正交試驗設(shè)計分析。選取料液比(A)、蛋白酶用量(B)、酶比例(C)、酶水解時間(D)、酶水解溫度(E)、超聲功率(F)、超聲時間(G)作為正交試驗因素,以中華鱉油提取率為參考指標,采用正交試驗進行工藝優(yōu)化,以確定中華鱉油最佳提取工藝條件,正交實驗因素水平編碼見表1。

    表1 七因素三水平正交試驗因素水平設(shè)計Table 1 Factor level design of seven factors three levels orthogonal experiment

    1.2.6 中華鱉油的精制 參考[12-15]對魚油的精制方法,對中華鱉油進行脫膠、脫酸、脫色、脫腥的精制處理。中華鱉油中加入0.75%(占油重,下同)磷酸溶液(濃度為75%),水浴鍋加熱至80 ℃,加熱攪拌5 min,轉(zhuǎn)速5000 r/min離心后取上層油樣。脫膠后中華鱉油加入8%氫氧化鈉溶液(濃度為7.5%),水浴鍋加熱至75 ℃,加熱攪拌15 min,轉(zhuǎn)速5000 r/min離心后取上層油樣。脫酸后中華鱉油加入25%食品級活性白土加熱至55 ℃,加熱攪拌20 min,轉(zhuǎn)速5000 r/min離心后取上層油樣。在真空條件下,加熱至65 ℃,利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀對脫色后中華鱉油進行45 min脫腥處理。

    1.2.7 中華鱉油理化指標及脂肪酸組成測定 參照GB 5009.236-2016《動植物油脂水分及揮發(fā)物的測定》(第二法)對油脂進行測定;參照GB/T 5532-2008《動植物油脂 碘值的測定》 對碘值進行測定;參照GB/T 15688-2008《動植物油脂 不溶性雜質(zhì)含量的測定》對不溶性雜質(zhì)含量進行測定;參照GB/T 5009.229-2016《食品中酸價的測定》(第一法)對酸值進行測定;參照GB/T 5009.227-2016《食品中過氧化值的測定》(第一法)對過氧化值進行測定;參照GB 5009.168-2016《食品中脂肪酸的測定》(第一法)對脂肪酸進行測定。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    本研究實驗數(shù)據(jù)用軟件SPSS 22.0、Excel 2010進行實驗設(shè)計、統(tǒng)計分析及作圖。每組實驗均進行3次重復實驗,所有結(jié)果均以“平均值±標準差”的形式表示。用SPSS 22.0進行差異顯著性分析,P<0.05表示差異顯著。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 蛋白酶的選取

    對于添加不同品種的蛋白酶之后,提油實驗呈現(xiàn)效果有不同程度的提升[16-17]。利用蛋白酶分解蛋白質(zhì)與脂肪結(jié)合狀態(tài),使油脂易游離出來。

    如圖1結(jié)果所示,提油效果按顯著程度排序:中性蛋白酶>堿性蛋白酶>酸性蛋白酶>木瓜蛋白酶>胃蛋白酶>胰蛋白酶,未加蛋白酶的空白樣呈現(xiàn)中華鱉油提取率最低,僅為22.54%。蛋白酶品種不一,酶切位點也各不相同,針對不同樣品中油脂提取效果也有所差異[18]。較其他蛋白酶相比,中性蛋白酶與堿性蛋白酶在中華鱉油提取率為65%以上,且兩種蛋白酶提取率存在顯著性差異(P<0.05)。

    圖1 不同蛋白酶對中華鱉油提取效果Fig.1 Extraction effect of different proteases on Chinese softshell turtle crude oil

    參照1.2.2方法,將2%蛋白酶用量(其中中性蛋白酶與堿性蛋白酶按1:1混合),比較單一酶與復合酶對中華鱉油提取率影響,如圖2可以看出,使用復合蛋白酶的油脂提取率高于兩種單一蛋白酶,中性蛋白酶與堿性蛋白酶之間可能存在協(xié)同作用,聯(lián)合使用能提升提油效果,因此選擇中性蛋白酶和堿性蛋白酶作復合酶為后續(xù)試驗研究。

    圖2 單一酶與復合酶對中華鱉油提取效果Fig.2 Extraction effect of single enzyme and compound enzyme on Chinese softshelled turtle oil

    2.2 單因素實驗結(jié)果

    2.2.1 料液比的選擇 由圖3結(jié)果可知,料液比從1:0.5至1:2,中華鱉油提取率呈上升趨勢。當料液比為1:2時,中華鱉油提取率為71.22%。料液比從1:2至1:3,中華鱉油提取效果反而有所下降。這表明當添加蒸餾水過少時,酶分子不能與底物充分接觸,導致蛋白酶活性無法發(fā)揮,造成油脂提取不完全。而過多添加蒸餾水使酶分子擴散范圍變大,降低蛋白酶與底物接觸效率[19],會影響中華鱉油提取率。因此綜合從效益與成本方面看,料液比定為1:2最為適宜。

    圖3 料液比與中華鱉油提取率關(guān)系Fig.3 Relationship between the ratio of solid to liquid and the extraction rate of Chinese softshell turtle crude oil

    2.2.2 蛋白酶用量的選擇 由圖4結(jié)果可知,隨著蛋白酶用量的增加,中華鱉油提取率呈先上升后下降的趨勢。當?shù)鞍酌赣昧繛?.8%時,酶分子控制底物反應(yīng),而隨著酶用量增大,酶分子之間接觸面變大互相影響,降低酶分子對底物反應(yīng)效率,導致中華鱉油提取率降低。王文婷等[20]研究酶水解提取鯽魚下腳料魚油時,酶用量的增加導致提取率呈先升后降的結(jié)果,圖形基本與其實驗結(jié)果相近。因此,蛋白酶用量2.4%最為適宜。

    圖4 蛋白酶用量與中華鱉油提取率關(guān)系Fig.4 Relationship between the amount of protease and the extraction rate of Chinese softshell turtle crude oil

    2.2.3 酶比例的選擇 中性蛋白酶用量與堿性蛋白酶用量按不同比例混合,對中華鱉油提取率影響由圖5結(jié)果可知,當中性蛋白酶用量與堿性蛋白酶用量比例為1:1.5時,中華鱉油提取率可達75.15%。而當酶比例為1:2時,中華鱉油提取率開始下降。不同蛋白酶催化分解的基團不同,中性蛋白酶與堿性蛋白酶相比更能催化分解出中華鱉的油脂[21-22],堿性蛋白酶的占比可能增加至一定量時,中性蛋白酶與堿性蛋白酶之間出現(xiàn)了競爭現(xiàn)象,抑制了酶的催化作用,導致中華鱉油提取率下降。

    圖5 酶比例與中華鱉油提取率關(guān)系Fig.5 Relationship between enzyme ratio and the extraction rate of Chinese softshell turtle crude oil

    2.2.4 酶水解時間的選擇 由圖6結(jié)果可知,隨著酶解反應(yīng)時間的加長,中華鱉油提取率呈急升緩降的趨勢。這是由于酶解時間過短,僅僅部分酶分子與底物反應(yīng),提取效果不佳。在酶水解時間為2 h時,蛋白酶與底物酶解反應(yīng)充分,中華鱉油提取率達峰值。隨著酶水解時間繼續(xù)延長,因為中華鱉油中富含不飽和脂肪酸被氧化,中華鱉油品質(zhì)會隨之降低。因此,將酶水解時間定為2 h。

    圖6 酶水解時間與中華鱉油提取率關(guān)系Fig.6 Relationship between the enzymatic hydrolysis time and the extraction rate of Chinese softshell turtle crude oil

    2.2.5 酶水解溫度的選擇 由圖7結(jié)果可知,隨著酶水解溫度的穩(wěn)步升高至65 ℃,中華鱉油提取率高達78.6%。這是由于溫度的升高會促使酶分子加速運動,從而激發(fā)蛋白酶活性,與底物接觸頻率增多,提高酶促反應(yīng)速度。而溫度繼續(xù)升高,導致酶分子活性鈍化,待溫度達到一定限制時,可直接導致蛋白酶直接失活,酶分子將停止與底物發(fā)生反應(yīng)。因此選擇酶水解溫度為65 ℃最理想。

    圖7 酶水解溫度與中華鱉油提取率關(guān)系Fig.7 Relationship between the enzymatic hydrolysis temperature and the extraction rate of Chinese softshell turtle crude oil

    2.2.6 超聲功率的選擇 由圖8結(jié)果可知,當超聲功率增強至220 W,中華鱉油提取率最大值達到81.18%。超聲波具有空化效應(yīng),利用超聲波輔助蛋白酶,可改變酶的構(gòu)象,從而改變酶分子與底物的結(jié)合程度,催化酶分子活性[23]。超聲波對底物均質(zhì)作用越明顯,伴隨振動產(chǎn)生的能量加快了酶分子運動,增加了酶與底物的接觸概率。在超聲功率140~220 W范圍內(nèi),鱉油提取率呈上升趨勢,超聲功率220~300 W,鱉油提取率反而下降。由于超聲功率過大,超聲波空化效應(yīng)產(chǎn)生的微泡生成自由基,使部分酶分子被降解,說明超聲功率針對不同蛋白酶只有在一定范圍內(nèi)有促進作用[24]。因此,超聲功率選擇為220 W最適宜。

    圖8 超聲功率與中華鱉油提取率關(guān)系Fig.8 Relationship between ultrasonic power and the extraction rate of Chinese softshell turtle crude oil

    2.2.7 超聲時間的選擇 由圖9結(jié)果可知,隨著超聲時間的延長,超聲時間25 min,中華鱉油提取率達最大值81.08%。說明隨著超聲時間延長,酶分子運動加快,酶與底物充分接觸,促進了酶解反應(yīng)的進行。超聲空化作用還可以改變蛋白質(zhì)的次生結(jié)構(gòu)和亞基組成,從而提高蛋白質(zhì)的酶解敏感性[25]。而當超聲時間延長至30 min時,中華鱉油提取率明顯降低。有研究表明超聲處理40 min內(nèi)不僅不會導致酶失活,反而有一定的激活作用,即使超聲時間達100 min,酶活僅損失5%[26-27]。長時間的超聲處理使體系內(nèi)熱能增加,空化效應(yīng)增強,液體介質(zhì)中微泡的形成,氣泡中生成的自由基可能會破壞酶分子構(gòu)象,導致后續(xù)酶解過程中與底物結(jié)合的酶變少,鱉油得率降低。因此,超聲時間選擇為25 min最理想。

    圖9 超聲時間與中華鱉油提取率關(guān)系Fig.9 Relationship between ultrasonic time and the extraction rate of Chinese softshell turtle crude oil

    2.3 正交試驗結(jié)果

    基于單因素實驗結(jié)果,選擇以料液比(A)、蛋白酶用量(B)、酶比例(C)、酶水解時間(D)、酶水解溫度(E)、超聲功率(F)、超聲時間(G)作為正交試驗因素,以中華鱉油提取率為參考指標,再利用七因素三水平正交試驗設(shè)計進行分析,正交試驗結(jié)果見表2。

    由表2~表3結(jié)果所示,在使用超聲波-復合酶水解法提取中華鱉加工副產(chǎn)物中鱉油的過程,七個變量因素對中華鱉油提取率影響程度大小依次為:酶水解溫度>酶比例>蛋白酶用量>超聲時間>料液比>酶水解時間>超聲功率,其中酶比例和酶水解溫度對中華鱉油提取率影響顯著(0.01<P<0.05)。得到超聲波-復合酶水解法提取中華鱉油的最佳工藝條件為A1B2C2D2E2F1G3,即料液比為1:1.5、蛋白酶用量為2.4%、酶比例為1:1.5(中性蛋白酶與堿性蛋白酶用量之比)、酶水解時間2 h、酶水解溫度65 ℃、超聲功率180 W、超聲時間30 min。在最優(yōu)水平條件下進行驗證試驗[28-29],對此進行三次平行試驗,得到中華鱉油提取率為81.65%±0.62%,與正交試驗結(jié)果基本相近,進一步證明最佳工藝的可行性。

    表2 正交試驗設(shè)計及結(jié)果Table 2 Design and results of orthogonal experiment

    表3 正交試驗方差分析Table 3 Orthogonal test analysis of variance

    2.4 精制前后中華鱉油理化指標對比

    通過超聲波-復合酶水解法所得中華鱉油部分理化指標不能滿足國家水產(chǎn)行業(yè)(SC/T 3502-2016)中粗魚油的一級標準,因此需對中華鱉油進行進一步處理。由于中華鱉油中含有黏液質(zhì)、部分蛋白質(zhì)、色素、水分等雜質(zhì),通過參照1.2.7方法進行精制處理。由表4結(jié)果可知,經(jīng)過精制中華鱉油外觀澄清,微黃色,腥臭味不明顯,無酸敗味。從各項理化指標對比來看,均優(yōu)于中華鱉油品質(zhì),且均符合國家水產(chǎn)行業(yè)標準(SC/T 3502-2016)精制魚油一級標準。

    表4 中華鱉油與精制中華鱉油理化指標對比Table 4 Comparison of physical and chemical indexes between Chinese softshell turtle crude oil and refined Chinese softshell turtle oil

    2.5 精制中華鱉油脂肪酸組成分析

    運用氣相色譜分析精制中華鱉油的脂肪酸組成及含量,結(jié)果見表5。由表5結(jié)果可知,通過氣相色譜儀測定所得精制中華鱉油含有脂肪酸共計28種。這與其它魚油研究相比,脂肪酸組成略有差異,可能是由于實驗對象品種、季節(jié)氣候條件等差異引起的[30-31]。其中油酸、棕櫚酸、亞油酸所占比例較高,飽和脂肪酸占總量23.81 %,單不飽和脂肪酸占總量46.94 %,多不飽和脂肪酸占總量26.38 %。精制中華鱉油中含有ω-3脂肪酸占總量11.83 %,ω-6脂肪酸占總量15.51 %。ω-3脂肪酸、ω-6脂肪酸作為人體體內(nèi)無法自身合成的“好脂肪”[32],能有效降血壓、降血液黏稠度、軟化血管作用。有研究表明,體內(nèi)ω-3脂肪酸含量高的人群,心源性猝死的發(fā)病率比ω-3低的人群低81 %[33]。此外,中華鱉油中含有DHA與EPA含量占總量10.05 %。DHA和EPA具有促進腦部發(fā)育、促進視網(wǎng)膜光感細胞的成熟、治療自身免疫缺陷等作用。作為功能性食品、母嬰食品的寵兒,深受嬰幼兒和中老年人青睞。

    表5 精制中華鱉油脂肪酸組成Table 5 Refined oil composition of fatty acids

    3 結(jié)論

    基于單因素結(jié)合正交試驗進行工藝優(yōu)化,得到影響超聲波-復合酶水解法中華鱉油提取率最佳工藝條件:料液比為1:1.5、蛋白酶用量為2.4 %、酶比例為1:1.5(中性蛋白酶:堿性蛋白酶用量)、酶水解時間2 h、酶水解溫度65 ℃、超聲功率180 W、超聲時間30 min,中華鱉油提取率為81.65%±0.62%。此法所得中華鱉油精制后,各項理化指標均符合國家水產(chǎn)行業(yè)標準(SC/T 3502-2016)精制魚油一級標準。通過氣相色譜儀測定所得精制中華鱉油含有脂肪酸共計28種。由此可見,通過超聲波-復合酶水解法可以提高中華鱉油提取效果且品質(zhì)較優(yōu),后續(xù)需要進一步探究此法對不同品種鱉油提取的影響,為規(guī)?;C合利用鱉種加工副產(chǎn)物提供理論參考。

    猜你喜歡
    精制蛋白酶水解
    逆轉(zhuǎn)脂肪肝,繞不開“精制碳水”之結(jié)
    肝博士(2024年1期)2024-03-12 08:39:04
    思鄉(xiāng)與蛋白酶
    文苑(2018年22期)2018-11-19 02:54:30
    番石榴中結(jié)合多酚堿水解與酸水解法提取工藝優(yōu)化的比較
    野馬追倍半萜內(nèi)酯精制工藝的優(yōu)化
    中成藥(2017年10期)2017-11-16 00:50:02
    多胚蛋白酶 高效養(yǎng)畜禽
    鹽類的水解考點探究
    中學化學(2016年2期)2016-05-31 05:27:22
    鹽類水解的原理及應(yīng)用
    IgA蛋白酶在IgA腎病治療中的潛在價值
    PTA裝置精制單元預熱系統(tǒng)改造
    冷卻豬肉中產(chǎn)蛋白酶腐敗菌的分離鑒定
    日韩一本色道免费dvd| 婷婷色麻豆天堂久久| 国内精品美女久久久久久| 哪个播放器可以免费观看大片| 日日撸夜夜添| 久久韩国三级中文字幕| 在线免费十八禁| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 欧美97在线视频| 国产老妇女一区| av国产免费在线观看| 久久ye,这里只有精品| 国模一区二区三区四区视频| 高清毛片免费看| 精品少妇黑人巨大在线播放| 国产乱人视频| 有码 亚洲区| 午夜福利视频1000在线观看| 99热这里只有精品一区| 精品酒店卫生间| 亚洲自拍偷在线| 久久久精品94久久精品| 国产精品熟女久久久久浪| 直男gayav资源| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产亚洲最大av| 亚洲国产色片| av女优亚洲男人天堂| 午夜激情福利司机影院| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 人体艺术视频欧美日本| 亚洲美女视频黄频| 在线观看免费高清a一片| 国产精品久久久久久精品古装| 午夜视频国产福利| 欧美精品一区二区大全| 国产成人精品婷婷| 在现免费观看毛片| 国产色爽女视频免费观看| 网址你懂的国产日韩在线| 欧美日韩视频精品一区| 综合色丁香网| 美女视频免费永久观看网站| 十八禁网站网址无遮挡 | 久久久a久久爽久久v久久| 女人久久www免费人成看片| 精品人妻视频免费看| 久久ye,这里只有精品| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 国产成人一区二区在线| 免费看a级黄色片| 97在线视频观看| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 国产视频内射| 18+在线观看网站| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 内射极品少妇av片p| 只有这里有精品99| 亚洲最大成人av| 国产黄色视频一区二区在线观看| 久久久精品免费免费高清| 日韩一本色道免费dvd| 久久久久久久午夜电影| 少妇熟女欧美另类| 国产又色又爽无遮挡免| 2021天堂中文幕一二区在线观| 嫩草影院精品99| 一级黄片播放器| 国产午夜精品一二区理论片| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 深爱激情五月婷婷| 干丝袜人妻中文字幕| 91狼人影院| 亚洲精品,欧美精品| 中国国产av一级| 青春草国产在线视频| 亚洲无线观看免费| 免费观看a级毛片全部| 国产黄片视频在线免费观看| 亚洲人成网站在线播| 国产精品.久久久| 日韩精品有码人妻一区| 午夜免费鲁丝| 国产91av在线免费观看| 五月开心婷婷网| 五月伊人婷婷丁香| 97热精品久久久久久| 97在线人人人人妻| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 一区二区av电影网| 亚洲国产精品成人综合色| 中文字幕亚洲精品专区| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲精品乱久久久久久| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲欧美成人精品一区二区| 蜜臀久久99精品久久宅男| 美女国产视频在线观看| 舔av片在线| 亚洲av.av天堂| 中文字幕av成人在线电影| 只有这里有精品99| 国产亚洲91精品色在线| 色视频在线一区二区三区| 一个人观看的视频www高清免费观看| 亚洲欧美清纯卡通| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产精品一区二区性色av| 久久97久久精品| 日韩免费高清中文字幕av| 又爽又黄无遮挡网站| 免费少妇av软件| 成年版毛片免费区| 美女主播在线视频| 亚洲av福利一区| 国产高清国产精品国产三级 | 亚洲一区二区三区欧美精品 | 日韩成人伦理影院| 久久久久久久久久久免费av| 两个人的视频大全免费| 26uuu在线亚洲综合色| 少妇的逼好多水| 午夜免费鲁丝| 丝袜脚勾引网站| 老女人水多毛片| 欧美激情久久久久久爽电影| 久久久午夜欧美精品| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 日本爱情动作片www.在线观看| 2021少妇久久久久久久久久久| 中文字幕制服av| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲国产精品999| 永久网站在线| 精品国产三级普通话版| 有码 亚洲区| 美女cb高潮喷水在线观看| 晚上一个人看的免费电影| 80岁老熟妇乱子伦牲交| av免费观看日本| 六月丁香七月| 秋霞伦理黄片| 中国国产av一级| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产有黄有色有爽视频| 在线观看国产h片| 美女视频免费永久观看网站| 免费观看av网站的网址| 久久久久久国产a免费观看| 天堂俺去俺来也www色官网| 九草在线视频观看| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 下体分泌物呈黄色| 天天一区二区日本电影三级| 国产成人免费观看mmmm| 午夜激情福利司机影院| 少妇高潮的动态图| 一级片'在线观看视频| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲经典国产精华液单| 精品久久国产蜜桃| 国产精品蜜桃在线观看| 亚洲av日韩在线播放| 国产精品爽爽va在线观看网站| 美女视频免费永久观看网站| 熟女电影av网| 男女国产视频网站| 特大巨黑吊av在线直播| 大陆偷拍与自拍| 黑人高潮一二区| 国产乱来视频区| 色5月婷婷丁香| 亚洲av成人精品一二三区| 99久国产av精品国产电影| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲怡红院男人天堂| av卡一久久| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 午夜日本视频在线| 国产精品久久久久久av不卡| 日本一本二区三区精品| 午夜日本视频在线| 精品久久久精品久久久| 亚洲欧美成人精品一区二区| 99久久中文字幕三级久久日本| 男人和女人高潮做爰伦理| 午夜免费男女啪啪视频观看| 免费av毛片视频| 国产精品99久久99久久久不卡 | 欧美少妇被猛烈插入视频| 又爽又黄无遮挡网站| 熟女电影av网| 日韩成人av中文字幕在线观看| 新久久久久国产一级毛片| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 高清在线视频一区二区三区| 国产极品天堂在线| 国产亚洲av嫩草精品影院| 在线播放无遮挡| 少妇人妻 视频| 国产淫片久久久久久久久| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 人体艺术视频欧美日本| 亚洲av一区综合| 中文在线观看免费www的网站| 国产永久视频网站| 91久久精品国产一区二区成人| 在线观看一区二区三区激情| av免费观看日本| 日韩亚洲欧美综合| 国产探花极品一区二区| 亚洲国产欧美人成| 欧美成人午夜免费资源| 国产黄色免费在线视频| 一区二区三区乱码不卡18| 97超碰精品成人国产| 亚洲国产av新网站| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 80岁老熟妇乱子伦牲交| 免费电影在线观看免费观看| 又爽又黄无遮挡网站| 制服丝袜香蕉在线| 欧美激情在线99| 成人美女网站在线观看视频| 国产一区二区在线观看日韩| 在线 av 中文字幕| 国产黄片美女视频| 男女国产视频网站| 免费黄频网站在线观看国产| 少妇人妻一区二区三区视频| 男人和女人高潮做爰伦理| 日韩国内少妇激情av| 大码成人一级视频| 亚洲人成网站在线播| 日韩av在线免费看完整版不卡| 男男h啪啪无遮挡| 乱码一卡2卡4卡精品| 午夜日本视频在线| 2021少妇久久久久久久久久久| 亚洲欧美成人精品一区二区| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 日本爱情动作片www.在线观看| 久久久久国产精品人妻一区二区| av黄色大香蕉| 亚洲无线观看免费| 国产亚洲5aaaaa淫片| 一级片'在线观看视频| 久久精品国产亚洲网站| 成年女人在线观看亚洲视频 | 国产黄片视频在线免费观看| 嘟嘟电影网在线观看| 日韩国内少妇激情av| 最新中文字幕久久久久| 精品久久久精品久久久| 日本一本二区三区精品| 边亲边吃奶的免费视频| 欧美国产精品一级二级三级 | 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 亚洲国产精品国产精品| 欧美xxⅹ黑人| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 性色avwww在线观看| 男女那种视频在线观看| 91久久精品电影网| 久久久精品94久久精品| 成年免费大片在线观看| 国产伦在线观看视频一区| av国产免费在线观看| 亚洲国产最新在线播放| 欧美成人午夜免费资源| 男的添女的下面高潮视频| av国产久精品久网站免费入址| 国产精品不卡视频一区二区| 国产男女内射视频| 99热这里只有是精品50| 亚洲国产av新网站| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲精品自拍成人| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 成人亚洲精品一区在线观看 | 一二三四中文在线观看免费高清| 亚洲欧洲日产国产| 国产日韩欧美在线精品| 丰满人妻一区二区三区视频av| 成年免费大片在线观看| 久久久午夜欧美精品| 男人和女人高潮做爰伦理| 黄色日韩在线| 最近中文字幕高清免费大全6| 日韩一区二区视频免费看| 亚洲国产精品专区欧美| 国产一级毛片在线| 在线看a的网站| 美女内射精品一级片tv| 色综合色国产| 亚洲精品久久午夜乱码| 国产伦理片在线播放av一区| 国国产精品蜜臀av免费| 中文字幕久久专区| 一本色道久久久久久精品综合| 99热这里只有精品一区| 99热国产这里只有精品6| 亚洲精品成人av观看孕妇| 日本-黄色视频高清免费观看| 一二三四中文在线观看免费高清| 天堂网av新在线| 日本熟妇午夜| 成人欧美大片| 九九在线视频观看精品| 亚洲美女视频黄频| 久久国内精品自在自线图片| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲欧美精品专区久久| 97热精品久久久久久| 欧美高清成人免费视频www| 男女下面进入的视频免费午夜| 中国国产av一级| 大片免费播放器 马上看| 日韩在线高清观看一区二区三区| 亚洲av免费在线观看| av女优亚洲男人天堂| 男人添女人高潮全过程视频| 亚洲真实伦在线观看| 在线观看免费高清a一片| 国产欧美日韩精品一区二区| 永久免费av网站大全| 久久精品综合一区二区三区| 久久精品久久久久久久性| 欧美日韩综合久久久久久| 国产av不卡久久| 国产成人aa在线观看| 亚洲av二区三区四区| 一级a做视频免费观看| av卡一久久| 一本久久精品| 99re6热这里在线精品视频| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 秋霞在线观看毛片| 99精国产麻豆久久婷婷| 黄色怎么调成土黄色| 熟妇人妻不卡中文字幕| 亚洲精品aⅴ在线观看| 久久综合国产亚洲精品| 99热这里只有是精品50| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 国产精品人妻久久久影院| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 精品国产露脸久久av麻豆| 99热国产这里只有精品6| 高清av免费在线| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 我的老师免费观看完整版| 少妇的逼好多水| 晚上一个人看的免费电影| 波野结衣二区三区在线| 国产精品三级大全| 成人亚洲精品av一区二区| 日韩国内少妇激情av| 丰满人妻一区二区三区视频av| 婷婷色av中文字幕| 亚洲精品aⅴ在线观看| 六月丁香七月| 久久这里有精品视频免费| 国产成人91sexporn| 亚洲成人一二三区av| 国产高潮美女av| 久久97久久精品| 波多野结衣巨乳人妻| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 婷婷色av中文字幕| 三级国产精品欧美在线观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 免费在线观看成人毛片| 国产毛片a区久久久久| av一本久久久久| 久久久久久久国产电影| 国产高潮美女av| 一个人观看的视频www高清免费观看| 亚洲在线观看片| 黄片wwwwww| 国产69精品久久久久777片| 寂寞人妻少妇视频99o| 美女cb高潮喷水在线观看| 联通29元200g的流量卡| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 日韩一区二区视频免费看| 高清日韩中文字幕在线| 99热全是精品| 成人亚洲精品一区在线观看 | av在线观看视频网站免费| av国产久精品久网站免费入址| 成人欧美大片| 国产伦精品一区二区三区视频9| 热99国产精品久久久久久7| 在线 av 中文字幕| 日本三级黄在线观看| 亚洲精品,欧美精品| 一区二区三区免费毛片| 国产色婷婷99| 少妇人妻 视频| 69av精品久久久久久| 看黄色毛片网站| 久久久久精品久久久久真实原创| 久久人人爽人人片av| 国产有黄有色有爽视频| 能在线免费看毛片的网站| 大陆偷拍与自拍| 69人妻影院| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 国产视频首页在线观看| av在线老鸭窝| 欧美精品一区二区大全| 91在线精品国自产拍蜜月| 免费黄频网站在线观看国产| 久久久久久久久大av| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 街头女战士在线观看网站| 亚洲欧美一区二区三区国产| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 好男人视频免费观看在线| 精品国产三级普通话版| 国产成人aa在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲欧美清纯卡通| 久久女婷五月综合色啪小说 | 亚洲国产最新在线播放| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 久久精品久久精品一区二区三区| 欧美人与善性xxx| 一级毛片久久久久久久久女| 成人一区二区视频在线观看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲av成人精品一区久久| 婷婷色麻豆天堂久久| 51国产日韩欧美| 三级国产精品欧美在线观看| 最近手机中文字幕大全| 免费看光身美女| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 一级爰片在线观看| 久久久久久伊人网av| 欧美日韩亚洲高清精品| 日本与韩国留学比较| 简卡轻食公司| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 视频中文字幕在线观看| 看黄色毛片网站| 国产成人福利小说| 天堂网av新在线| 搡女人真爽免费视频火全软件| 亚洲国产成人一精品久久久| 日韩av不卡免费在线播放| 嫩草影院入口| 九草在线视频观看| 最近中文字幕高清免费大全6| 欧美日本视频| 高清av免费在线| 久久这里有精品视频免费| 国产成人福利小说| 中文字幕制服av| 女人久久www免费人成看片| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产精品一二三区在线看| 亚洲性久久影院| 大码成人一级视频| 特大巨黑吊av在线直播| av播播在线观看一区| 少妇熟女欧美另类| 国产亚洲5aaaaa淫片| 亚洲成人久久爱视频| 欧美区成人在线视频| 在线观看国产h片| 日本一本二区三区精品| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 在线 av 中文字幕| 亚洲最大成人中文| a级毛片免费高清观看在线播放| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 大片电影免费在线观看免费| 香蕉精品网在线| 国产高潮美女av| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 国产午夜福利久久久久久| 好男人视频免费观看在线| 精品国产露脸久久av麻豆| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲第一区二区三区不卡| 禁无遮挡网站| 欧美xxⅹ黑人| 男人爽女人下面视频在线观看| 九九在线视频观看精品| 一本久久精品| 亚洲第一区二区三区不卡| 日本一二三区视频观看| av.在线天堂| 最近手机中文字幕大全| 精品熟女少妇av免费看| 97热精品久久久久久| 大陆偷拍与自拍| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 久久久久国产网址| 深爱激情五月婷婷| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产成人91sexporn| 真实男女啪啪啪动态图| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产日韩欧美亚洲二区| 美女国产视频在线观看| 亚洲成人一二三区av| 久久国产乱子免费精品| 亚洲精品成人av观看孕妇| 制服丝袜香蕉在线| 美女cb高潮喷水在线观看| 成人亚洲欧美一区二区av| 亚洲av一区综合| 国产伦精品一区二区三区四那| 免费电影在线观看免费观看| 亚洲av不卡在线观看| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲国产精品成人久久小说| 欧美最新免费一区二区三区| 午夜福利视频精品| 国产成人精品福利久久| 18禁在线播放成人免费| 久久久精品免费免费高清| 美女国产视频在线观看| 99热这里只有精品一区| 日韩中字成人| 久久久久久久国产电影| 男人舔奶头视频| 午夜爱爱视频在线播放| 欧美日韩综合久久久久久| 男插女下体视频免费在线播放| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲在线观看片| 少妇人妻久久综合中文| 亚洲精品国产av蜜桃| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 午夜福利视频1000在线观看| 身体一侧抽搐| 亚洲精品日本国产第一区| 波野结衣二区三区在线| 毛片一级片免费看久久久久| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 色婷婷久久久亚洲欧美| 亚洲精品自拍成人| 国产一级毛片在线| 亚洲怡红院男人天堂| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 最新中文字幕久久久久| videos熟女内射| 中国三级夫妇交换| 国产一区有黄有色的免费视频| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 在线观看一区二区三区激情| 精品一区二区免费观看| 成人亚洲精品av一区二区| 黄片无遮挡物在线观看| 久久精品国产亚洲网站| 91久久精品电影网| 亚洲最大成人手机在线| 人体艺术视频欧美日本| 毛片一级片免费看久久久久| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产综合精华液| 亚洲欧美成人精品一区二区| 97在线视频观看| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产亚洲91精品色在线| tube8黄色片| 99久久中文字幕三级久久日本| av线在线观看网站| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 国产视频首页在线观看| 久久久精品免费免费高清| 2018国产大陆天天弄谢| 国产乱人偷精品视频| 亚洲国产av新网站| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 日韩中字成人| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 亚洲精品日韩av片在线观看| 成人二区视频| 亚洲熟女精品中文字幕| 久久人人爽人人片av| 男人舔奶头视频| 秋霞在线观看毛片| 午夜福利在线在线| 久久精品国产亚洲网站| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 午夜激情福利司机影院| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 日韩 亚洲 欧美在线| 日韩av不卡免费在线播放| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 久久精品夜色国产| 亚洲欧美精品专区久久| 国产乱人偷精品视频| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 欧美一级a爱片免费观看看| xxx大片免费视频| 男女无遮挡免费网站观看| 有码 亚洲区| 国产毛片a区久久久久| 国产亚洲精品久久久com| av在线观看视频网站免费|