奶牛早期妊娠診斷技術(shù)簡述

滕月

（天津市薊州區(qū)別山鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站 301900）

早期妊娠診斷可提高奶牛繁殖率，減少空期，而且還可以提高奶牛養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益。近年來，奶牛早孕診斷技術(shù)不斷發(fā)展，也出現(xiàn)了很多新的診斷方法與技術(shù)。

1 奶牛的早期妊娠診斷主要技術(shù)

1.1 超聲波診斷法

超聲診斷法是利用超聲波的原理，對動物子宮進(jìn)行掃描，根據(jù)信號判斷動物是否懷孕，主要有A 超、B 超、D 超，其中多普勒超聲被廣泛應(yīng)用。在我國利用仿A 型妊娠報警器和自行研制的動物超聲波多普勒檢測器，對奶牛早孕的診斷進(jìn)行了大量研究。鄧甘珍等在2004 年用B 超檢測了137 只處于不同妊娠階段的雌性動物，在交配后第30 天的診斷準(zhǔn)確率為89%，在交配后31～35d 的診斷準(zhǔn)確率為97%，在35d 以上的診斷準(zhǔn)確率為100%。

1.2 早孕因子診斷法

早孕因子是一種妊娠相關(guān)蛋白復(fù)合物，妊娠前3 個月的母牛血液中，通過抑制雌性動物的細(xì)胞免疫，使胎兒能正常存活，從而達(dá)到避免母體免疫排斥的目的。Koch 等報道了雌性動物懷孕后血液和牛奶中有早孕因子。早孕因子的診斷方法主要確定早孕因子的含量，以此作為早孕診斷的重要指標(biāo)。

1.3 血小板計數(shù)法

血小板活化因子是一種在受精卵中產(chǎn)生的乙酰甘油磷脂，尤其在桑椹胚期。血小板活化因子可誘導(dǎo)血小板凝集而不釋放能量。胚胎階段的血小板激活因子可與懷孕母牛相連接。懷孕奶牛的血小板在交配7d 后顯著下降，而未懷孕奶牛的血小板計數(shù)無顯著改變。在育種前后，根據(jù)血小板計數(shù)的變化，對198 頭奶牛的血小板計數(shù)進(jìn)行測定，并與交配后約50d 的直接試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果表明，血小板計數(shù)檢出奶牛妊娠率分別為81%和90%。

1.4 血清酸滴定法

懷孕期間，懷孕奶牛產(chǎn)生一些特定免疫球蛋白，在酸性環(huán)境中與其他蛋白質(zhì)形成不溶性復(fù)合物。實(shí)際多以血清素滴定法檢測免疫球蛋白[2]。

1.5 乳膠凝集抑制試驗(yàn)

該方法屬于免疫分析法。當(dāng)精子和卵子結(jié)合形成合子時，胚胎和胎盤在母牛體內(nèi)發(fā)育，絨毛膜促性腺激素是由絨毛膜滋養(yǎng)細(xì)胞和囊胚子葉分泌出來的，通過乳膠凝集抑制試驗(yàn)測定懷孕雌性動物的尿液和奶中的激素，可作為早期妊娠診斷的方法。

1.6 宮頸-陰道黏液電導(dǎo)率測定法

尹國榮通過測定宮頸-陰道黏液電導(dǎo)率在妊娠早期和發(fā)情周期有規(guī)律的變化，發(fā)現(xiàn)健康奶牛發(fā)情時導(dǎo)電性水平較低，從發(fā)情開始逐漸上升到發(fā)情后期逐漸下降；發(fā)情后受精過程中，孕牛電導(dǎo)率變化與空牛不同。在發(fā)情周期的每個階段，懷孕奶牛的導(dǎo)電性明顯低于未懷孕奶牛，特別是在受精21d 后。診斷儀器主要由主電極和探針電極兩部分組成。在使用中，主機(jī)應(yīng)綁在胸部，探頭電極應(yīng)插入牛陰道穹窿黏液中進(jìn)行檢查。

1.7 堿性磷酸酶活力測定法

懷孕奶牛血液中堿性磷酸酶活性高于未孕奶牛，在桑葚胚階段，分裂緩慢的大細(xì)胞中含有堿性磷酸酶[3]。既往研究表明，妊娠第1 個月血清中堿性磷酸酶活性升高，在妊娠第2、3個月間顯著升高。

1.8 放射免疫測定法

放射免疫分析（RIA） 是將放射性方法與免疫方法同時相結(jié)合的一種新型的方法[4]。Qishen wang 等分別檢測10 頭妊娠奶牛和10 頭發(fā)情奶牛牛奶中黃體酮的含量發(fā)現(xiàn)，妊娠奶牛黃體酮含量明顯高于發(fā)情奶牛。蔡志強(qiáng)等用抗孕激素單克隆抗體建立黃體酮包覆固相RIA 測定奶牛交配后21～58d 奶或血樣中黃體酮含量。結(jié)果表明，懷孕的檢出率為90%～95%。RIA 方法準(zhǔn)確性、靈敏度高，但設(shè)備昂貴、技術(shù)要求高、輻射危害大，該技術(shù)的臨床應(yīng)用受到一定限制。

2 小結(jié)

綜上所述，目前在奶牛早孕診斷方面，由于國內(nèi)外學(xué)者的不斷努力，已經(jīng)出現(xiàn)了很多早孕診斷方法，奶牛早孕診斷技術(shù)越來越成熟。目前早孕診斷大部分的使用方法已經(jīng)十分成熟，然而一些較為新式的診斷方法使用不多，甚至基層很少使用，一些診斷方法的準(zhǔn)確性與可靠性還有待進(jìn)一步驗(yàn)證。然而，由于諸多因素限制，有些方法在生產(chǎn)實(shí)踐中無法得到廣泛有效的應(yīng)用。隨著世界奶牛養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展和進(jìn)步，奶牛早孕診斷技術(shù)將會出現(xiàn)更多新的方法與診斷技術(shù)，早孕診斷的準(zhǔn)確率會越來越高。