試論分子生物學(xué)技術(shù)在臨床獸醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用

趙姝嫻

（內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)職業(yè)技術(shù)學(xué)院 014109）

現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)發(fā)展迅速，并隨著相關(guān)學(xué)者對(duì)該技術(shù)研究的進(jìn)一步深入，越來(lái)越多人開始將關(guān)注的重點(diǎn)放在臨床獸醫(yī)學(xué)上，通過(guò)分子生物學(xué)技術(shù)可以有效解決傳統(tǒng)臨床獸醫(yī)學(xué)的不足，具有技術(shù)先進(jìn)性。

1 分子生物學(xué)技術(shù)在臨床獸醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用研究

1.1 DNA酶切圖譜在臨床獸醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用

從現(xiàn)有技術(shù)的發(fā)展情況來(lái)看，DNA 酶切圖譜技術(shù)可以通過(guò)特定限制性酶消化DNA 長(zhǎng)鏈，獲得核酸片段。在這個(gè)過(guò)程中，考慮到不同DNA 的微陣列存在差異，因此，在技術(shù)應(yīng)用階段，更多學(xué)者希望通過(guò)該技術(shù)來(lái)獲得不同長(zhǎng)短的DNA 鏈片段；而DNA 鏈片段可以通過(guò)膠凝電泳完成分離后，結(jié)合各種已知的分子量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，最終計(jì)算出不同片段分子量數(shù)據(jù)。目前在臨床獸醫(yī)學(xué)上，該方法已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用，如針對(duì)牲畜的某一個(gè)基因點(diǎn)發(fā)生突變后，所引起的一系列限制酶識(shí)別點(diǎn)改變，可以通過(guò)該方法完成識(shí)別，獲得牲畜病變的具體信息。

1.2 DNA微陣列技術(shù)在臨床獸醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用

DNA 微陣列技術(shù)又被稱為生物芯片技術(shù)，是目前分子生物學(xué)領(lǐng)域的熱門技術(shù)之一，該技術(shù)應(yīng)用的要點(diǎn)是在一個(gè)小片固定相基質(zhì)上獲得大量高密度的DNA 片段，這些片段可以用來(lái)構(gòu)建微陣列；通過(guò)對(duì)該微陣列進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)分子雜交技術(shù)直接將微陣列與熒光標(biāo)記標(biāo)本進(jìn)行雜交，雜交結(jié)束并洗滌后，通過(guò)激光共聚焦纖維掃描儀聯(lián)合微機(jī)處理技術(shù)就可以獲得詳細(xì)的檢測(cè)結(jié)果[1]。

從技術(shù)應(yīng)用的現(xiàn)狀來(lái)看，在臨床獸醫(yī)學(xué)上，通過(guò)DNA 微陣列技術(shù)能完成大范圍的病微生物檢測(cè)機(jī)器組織配型情況；也有部分地區(qū)通過(guò)該技術(shù)完成了牲畜基因突變與多態(tài)性檢測(cè)，這是傳統(tǒng)技術(shù)所不具備的。

1.3 PCR技術(shù)在臨床獸醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用

PCR 技術(shù)實(shí)際上屬于一種體外模仿DNA 復(fù)制過(guò)程的技術(shù)，在臨床獸醫(yī)學(xué)上，通過(guò)PCR 技術(shù)可以大量復(fù)制出原本數(shù)量較少的DNA，因此，可以為疾病診斷治療提供便利[2]。根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)手段可知，通過(guò)PCR 技術(shù)能從牲畜的一滴血、一根毛發(fā)中擴(kuò)增出數(shù)量足夠的DNA 用于病理學(xué)分析。但傳統(tǒng)的PCR 技術(shù)在應(yīng)用中存在結(jié)果重復(fù)性差、可靠性低等問題，很多學(xué)者在原有技術(shù)的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)，提出了很多具有操作性的技術(shù)，包括定量PCR 技術(shù)、巢式PCR 技術(shù)等，這些技術(shù)地出現(xiàn)在一定程度上彌補(bǔ)了傳統(tǒng)PCR 技術(shù)的不足，提高了技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值。

2 分子生物學(xué)技術(shù)在豬流行性腹瀉病毒檢驗(yàn)中的應(yīng)用

豬流行性腹瀉病毒會(huì)導(dǎo)致豬出現(xiàn)嘔吐、脫水等癥狀，屬于一種高度接觸性腸道傳染病，會(huì)對(duì)養(yǎng)豬業(yè)造成巨大損失。針對(duì)豬流行性腹瀉病毒的危害，可以通過(guò)分析生物學(xué)技術(shù)尋找一種新的檢驗(yàn)手段。

2.1 PCR技術(shù)的應(yīng)用

根據(jù)現(xiàn)有經(jīng)驗(yàn)可知，PCR 技術(shù)在豬流行性腹瀉病毒檢驗(yàn)中具有廣泛的應(yīng)用前景，針對(duì)豬流行性腹瀉病毒的特殊性，在技術(shù)應(yīng)用過(guò)程中可以通過(guò)PCR 方法設(shè)置內(nèi)外兩對(duì)引物，在完成兩次擴(kuò)增后對(duì)樣本進(jìn)行檢測(cè)，該檢測(cè)方法可以最大程度上節(jié)省檢測(cè)時(shí)間與試劑用量，并且具有較高的敏感性。有學(xué)者在相關(guān)問題研究中通過(guò)RCR 技術(shù)的先進(jìn)性，結(jié)合豬流行性腹瀉病毒的特征，構(gòu)建了基因組序列，設(shè)計(jì)并合成針對(duì)病毒DNA 的內(nèi)外兩對(duì)特異性引物；在實(shí)驗(yàn)階段，通過(guò)優(yōu)化反映條件構(gòu)建了巢式PCR 體系，該體系可以對(duì)豬傳染性胃腸病毒進(jìn)行有效檢測(cè)，并且實(shí)驗(yàn)最終結(jié)果也證明，通過(guò)該方法對(duì)發(fā)病豬進(jìn)行病毒檢測(cè)后，檢測(cè)結(jié)果均確診，證明該方法可以被有效地應(yīng)用在病毒檢測(cè)中。

除此之外，結(jié)合PCR 技術(shù)的特征，在豬流行性腹瀉病毒檢驗(yàn)中可以在完成最佳條件篩選后，對(duì)病毒的敏感性、特異性進(jìn)行識(shí)別，最終構(gòu)建一個(gè)可以快速區(qū)分疫苗病株的檢測(cè)體系，該體系能識(shí)別出不同環(huán)境下的病毒特異性片段，具有技術(shù)先進(jìn)性。

2.2 DNA技術(shù)的應(yīng)用

DNA 技術(shù)可以對(duì)豬流行性腹瀉病毒的變化情況作出識(shí)別，精準(zhǔn)判斷出病豬體內(nèi)的病毒感染情況，且具有極強(qiáng)的特異性。如通過(guò)DNA 技術(shù)能基本判斷核苷酸鏈片段的變異情況，并確定哪一位點(diǎn)核苷酸發(fā)生變異和何種核苷酸取代了何種核苷酸；分析病癥結(jié)果可以通過(guò)DNA 微陣列技術(shù)，在詳細(xì)獲得病豬DNA 資料后構(gòu)建微陣列，依靠分子雜交手段獲得精準(zhǔn)的病毒信息。從效果來(lái)看，在DNA 微陣列技術(shù)的支持下，工作人員可以獲得腹瀉病毒因子的基因表達(dá)結(jié)果，并完成基因制圖等，可以幫助工作人員更深層次的了解疾病發(fā)展，有助于及早制定應(yīng)對(duì)措施，避免感染范圍擴(kuò)大。

3 結(jié)論

在臨床獸醫(yī)學(xué)，分子生物學(xué)技術(shù)具有廣泛的應(yīng)用前景，從目前相關(guān)技術(shù)的發(fā)展情況來(lái)看，依靠分子生物學(xué)技術(shù)能更精準(zhǔn)地對(duì)獸醫(yī)臨床信息進(jìn)行評(píng)估，值得推廣。