變應(yīng)原特異性免疫治療的研究進(jìn)展

過敏性哮喘是臨床常見病和多發(fā)病，近年來其發(fā)病率和患病率逐年增加[1-4]。過敏性哮喘的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，主要是由于機(jī)體免疫系統(tǒng)對環(huán)境中變應(yīng)原應(yīng)答過程中產(chǎn)生特異性IgE抗體、慢性氣道炎癥(嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞增多集聚，粘液增多)和氣道高反應(yīng)性[5]，以及Th2細(xì)胞增多引起[6-8]免疫失衡等綜合因素所引致。雖然臨床上治療哮喘的方法很多，如應(yīng)用糖皮質(zhì)激素[9-10]、β2受體激動劑[11-12]、氨茶堿[13-14]等，在短時(shí)間內(nèi)改善過敏癥狀具有一定的效果， 但變應(yīng)原特異性免疫治療(Allergen-specific immunotherapy, ASIT)又稱脫敏療法(Desensitization)，是現(xiàn)階段唯一針對病因的治療措施，能長時(shí)間持續(xù)減輕過敏癥狀，改變自然病程的治療方法[15-16]。目前ASIT作用機(jī)制、治療藥物和安全性均得到很大發(fā)展，本文就現(xiàn)階段ASIT發(fā)展和應(yīng)用情況做一綜述，旨在為ASIT的臨床治療提供借鑒。

1 變應(yīng)原特異性免疫治療的機(jī)制

ASIT是在臨床上確定過敏性疾病患者的變應(yīng)原后，將該變應(yīng)原制備出變應(yīng)原提取物并不同濃度稀釋，使得該變應(yīng)原與患者反復(fù)接觸(經(jīng)注射或其他給藥途徑)，逐步增加變應(yīng)原的濃度和劑量，從而提高患者對該種變應(yīng)原的免疫耐受，達(dá)到當(dāng)再次接觸該種變應(yīng)原時(shí)，不再產(chǎn)生過敏癥狀或癥狀減輕的現(xiàn)象[17-18]。其具體的作用機(jī)制包括：1) 調(diào)節(jié)Th1/Th2細(xì)胞的平衡、調(diào)節(jié)IgE和IgG抗體的生成及影響免疫效應(yīng)細(xì)胞等。有效的免疫治療可以減少血清IL-4水平、增加IFN-γ含量，誘導(dǎo)選擇性Th2型免疫應(yīng)答向Th1應(yīng)答偏移，從而使IL-4、IL-5等Th2細(xì)胞的細(xì)胞因子減少，并顯著減低單核細(xì)胞中IL-4、IL-5表達(dá)，增加IFN-γ表達(dá)，抑制嗜酸性粒細(xì)胞增生、活化和聚集；2) IL-4分泌減少，下調(diào)了B細(xì)胞合成IgE，同時(shí)血清總IgG增多(特別是IgG4)，競爭性阻斷了變應(yīng)原與肥大細(xì)胞表面IgE結(jié)合，避免了肥大細(xì)胞的激活和炎癥介質(zhì)釋放，改善臨床癥狀；3) 減少局部肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞等的數(shù)量，影響粘附因子、趨化因子和促炎因子的生成，降低氣道上皮的生物反應(yīng)性。目前研究表明[5, 8, 16, 19-24]，ASIT主要是通過上述3種作用機(jī)制改善臨床癥狀，達(dá)到治療效果。

2 新型ASIT藥物

ASIT傳統(tǒng)治療藥物是變應(yīng)原粗制提取物，其成分復(fù)雜，難以標(biāo)準(zhǔn)化，容易產(chǎn)生嚴(yán)重的系統(tǒng)或局部副作用，或產(chǎn)生新的過敏反應(yīng)[25-27]。一些高純度的新型變應(yīng)原疫苗被應(yīng)用的臨床治療中。同傳統(tǒng)變應(yīng)原相比，前者具有成分單一、容易量化、副作用小、低變應(yīng)原性、高免疫原性等特點(diǎn)，大大提到了ASIT的安全性。具有代表性的藥物有以下幾種：1) 重組變應(yīng)原疫苗：將變應(yīng)原在外源宿主中進(jìn)行表達(dá)，純化后可獲得成分單一，量化精準(zhǔn)的變應(yīng)原。此方法制備的變應(yīng)原疫苗能顯著減少ASIT的副作用。Govindaraj等[28]利用基因重組技術(shù)表達(dá)出變應(yīng)原蛋白Per a 10。臨床應(yīng)用證明，此重組變應(yīng)原能降低IgE結(jié)合能力，減少組胺釋放并且無蛋白水解活性；Myrset等[29]重組出分子量與結(jié)構(gòu)均同野生型相似的重組蛋白，可以應(yīng)用于未來診斷和免疫治療；Berdas-Le等[30]重組塵螨2類變應(yīng)原，表達(dá)出的重組蛋白Der p 2適用于臨床過敏性疾病的診斷和治療。目前越來越多的重組變應(yīng)原被應(yīng)用的臨床和科研中。2) 低變應(yīng)原性疫苗：利用DNA Shuffling或其他突變技術(shù)，篩選出即破壞編碼B細(xì)胞表位的基因序列，同時(shí)保留編碼T細(xì)胞表位的基因序列的嵌合基因，使得表達(dá)出的嵌合蛋白即保留了T細(xì)胞免疫原性又減低變應(yīng)原性，減少IgE抗體的生成。郭偉等[31]利用此技術(shù)重組塵螨1類變應(yīng)原基因，表達(dá)出嵌合蛋白R8在ASIT中的效果優(yōu)于重組的兩親本；Gafvelin等[32]重組表達(dá)了害嗜鱗螨變應(yīng)原，同樣顯示了低IgE結(jié)合能力，同時(shí)又保留了免疫原性；Wallner等[33]利用DNA shuffling技術(shù)對Betv1家族14個(gè)基因進(jìn)行突變，篩選出2個(gè)低IgE結(jié)合、高免疫原性的嵌合蛋白，使得ASIT的安全性進(jìn)一步提高。3) DNA疫苗：通過注射(肌肉注射或皮內(nèi)注射)編碼變應(yīng)原的治療DNA，誘導(dǎo)Th1類型的免疫應(yīng)答，促進(jìn)IFN-γ的生成，調(diào)節(jié)IgG1/IgG2a[34]等效果。李國平等[35]驗(yàn)證了Der p 2的DNA疫苗對小鼠哮喘模型具有很好的治療作用，降低了IgE水平，減輕氣道炎癥；Hartl等[36]利用實(shí)驗(yàn)證明Betv1 DNA疫苗，可促進(jìn)IFN-γ的生成，降低了IgE水平，調(diào)節(jié)Th1/Th2細(xì)胞的平衡；Wang等[37]也證明DNA疫苗在過敏性疾病中具有潛在的治療作用。DNA 疫苗具有使用方便、劑量精準(zhǔn)、安全性高等優(yōu)點(diǎn)，但是其長期影響尚未明確，因此在臨床上ASIT中的應(yīng)用也不如前二者廣泛。4) 其他包括去除IgE表位的疫苗肽[38-39]、主要重組變應(yīng)原混合疫苗[40]、變應(yīng)原偶聯(lián)粒子[41]等。越來越多的ASIT藥物應(yīng)用于臨床，使得患者可以針對自身的情況合理選擇，制定個(gè)性化的治療方案，提高了ASIT的療效和安全性。

3 給藥途徑

為了使ASIT藥物更好地發(fā)揮藥效，不同藥物的給藥途徑也不盡相同，最常見的給藥途徑有：1) 皮內(nèi)注射：將小劑量的藥物注射入表皮和真皮之間使之產(chǎn)生免疫效應(yīng)。Rotiroti等[42]應(yīng)用變應(yīng)原皮內(nèi)注射，抑制皮膚對變應(yīng)原的遲發(fā)性應(yīng)答，誘導(dǎo)保護(hù)性抗體的生成；Esposito等[43]為提高皮內(nèi)注射的安全性，對皮內(nèi)注射劑量進(jìn)行具體的研究。2) 舌下腺免疫治療：變應(yīng)原制備成溶液或片劑，被舌粘膜上皮層的樹突狀細(xì)胞攝取，調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞分化和抗體生成，形成免疫應(yīng)答。Fleischer等[44]應(yīng)用花生變應(yīng)原進(jìn)性免疫治療，驗(yàn)證了此療法是安全的，并具有長時(shí)間持續(xù)的治療效果；Yamada等[45]通過對過敏模型的舌下腺免疫治療，證明了其能誘導(dǎo)Treg細(xì)胞表達(dá)IL-10。3) 肌肉注射：是應(yīng)用DNA疫苗進(jìn)行ASIT最常用的給藥途徑。Toda等[46]肌肉注射DNA疫苗在動物模型上驗(yàn)證了很好的療效，且無副作用。4) 其他：如淋巴管內(nèi)給藥，將變應(yīng)原直接注射入淋巴結(jié)內(nèi)[47]。

4 ASIT禁忌癥

美國哮喘變態(tài)反應(yīng)與免疫學(xué)學(xué)會(American Academy of Aergy Asthma Immunology, AAAAI)、全球變態(tài)反應(yīng)和哮喘歐洲協(xié)作網(wǎng)對ASIT的禁忌癥進(jìn)行了細(xì)致的闡述。具體包括：1) 正在使用β受體阻滯劑，因?yàn)槠淇赡苁怪夤墀d攣，對過敏反應(yīng)具有促進(jìn)作用；2) 正在使用ACE抑制劑；3) 哮喘發(fā)作期；4) 心血管功能不全；5) 嚴(yán)重的免疫缺陷性疾??；6) 惡性腫瘤；7)5歲以下 的兒童；8) 妊娠期內(nèi)起始ASIT；9)急慢性感染性疾病[48-49]。

5 展 望

ASIT的安全性一直以來都是其應(yīng)用的障礙。隨著分子生物技術(shù)的飛速發(fā)展，ASIT的藥物安全性已得到很大提高，但遺憾的是，對于患者變應(yīng)原的準(zhǔn)確診斷和藥物副作用仍不理想。理想的ASIT疫苗應(yīng)具有有一下特征：成分單一、能誘導(dǎo)免疫耐受，減少IgE的生成，產(chǎn)生更多的保護(hù)性抗體、容易制備、副作用小、療效持久，以及臨床應(yīng)用中容易監(jiān)測等特點(diǎn)，具有上述特征的ASIT疫苗將是未來變應(yīng)原特異性免疫治療的研究方向。

利益沖突：無

本文引用格式：郭偉, 姜玉新. 變應(yīng)原特異性免疫治療的研究進(jìn)展[J]. 中國人獸共患病學(xué)報(bào), 2019,35(4):334-337，344. DOI: 10.3969/j.issn.1002-2692.2019.00.034