中藥對腦缺血后Nogo-A、NgR、Rho-A 影響的研究概況

趙 蕾1 陶 雪1 顧力華2

1.云南中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿康復(fù)學(xué)院，云南 昆明 650500；2.云南中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院，云南 昆明 650011

缺血性腦血管病統(tǒng)稱腦缺血，是由于供應(yīng)大腦血液血管的血流動力學(xué)發(fā)生改變或是完全(部分)閉塞所致腦組織變性、壞死而引起的一系列癥狀和體征[1]，約占全部腦血管疾病的70%[2]。腦缺血是缺血性腦卒中最主要的形式，是引起神經(jīng)系統(tǒng)疾病的主要原因。腦梗死神經(jīng)再生受多種因素的調(diào)節(jié)，包括：神經(jīng)生長營養(yǎng)因子、神經(jīng)生長抑制因子、膠質(zhì)瘢痕等。目前尚無修復(fù)性治療缺血性腦疾病的方法，功能恢復(fù)非常有限，許多患者會遺留有大腦某些功能的永久性損害[3]。研究表明缺血性腦卒中后的功能恢復(fù)與神經(jīng)再生存在聯(lián)系[4]，而神經(jīng)再生受諸多因素的影響，其中Nogo-A，NgR，RhoA對神經(jīng)再生起著抑制作用，使得新生的神經(jīng)元難以替代壞死的神經(jīng)元。然而中藥可以誘導(dǎo)中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生有利的微環(huán)境促進神經(jīng)再生[5]，抑制Nogo-A的釋放，抑制Nogo-A和其受體(NgR)及Rho-A的表達，從而達到促進神經(jīng)再生的作用。

1 Nogo-A、NgR、RhoA對神經(jīng)再生的影響

腦缺血損傷后對神經(jīng)再生起抑制作用的主要因素有軸突再生抑制因子，如勿動蛋白(Nogo-A)、髓鞘相關(guān)糖蛋白(Myelin-associated glycoprotein，MAG)和少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白(Oligodendrocyte-Myelin)，由少突膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生，并通過Nogo受體和配對免疫球蛋白樣受體B共同的神經(jīng)受體激活鳥苷三磷酸酶(gua nosine triphosphatase，GTPase)，使神經(jīng)元胞內(nèi)骨架調(diào)節(jié)因子Rho-A活性增加通過傳遞活化信號，激活下游重要的靶效應(yīng)分子Rho激酶,導(dǎo)致神經(jīng)元軸突生長錐(growth cone)崩解，抑制軸突再生[6]，而導(dǎo)致神經(jīng)不能再生。

研究表明，Nogo蛋白是中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘中具有抑制神經(jīng)生長活性的物質(zhì)[7]，是一種能抑制中樞神經(jīng)受損后再生的基因；是一種已經(jīng)被證實的髓鞘相關(guān)抑制因子。中樞神經(jīng)損傷后Nogo釋放增加、表達增強，啟動神經(jīng)元凋亡，導(dǎo)致神經(jīng)元死亡[8]。由于啟動子和剪切方式不同，Nogo編碼種蛋白質(zhì)為Nogo-A、Nogo-B和Nogo-C。然而Nogo-A是目前發(fā)現(xiàn)神經(jīng)纖維再生抑制物質(zhì)最為強烈的，可抑制損傷神經(jīng)生長，特別是再生神經(jīng)纖維的生長距離[9]。腦缺血后，Nogo-A和NgR的表達均增加[10-11]。由于Nogo-A和其受體(NgR)及Rho-A等抑制作用，從而使得中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元和軸突的再生重塑能力受到限制[12]。然而通過對Nogo-A和NgR的抑制，腦神經(jīng)功能可得到一定程度的修復(fù)[13-14]。

2 中藥對Nogo-A、NgR、Rho-A影響

腦梗死引起的中樞神經(jīng)損傷是神經(jīng)功能康復(fù)的難點之一[15]。研究表明[16]，調(diào)控Nogo-A及其受體NgR可影響腦缺血的發(fā)展和結(jié)果。中藥治療缺血性腦中風(fēng)歷史悠久，且有豐富的經(jīng)驗和其獨特的優(yōu)勢；是通過藥劑的相輔相成作用，一種多因素復(fù)合的治療，為再生神經(jīng)提供更多、更合理的比例、更趨近神經(jīng)生理需求的物質(zhì)和因子，通過改善神經(jīng)再生的微環(huán)境，進而有效提高神經(jīng)修復(fù)效果[17]。

2.1 單味中藥

2.1.1 生地 生地通經(jīng)脈，補虛弱，強腳膝，潤肌膚，且能活血化瘀。宋氏等[18]采用生地免煎顆粒溶液灌胃后，發(fā)現(xiàn)MCAO大鼠腦內(nèi)Nogo-A和mRNA 的表達有所下調(diào)，單味生地有利于缺血性腦損傷后的神經(jīng)再生。

2.1.2 天麻 天麻素在臨床上治療椎—基底動脈供血不足，能擴張腦血管、提高腦細(xì)胞抗缺氧能力、增加腦血流量、減少腦血管阻力引、保護神經(jīng)的作用。吳氏等[19]采用電針結(jié)合天麻素干預(yù)局灶性腦缺血大鼠，發(fā)現(xiàn)缺血灶周圍區(qū)額葉皮質(zhì)Nogo-A和NgR的表達降低，改善神經(jīng)功能。李氏等[20]發(fā)現(xiàn)電針結(jié)合天麻素對缺血側(cè)海馬CA3區(qū)BDNF的表達有上調(diào)作用，對Nogo-A的表達有下調(diào)作用，對腦缺血后有關(guān)受損神經(jīng)功能的恢復(fù)可能起到良性的調(diào)節(jié)作用。

2.1.3 紅景天 紅景天苷是中藥紅景天的提取物，具有活血化瘀通絡(luò)的作用。賴氏等[21]發(fā)現(xiàn)紅景天苷能夠降低MCAO模型大鼠神經(jīng)功能損傷，增加Nissl陽性細(xì)胞數(shù)目，提高Neun的表達，具有神經(jīng)保護作用，此作用是通過促進抗凋亡因子 Bcl-2 及神經(jīng)營養(yǎng)因子 NGF、BDNF 的表達，下調(diào)軸突生長抑制因子 Nogo-A及其受體NgR的表達所實現(xiàn)，從而改善軸突生長的微環(huán)境。

2.1.4 三七 三七總皂苷對全腦或者半腦缺血性腦損傷的保護作用；對大腦皮質(zhì)神經(jīng)元的保護作用；對腦血流量的改善情況；對突觸或者血管內(nèi)皮細(xì)胞中Ca2+濃度的影響；對興奮性氨基酸和特異性受體；對抗血小板聚集改善血小板功能等作用[22]。劉氏等[23]研究提示三七總皂苷對腦梗死后大鼠海馬CA1Nogo-A/NgR1/接頭蛋白(Rho-A)信號通路的上下游均有調(diào)節(jié)作用，可促進腦梗死損傷后海馬神經(jīng)功能重塑。張氏[24]研究發(fā)現(xiàn)，三七總皂苷可以降低缺糖缺氧/再灌注受損細(xì)胞中NgR1 mRNA和蛋白的表達，并可能對NgR1下游RhoA和ROCA2的表達起到調(diào)控作用，促進了神經(jīng)元軸突的再生和修復(fù)。王氏[25]在腦梗死后不同恢復(fù)時點口服三七三醇皂苷可下調(diào)Nogo-A蛋白、Nogo-A mRNA和NgRmRNA的表達；可以促進突觸結(jié)構(gòu)的恢復(fù)即突觸的重塑、重建以及腦缺血后缺損神經(jīng)功能的恢復(fù)。三七總皂苷以保護梗死區(qū)及梗死周邊區(qū)的神經(jīng)細(xì)胞，下調(diào)梗死周邊區(qū)Nogo-A的表達。改善了缺血性損傷后大腦皮層梗死周圍區(qū)神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)和功能，激發(fā)了梗死后軸突的再生和突觸的重塑[26]。

2.2 中藥復(fù)方 中藥復(fù)方在治療缺血性中風(fēng)方面具有獨特的優(yōu)勢，是在中醫(yī)整體觀及辨證論治的基礎(chǔ)上，按照中醫(yī)“君、臣、佐、使”的立法原則，選擇恰當(dāng)?shù)乃幬?，具有“多成分、多途徑、多靶點”的特點[27]。

張氏等[28]應(yīng)用中藥髓復(fù)康干預(yù)MCAO大鼠，發(fā)現(xiàn)其可通過抑制腦缺血損傷區(qū)勿動蛋白(No Go-A)的表達，從而改善腦缺血損傷區(qū)軸突再生微環(huán)境，可能是其促進腦缺血損傷后軸突再生的機制之一。江氏等[29]觀察補腎生髓方和益氣活血方對大鼠腦缺血再灌注損傷后缺血半暗帶Nogo-A、OMgp、MAG表達的影響。益氣活血方與補腎生髓方均可促進大鼠腦缺血再灌注損傷后神經(jīng)功能恢復(fù)，然而其作用機制可能與下調(diào)Nogo-A、OMgp、MAG的表達有關(guān)，研究表明在腦缺血再灌注早期，益氣活血方優(yōu)于補腎生髓方，后期益氣活血方不比補腎生髓方有優(yōu)勢。陸氏等[30]進一步運用蛋白印跡分析法(Western blot) 檢測候氏黑散對腦缺血大鼠Nogo-A、NgR及RhoA、Rock2蛋白表達的變化。發(fā)現(xiàn)候氏黑散通過風(fēng)藥補藥聯(lián)合用藥可明顯下調(diào)內(nèi)源性因子Rho-A、Rock-2的蛋白表達，從而抑制Rho-A、Rock-2信號通路的傳導(dǎo)，有助于神經(jīng)纖維的修復(fù)和再生。周氏等[31]運用復(fù)健片對腦梗死模型運動功能及腦組織酪氨酸受體激酶B(trk-B)和勿動蛋白A(Nogo-A)表達影響，研究發(fā)現(xiàn)復(fù)健片可顯著增強trk-B并抑制Nogo-A的表達，從而改善神經(jīng)再生微環(huán)境，促進腦梗死大鼠運動功能康復(fù)。

3 小結(jié)

綜上所述，中藥方劑治療疾病往往是多靶點、多環(huán)節(jié)起作用，發(fā)揮“多米諾骨牌”治療效應(yīng)，均符合腦梗死發(fā)病的病理機制[32]。中藥通過對Nogo-A、NgR、Rho-A的調(diào)節(jié)，成為促進神經(jīng)生長藥物研發(fā)的方向。但中藥治療缺血性腦損傷后神經(jīng)再生多數(shù)是從單方面來論治，而腦梗死后神經(jīng)再生是受多因素影響，僅僅從單方面進行探究，臨床療效是否會有所局限？中藥種類眾多、成分復(fù)雜，在治療神經(jīng)再生方面蘊含著無限的可能。從多方探究中藥對神經(jīng)再生的影響，或許會有進一步的發(fā)展。