血液篩查中常用的丙型肝炎病毒檢測(cè)方法分析

謝玉娜 福建省龍巖人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 （福建 龍巖 364000）

內(nèi)容提要： 目的：探討血液篩查中常用的丙型肝炎病毒檢測(cè)方法分析。方法：選擇從2016年3月～2017年3月輸血前或手術(shù)前需檢測(cè)丙型肝炎病毒抗體患者11216例納入本次研究工作，均使用膠體金法丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒及化學(xué)發(fā)光測(cè)定法丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性及可疑的標(biāo)本進(jìn)行復(fù)檢。結(jié)果：經(jīng)膠體金法檢測(cè)結(jié)果可知，檢出陽(yáng)性及可疑的標(biāo)本223例；應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢驗(yàn)結(jié)果的陰性、可疑、陽(yáng)性分別有27例、9例、187例；應(yīng)用化學(xué)發(fā)光測(cè)定法陰性、可疑、陽(yáng)性分別有21例、5例、197例；兩組一致性強(qiáng)度較好（Kappa=0.728，U=16.21，P＜0.01）。檢出56例可疑標(biāo)本應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢驗(yàn)結(jié)果的陰性、可疑、陽(yáng)性分別有5例、15例、36例；化學(xué)發(fā)光測(cè)定法陰性、可疑、陽(yáng)性分別有6例、10例、40例；兩組一致性強(qiáng)度中等（Kappa=0.496，U=6.78，P＜0.05）。檢出167例陽(yáng)性標(biāo)本應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢驗(yàn)結(jié)果的陰性、可疑、陽(yáng)性分別有6例、14例、147例；化學(xué)發(fā)光測(cè)定法陰性、可疑、陽(yáng)性分別有5例、9例、146例；兩組一致性強(qiáng)度較好（Kappa=0.704，U=11.57，P＜0.01）。結(jié)論：在臨床血液篩查中使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法、化學(xué)發(fā)光測(cè)定法等常用丙型肝炎病毒檢測(cè)方法的可疑標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果一致性中等，而陰性標(biāo)本及陽(yáng)性標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果一致性較好，臨床可使用更特異、更敏感檢測(cè)方法以驗(yàn)證其可疑結(jié)果。

丙型肝炎病毒為臨床常見(jiàn)的感染性疾病，且該疾病傳染范圍較廣泛。相關(guān)臨床調(diào)查結(jié)果顯示，約有50%丙型肝炎病毒患者可轉(zhuǎn)化成為慢性肝炎，個(gè)別患者甚至轉(zhuǎn)變?yōu)楦渭?xì)胞性肝癌、肝硬化等，危及生命。隨著社會(huì)發(fā)展進(jìn)步，臨床醫(yī)學(xué)水平持續(xù)提高，臨床輸血醫(yī)學(xué)技術(shù)持續(xù)提高，輸血而致感染被越來(lái)越受重視[1]。本次研究工作旨在探討血液篩查中常用的丙型肝炎病毒檢測(cè)方法分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇從2016年3月～2017年3月輸血前或手術(shù)前需檢測(cè)丙型肝炎病毒抗體患者11216例納入本次研究工作。11216例患者的一般資料包括：男5911例，女5305例；年齡8～91歲，平均（55.55±18.35）歲。11216例患者或其家屬均對(duì)本次研究工作目的、內(nèi)容知情了解，并簽署知情同意書，配合完成本次研究工作。本次研究工作均已征得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。

1.2 方法

1.2.1 儀器選擇

儀器選擇FreedomEVOLyze全自動(dòng)酶免分析儀的生產(chǎn)公司為瑞士TecanSchweizAG公司；CHEMCLI600科美東雅化學(xué)發(fā)光分析儀的生產(chǎn)公司為北京科美生物有限公司。

1.2.2 試劑選擇

膠體金法丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)試劑盒選擇丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)試劑盒的生產(chǎn)公司為英科新創(chuàng)科技有限公司；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（即ENZYME LINKED IMMUNSORBENT，ELISA法）丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)試劑盒的的生產(chǎn)公司為珠海麗珠試劑股份有限公司；化學(xué)發(fā)光測(cè)定法（即CHEMILUMINESCENCE IMMUNOASSAY，CLIA法）丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)試劑盒的的生產(chǎn)公司為北京科美生物技術(shù)有限公司。

1.2.3 具體操作

給予11216例輸血前或手術(shù)前需檢測(cè)丙型肝炎病毒抗體患者以促凝管抽取其靜脈血，接著離心10min（以3000r/min速度），常規(guī)分離血清，待檢。首先，均給予11216份標(biāo)本應(yīng)用膠體金法丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)，觀察記錄其檢測(cè)結(jié)果，若檢測(cè)結(jié)果為可疑、陽(yáng)性，則對(duì)其進(jìn)行復(fù)檢。復(fù)檢選擇酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒及化學(xué)發(fā)光測(cè)定法丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)試劑盒進(jìn)行，在整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中均嚴(yán)格依照試劑具體說(shuō)明書進(jìn)行[2]。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察記錄①膠體金法檢測(cè)結(jié)果；②分析兩種復(fù)檢方法的HCV抗體可疑、陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果；③分析兩種復(fù)檢方法的HCV抗體可疑陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果；④分析兩種復(fù)檢方法的HCV抗體陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS22.0進(jìn)行處理分析本次研究所得數(shù)據(jù)，以P＜0.05代表數(shù)據(jù)有差異性。

2.結(jié)果

2.1 膠體金法檢測(cè)結(jié)果分析

本次研究的11216例患者經(jīng)膠體金法檢測(cè)，其檢測(cè)結(jié)果中，共檢出223例陽(yáng)性及可疑的標(biāo)本，包括可疑結(jié)果56例，陽(yáng)性結(jié)果167例，陽(yáng)性率為1.49%。

2.2 兩種方法的HCV抗體可疑、陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果分析

經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法復(fù)檢可知，有27例陰性，有9例可疑，有187例陽(yáng)性；經(jīng)酶化學(xué)發(fā)光測(cè)定法復(fù)檢可知，有21例陰性，有5例可疑，有197例陽(yáng)性；兩組比較分析，Kappa=0.728，U=16.21，P＜0.01，即存有顯著差異性，提示兩種復(fù)檢方法的一致性強(qiáng)度較好，見(jiàn)表1。

2.3 兩種方法的HCV抗體可疑陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果分析

經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法復(fù)檢可知，有5例陰性，有15例可疑，有36例陽(yáng)性；經(jīng)酶化學(xué)發(fā)光測(cè)定法復(fù)檢可知，有6例陰性，有10例可疑，有40例陽(yáng)性；兩組比較分析，Kappa=0.496，U=6.78，P＜0.05，即存有差異性，提示兩種復(fù)檢方法的一致性強(qiáng)度中等，見(jiàn)表2。

2.4 兩種方法的HCV抗體陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果分析

經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法復(fù)檢可知，有6例陰性，有14例可疑，有147例陽(yáng)性；經(jīng)酶化學(xué)發(fā)光測(cè)定法復(fù)檢可知，有5例陰性，有9例可疑，有146例陽(yáng)性；兩組方法的復(fù)檢結(jié)果比較分析，Kappa=0.704，U=11.57，P＜0.01，即存有顯著差異性，提示兩種復(fù)檢方法的一致性強(qiáng)度較好，見(jiàn)表3。

表1. 兩種方法的HCV抗體可疑、陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果分析 (n)

表2. 兩種方法的HCV抗體可疑陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果分析(n)

表3. 兩種方法的HCV抗體陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果分析(n)

3.討論

目前絕大部分醫(yī)院已開(kāi)展丙型肝炎病毒檢測(cè)，但僅應(yīng)用于輸血前檢查、手術(shù)前檢查及懷孕前檢查等[3]。當(dāng)患者感染丙型肝炎病毒后，其初始臨床癥狀體征不明顯，隨著疾病逐漸發(fā)展，可能轉(zhuǎn)變?yōu)楦斡不?、肝癌等。其次，部分丙型肝炎病毒攜帶者因早期未得到及時(shí)對(duì)癥診治，或在不知情的情況下以手術(shù)方式、獻(xiàn)血方式傳播。因此，臨床需加強(qiáng)丙型肝炎病毒檢測(cè)。

使用膠體金法檢測(cè)丙型肝炎病毒抗體，該檢測(cè)方法不但操作簡(jiǎn)便省時(shí)，不需使用特殊儀器，因此費(fèi)用較低。而且膠體金法檢測(cè)具有較高靈敏度及特異性，因此可以應(yīng)用于緊急情況下初篩[4]。運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法進(jìn)行檢測(cè)免疫系統(tǒng)正?；颊?，其丙型肝炎病毒抗體檢出率可達(dá)99.00%。但酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法的缺點(diǎn)為無(wú)論何種污染均十分容易導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。除此之外，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法的診斷試劑盒以選擇人工合成多肽抗原、基因工程制造多肽等，通過(guò)間接法原理檢測(cè)，但制造商不同，其測(cè)定結(jié)果存有較顯著差異性，因此早期丙型肝炎病毒感染檢測(cè)結(jié)果不理想[9]。化學(xué)發(fā)光測(cè)定法具有眾多優(yōu)勢(shì)，如檢測(cè)方便、檢測(cè)靈敏度高、無(wú)放射污染、標(biāo)記物來(lái)源多樣、標(biāo)記物有效期長(zhǎng)等，因此被越來(lái)越廣泛運(yùn)用于臨床檢測(cè)中。但化學(xué)發(fā)光測(cè)定法的檢測(cè)結(jié)果與具體酶標(biāo)記物質(zhì)量好壞具有一定相關(guān)性，同時(shí)，與酶（抗原或抗體）的純度、親和力及活性均密切相關(guān)[10]。從本次研究結(jié)果可知，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法與化學(xué)發(fā)光測(cè)定法對(duì)陽(yáng)性標(biāo)本、陰性標(biāo)本的復(fù)檢結(jié)果一致性均較好，但對(duì)于可疑標(biāo)本的復(fù)檢結(jié)果一致性則中等。其中原因考慮為所應(yīng)用的丙型肝炎病毒抗體試劑盒的丙型肝炎病毒基因重組抗原各區(qū)段及比例不相同，或丙型肝炎病毒抗原各區(qū)段各區(qū)段及比例不相同[5]。

綜上所述，臨床血液篩查工作中，可選擇更高特異性檢測(cè)方法以驗(yàn)證可疑結(jié)果，從而提高臨床用血安全性，降低臨床醫(yī)療糾紛發(fā)生率，提高患者的信任度及滿意度，促進(jìn)疾病早日康復(fù)。