化學

非正常食用油鑒別新方法（一）：三種辣椒堿殘留量的液相色譜-質譜分析

王龍星，金靜，王淑秋，等

摘要：目的：近年來，把非正常食用油（俗稱地溝油）摻入合格食用油中以獲取利益的行為屢禁不止，成為當前我國食品安全領域亟須解決的問題。目前地溝油精制工藝也在不斷發(fā)展：通過白土吸附、脫色、水洗、真空高溫除臭等步驟地溝油中存在的大部分常規(guī)雜質被去除，另外地溝油往往被摻入正常的食用油中進行出售，進一步降低指標物質的含量，增加了檢測難度。這種情況導致剛提出的多種鑒別指標又失效了，新的地溝油檢測方法仍是國內當前的研究熱點。首次提出通過檢測食用油中的特異痕量外源成分：辣椒堿來完成地溝油的檢測鑒別，并發(fā)展了相應的液相色譜-串聯(lián)質譜檢測方法。方法：0.5 g油樣加500 μL二氯甲烷，利用20 g/L氫氧化鈉兩次液液萃取將辣椒堿由油相萃取到水相，調節(jié)其pH在2～3后，上C18固相萃取小柱進行富集凈化：純水除去無機酸堿，乙腈洗脫辣椒堿。凈化后的樣品以二苯胺為進樣內標，采用液相色譜-串聯(lián)質譜（HPLCMS/MS）定量檢測3種不同的辣椒堿目標物：天然辣椒素、二氫辣椒素、壬酸香草酰胺。以這3種辣椒堿的含量和＞0.2 ng/g作為地溝油的判別指標。結果：辣椒堿是引起辣味的主要化學成分，具有脂溶性強、穩(wěn)定性好、沸點高等特點。目前的地溝油精制工藝很難完全去除具有這樣特點的物質。正常食用油基本不含辣椒堿，而接觸過辣椒的餐廚廢棄油脂難以避免地含有這類成分。因此辣椒堿類成分可作為鑒別餐廚廢棄油脂的特征指標。目前餐飲業(yè)辣味調料基于兩種原料：天然辣椒及由人工合成的壬酸香草酰胺，而天然辣椒中以天然辣椒素及二氫辣椒素的含量最大。基于上述情況將這3種辣椒堿確定為檢測目標。辣椒堿在中性條件下的脂溶性強，而在強堿性條件下其結構中的酚羥基解離，水溶性強，借助這個特點可實現辣椒堿與主體油脂的分離。首先通過堿性水溶液進行液液萃取；調節(jié)水相pH值后再通過固相萃取技術，實現辣椒堿的富集，并除去無機酸、無機堿及殘留的油脂。經過這樣的分離富集步驟，不僅提高了靈敏度，減小了基體干擾，同時也避免了殘留油脂對色譜柱及質譜儀器的污染和損傷。本方法的回收率在85%～93%，精密度＜10%，檢出限為 0.05 ng/g。實際測定結果表明本方法陽性樣品識別率達75%，陰性樣品識別率100%，假陽性率為零。68個盲樣的總體識別正確率達到82%以上。結論：通過對食用油中痕量辣椒堿的檢測，提出了一種新的地溝油識別方法。該方法識別率高，假陽性率為零，對 68個實際油樣的分析取得了良好的效果。目前，本方法已經成為國家衛(wèi)生部推薦的4種地溝油儀器檢測方法之一。

來源出版物：色譜, 2012, 30(11)： 1094-1099

入選年份：2016

超聲輔助分散液液微萃取-高效液相色譜測定水樣中的4種鄰苯二甲酸酯類增塑劑

馬燕玲，陳令新，丁養(yǎng)軍，等

摘要：目的：鄰苯二甲酸酯類化合物（PAEs），又稱鈦酸酯，是目前最廣泛使用的增塑劑。此類化合物在環(huán)境中難以降解，已成為全球最普遍的環(huán)境污染物之一。同時，它們也是一類內分泌破壞性物質，表現出生物累積性，可以改變人體中的雌激素水平，從而導致嚴重的健康問題。鑒于 PAEs對人類生命安全存在極大的潛在危害性，因而對于 PAEs的安全衛(wèi)生性檢測顯得十分必要和迫切。分散液液微萃?。―LLME）因其具有所需萃取溶劑量小、萃取速度快、萃取效率和富集倍數高、操作簡便、消耗樣品量低和環(huán)境友好等優(yōu)點，已發(fā)展成為一種極具潛力的分離富集技術。以4種典型的PAEs類物質（鄰苯二甲酸二甲酯（DMP）、鄰苯二甲酸二乙酯（DEP）、鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸二正辛酯（DnOP））為研究對象，采用DLLME并加以超聲輔助（UA）對樣品進行富集濃縮前處理，加速不互溶的兩相之間的質量傳遞，使得萃取效率可在最小的溶劑使用量和最短的時間內得到快速的提高；隨后，采用高效液相色譜（HPLC）進行分離測定；從而，建立一種簡便、快捷、實用的測定水體中 PAEs類增塑劑的分析方法。方法：采用超聲輔助分散液液微萃取技術結合高效液相色譜法（UA-DLLME-HPLC）對4種PAEs（DMP、DEP、DBP、DnOP）進行富集、檢測，并進行實際水樣分析。實驗中采用富集因子來評價萃取效率，考察并優(yōu)化影響萃取效率的主要因素，包括萃取劑類型和用量、分散劑類型和用量、超聲時間、離子強度、萃取時間和pH值等。采用公式EF=Csed/C0計算富集因子（enrichment factor，EF），以此評價不同萃取條件下的萃取效率。其中，Csed為萃取沉積相中PAEs的質量濃度（g/L）；C0為水樣中 PAEs的質量濃度（g/L）。經考察優(yōu)化，選定CCl4為樣品前處理的萃取劑、乙腈為分散劑；萃取劑CCl4的用量為40 μL、分散劑乙腈的用量為1.0 mL；超聲時間為5 min；加入NaCl的濃度為30 g/L。另外，實驗發(fā)現萃取效率隨萃取時間的變化和pH值的改變并無明顯改變。因此，僅需在體系中加入適量的分散劑、萃取劑和鹽，超聲5 min后，離心即可（5 min，4000 rpm）。優(yōu)化的色譜分析條件為：色譜分離柱：C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；進樣量：10 μL；檢測波長：225 nm；流動相：甲醇-超純水；梯度洗脫程序：0～3 min內85%甲醇，3～10 min內85%甲醇線性變化至100%甲醇，10～20 min內100%甲醇；流速：1.0 mL/min。結果：在優(yōu)化的萃取和色譜條件下，4種PAEs在18.5 min內完成基線分離，得到4種PAEs的工作曲線的線性相關系數為0.9935～0.9998，線性關系良好。獲得DMP、DEP、DBP和 DnOP的富集因子分別為 71、144、169和159，說明此法對此4種PAEs有較大程度的富集。檢出限分別為3.78、1.77、3.07和3.30 μg/L，遠低于《生活飲用水衛(wèi)生標準》國家標準規(guī)定限值，因此有望發(fā)展該法實現實際水樣中 PAEs的有效分析和監(jiān)控。日內與日間保留時間和峰面積的相對標準偏差（RSDs）值較低，且均低于或者接近文獻報道值，表明該法對 4種 PAEs的檢測具有良好的精密度。利用該法對實驗室自來水、某品牌礦泉水及湖水進行實際富集分析，3個加標濃度所獲得的加標回收率在 82.99%～114.47%之間，RSDs在 1.93%～8.31%之間，結果滿意。結論：建立的 UADLLME-HPLC方法具有操作簡便、萃取速度快、萃取效率和富集倍數高、試劑和樣品消耗量少、重現性好、環(huán)境友好等優(yōu)點，能夠測定實際水樣中的PAEs，有一定的實用參考價值。

來源出版物：色譜, 2013, 31(2)： 155-161

入選年份：2016

高效液相色譜-線性離子阱/靜電場軌道阱高分辨質譜法快速篩查和確證紡織品中禁用的偶氮染料

云環(huán)，劉鑫，王靜，等

摘要：目的：偶氮染料幾乎分布于所有顏色，廣泛用于紡織品、皮革制品等染色及印花工藝，用致癌芳香胺合成的偶氮染料在人體內易發(fā)生還原裂解釋重新放出致癌芳香胺產生致癌作用，德國、歐盟、日本及我國均規(guī)定紡織品中禁止使用偶氮染料。靜電場軌道阱（orbitrap）高分辨質譜具有質量分辨率高和精確分子量的功能，在全掃描模式下采集的數據可以根據檢測需求反復調用，由此彌補傳統(tǒng)低分辨質譜方法無法應對法規(guī)更新頻繁的不足；其數據依賴性掃描（data-dependent scan）可以在篩查的同時，通過碎片離子進行定性確證。應用高效液相色譜-線性離子阱/靜電場軌道阱高分辨質譜儀（HPLC-LTQ/Orbitrap）建立了快速篩查確證紡織品中禁用偶氮染料的方法。方法：樣品在檸檬酸緩沖液中由連二亞硫酸鈉還原成芳香胺，經硅藻土提取柱凈化后，用Acquity UPLC BEH C18柱（1.7 μm，2.1 mm×50 mm）分離，以甲醇和 0.1%（v/v）甲酸作為流動相進行梯度洗脫，電噴霧正離子（ESI＋）模式電離，高分辨質譜一級全掃描用于篩選分析，數據依賴掃描模式的二級CID譜圖用于確證。結果：考察了不同還原時間、萃取試劑對前處理效果的影響，優(yōu)化了色譜條件中所選用的流動相體系，比較了不同碰撞誘導解離（CID）電壓對電離結果的影響，建立了紡織品中 21種致癌芳香胺分析的方法，并對方法進行了評價。最終確定還原時間為30 min，選用叔丁基甲醚作為萃取劑，流動相中加入甲酸，CID電壓在35%時21種芳香胺分別得到各自特征的碎片，且分子離子峰和特征碎片離子峰的豐度比例相對穩(wěn)定，可以達到對待測物質的定性及定量要求。配制混合標準系列溶液進行測定，在0.05～2.00 mg/L范圍內線性關系良好（r≥0.99）。在空白樣品中進行加標實驗，確定該方法的檢測低限可達到0.08 mg/kg。在棉、滌綸兩種樣品中添加 21種致癌芳香胺的標準溶液，添加水平分別為0.5、1.0和2.0 mg/kg，每個添加水平平行測定6次，回收率范圍在 65.5%～111.5%之間，相對標準偏差（RSD）為 0.87%～2.49%。將建立的方法應用于 50份實際紡織品樣品，檢出2份樣品含有對氯苯胺，1份含有聯(lián)苯胺和3,3′-二氯聯(lián)苯胺，1份含有2-萘胺，其余樣品未檢出。結論：建立的紡織品中禁用偶氮染料的快速、高通量的檢測方法，在8 min內完成了對21種致癌芳香胺的篩查和確證，將高效液相色譜-線性離子阱/靜電場軌道阱高分辨質譜首次應用到紡織品檢測領域，獲得了滿意的分離效果和檢測靈敏度。方法的檢測低限滿足國內外相關禁用偶氮染料的檢測要求，可作為一種快速篩查和確證檢測技術廣泛使用。

來源出版物：色譜, 2013, 31(9)： 845-849

入選年份：2016