胸腹水細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化用于病理診斷的價(jià)值體會(huì)

劉露露

271000泰安市婦幼保健院，山東泰安

胸腹腔積液屬于臨床發(fā)生率較高的一種疾病，表現(xiàn)出復(fù)雜的發(fā)病機(jī)制。對(duì)其良惡性實(shí)施判定，對(duì)于疾病的診治及預(yù)后具有顯著價(jià)值。在進(jìn)行診斷期間，胸腹水脫落細(xì)胞學(xué)檢查方法的應(yīng)用較為普遍，但是細(xì)胞形態(tài)學(xué)的單純采用無法對(duì)病理診斷準(zhǔn)確性做出保證，并且對(duì)于正確診斷會(huì)產(chǎn)生一定程度的影響[1]。本次研究將探討進(jìn)行病理診斷期間胸腹水細(xì)胞塊切片+免疫組化方法的應(yīng)用可行性，為疾病臨床順利診治奠定基礎(chǔ)。

資料與方法

2017年1月-2019年2月 收 集 臨 床送檢胸腹水標(biāo)本140 例，男90 例，女50 例；年齡19～73 歲，平均(45.29±2.35)歲。

方法：①合理展開常規(guī)細(xì)胞涂片操作：對(duì)140 例送檢胸腹水標(biāo)本，每例均約為100 mL，于陰涼位置保持5 min 靜置，之后選擇50 mL 自然沉淀標(biāo)本于離心管中進(jìn)行安置，之后保持2 500 r/min轉(zhuǎn)速進(jìn)行10 min 離心，并且將上清液進(jìn)行吸出。選擇沉淀物展開涂片操作，利用乙醇(95%)展開10 min固定操作，利用蘇木素進(jìn)行3 min染色。之后利用鹽酸酒精(1%)進(jìn)行5 s 分化，并且保持5 min 流水反藍(lán)，5 s 伊紅染色，進(jìn)行1 次水洗；利用梯度酒精展開脫水操作，二甲苯透明以及中性樹膠封片操作。安排高年資細(xì)胞病理醫(yī)生2名展開涂片形態(tài)學(xué)觀察[2-3]。②合理完成細(xì)胞沉渣切片制作：針對(duì)常規(guī)細(xì)胞涂片疑似的23 例惡性胸腹腔積液標(biāo)本，將完成常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查所剩余的細(xì)胞學(xué)標(biāo)本于離心管(20～50 mL)移入，之后保持2 500 r/min 進(jìn)行10 min 離心。完成后，針對(duì)上清液利用吸管吸掉，并且準(zhǔn)備中性福爾馬林(10%，20 mL)于含沉淀物離心管中加入，將振蕩儀放入保持10 min 振蕩。完成后，繼續(xù)進(jìn)行10 min離心，將上清液祛除，針對(duì)沉淀物利用鑷子取出，并且利用擦鏡紙進(jìn)行包裝。依據(jù)常規(guī)完成脫水以及透明等系列操作。如果胸腹水中表現(xiàn)出較多的血性成分，準(zhǔn)備20 mL 乙醇混合液+冰醋酸加入，混合后展開離心操作[4-5]。③合理完成免疫組化染色操作：主要利用EnVision 兩步法展開免疫組化操作，系列操作依據(jù)說明書嚴(yán)格展開。針對(duì)CK7 以及TTF-1 等進(jìn)行檢測(cè)。針對(duì)石蠟切片合理展開脫蠟至水操作，利用蒸餾水進(jìn)行2～3 次清洗，時(shí)間為2 min。合理展開高壓抗原修復(fù)操作。之后在室溫(3%H2O2)條件下進(jìn)行10 min 孵育，以將內(nèi)源性過氧化物酶活性充分消除。利用PBS 進(jìn)行2～3 次清洗，各控制5 min 時(shí)間。準(zhǔn)備正常山羊血清封閉液進(jìn)行滴加，于室溫中進(jìn)行10 min 放置，準(zhǔn)備Ⅰ抗進(jìn)行滴加，保證4℃過夜。陰性對(duì)照主要選擇PBS 對(duì)Ⅰ抗進(jìn)行代替，準(zhǔn)備Ⅱ抗進(jìn)行滴加，實(shí)施DAB染色以及蘇木素復(fù)染操作。利用鹽酸乙醇展開分化操作，之后展開切片脫水等系列操作[6]。

結(jié) 果

對(duì)于23 例疑似惡性胸腹水標(biāo)本展開離心沉渣包埋以及完成免疫組織化學(xué)染色后發(fā)現(xiàn)，屬于鱗狀細(xì)胞癌4 例，腺癌12例，惡性間皮瘤1例，屬于小細(xì)胞癌3例，屬于反應(yīng)性間皮細(xì)胞2 例，屬于惡性淋巴瘤1 例。對(duì)患者實(shí)施細(xì)胞塊切片HE染色，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞呈現(xiàn)出豐富密集的特點(diǎn)，能夠做到結(jié)構(gòu)清晰以及染色分明，表現(xiàn)出一定的組織結(jié)構(gòu)。通過實(shí)施免疫組織化學(xué)染色，表現(xiàn)出陽性信號(hào)定位準(zhǔn)確的特點(diǎn)，并且呈現(xiàn)出背景干凈以及對(duì)比度好的優(yōu)點(diǎn)。

討 論

臨床在進(jìn)行胸腹水脫落細(xì)胞檢查期間，呈現(xiàn)出操作簡(jiǎn)易、方法簡(jiǎn)單以及經(jīng)濟(jì)快速的特點(diǎn)，于臨床的應(yīng)用率較為廣泛。對(duì)患者實(shí)施常規(guī)胸腹水脫落細(xì)胞學(xué)圖片檢查，表現(xiàn)出較低的陽性率，并且對(duì)于系列病理，無法對(duì)其組織來源進(jìn)行明確。針對(duì)典型細(xì)胞判斷的準(zhǔn)確性可以做出保證，但是有時(shí)往往表現(xiàn)出蛻變間皮細(xì)胞以及炎性胸腹水增生同腺癌細(xì)胞等呈現(xiàn)出混淆的現(xiàn)象，進(jìn)而增加困難度。

在傳統(tǒng)細(xì)胞涂片基礎(chǔ)上實(shí)施細(xì)胞快切片，可以發(fā)揮顯著輔助干預(yù)效果。并且將免疫組化方法同胸腹水細(xì)胞快進(jìn)行結(jié)合，可以將常規(guī)細(xì)胞涂片表現(xiàn)出的系列不足進(jìn)行有效補(bǔ)充。胸腹水細(xì)胞沉渣石蠟切片的有效應(yīng)用，呈現(xiàn)出技術(shù)操作便捷的特點(diǎn)，不僅可以將胸腹水標(biāo)本診斷效果顯著提升，而且可以將細(xì)胞學(xué)診斷效果顯著提升。完成細(xì)胞沉渣石蠟包埋處理后，能夠確保同常規(guī)活檢組織塊相同展開連續(xù)切片操作；呈現(xiàn)出細(xì)胞比較集中的特點(diǎn)，能夠?qū)⑦z漏有效減少。通過蠟塊完成的切片制作，可以將因?yàn)橥科^厚而造成的細(xì)胞成團(tuán)、細(xì)胞重疊以及結(jié)構(gòu)不清現(xiàn)象進(jìn)行充分避免；此外，對(duì)于掉片現(xiàn)象可以充分避免。通過染色定位，呈現(xiàn)出可靠及準(zhǔn)確的特點(diǎn)，因?yàn)楸尘扒逦?，從而可?duì)診斷的準(zhǔn)確性做出保證。此外，通過胸腹水沉渣蠟塊，能夠做到反復(fù)連續(xù)切片，能夠依據(jù)診斷結(jié)果，合理完成免疫組化染色、細(xì)胞化學(xué)染色與原位核酸分子雜交染色等。

本次研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對(duì)于23 例疑似惡性胸腹水標(biāo)本展開離心沉渣包埋以及完成免疫組織化學(xué)染色后發(fā)現(xiàn)，鱗狀細(xì)胞癌4 例，腺癌12 例，惡性間皮瘤1例，屬于小細(xì)胞癌3 例，反應(yīng)性間皮細(xì)胞2例，屬于惡性淋巴瘤1例。對(duì)患者實(shí)施細(xì)胞塊切片HE染色，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞呈現(xiàn)出豐富密集的特點(diǎn)，能夠做到結(jié)構(gòu)清晰以及染色分明，表現(xiàn)出一定的組織結(jié)構(gòu)。通過實(shí)施免疫組織化學(xué)染色，表現(xiàn)出陽性信號(hào)定位準(zhǔn)確的特點(diǎn)，并且呈現(xiàn)出背景干凈以及對(duì)比度好的優(yōu)點(diǎn)。

綜上所述，臨床在實(shí)施胸腹水病理診斷期間，將細(xì)胞沉渣石蠟切片、免疫組化技術(shù)同常規(guī)胸腹水脫落細(xì)胞學(xué)檢查方式進(jìn)行充分結(jié)合，可以使得診斷效果顯著提升，臨床推廣意義顯著。