PCR技術(shù)在乙型肝炎檢驗(yàn)中的應(yīng)用價值分析

李佳丹

目前,在世界范圍內(nèi),乙型肝炎病毒感染已經(jīng)成為了十分常見的一種公共衛(wèi)生問題,且目前世界乙型肝炎病毒感染患者有3 億人左右［1］。乙型肝炎病毒會誘發(fā)乙型肝炎,這是一種患者肝臟出現(xiàn)炎性病變反應(yīng)且引發(fā)多個器官系統(tǒng)損傷的傳染性疾病,乙型肝炎帶有很強(qiáng)的傳染性,且在多方面因素的影響下,我國乙型肝炎患者的數(shù)量逐漸增多［2］。對乙型肝炎患者進(jìn)行準(zhǔn)確、及時的檢驗(yàn)可以幫助醫(yī)生掌握其病變情況,并及時進(jìn)行確診。本研究分析了PCR 技術(shù)在乙型肝炎檢驗(yàn)中的應(yīng)用價值?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1～12月本院診治的94例乙型肝炎傳染患者作為研究對象,隨機(jī)分為參照組與分析組,每組47例。參照組男27例,女20例；年齡26～71歲。分析組男26例,女21例；年齡25～72歲。兩組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。本實(shí)驗(yàn)預(yù)先得到相關(guān)部門的審批。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ①所有患者均符合乙型肝炎臨床診斷標(biāo)準(zhǔn),乙型肝炎診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”參照兩對半檢驗(yàn)結(jié)果,且一般資料完整；②所有患者及其家屬均簽署知情同意書,對研究內(nèi)容完全知情,并自愿入組。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①其他類型傳染疾病患者；②感覺功能障礙患者；③精神狀態(tài)異常、意識模糊或喪失患者；④免疫系統(tǒng)疾病患者；⑤惡性腫瘤患者；⑥無家屬監(jiān)護(hù)、個人資料殘缺患者；⑦研究途中轉(zhuǎn)院對象。

1.3 方法 兩組患者入院后均在清晨空腹情況下接受血液樣本采集,抽取3 ml血液作為檢驗(yàn)樣本,檢驗(yàn)人員需要對患者血液樣本進(jìn)行持續(xù)10 min離心,速度為3000 r/min,得到血清,并且將其置入-20℃的冰箱當(dāng)中。

1.3.1 參照組 采用ELISA檢驗(yàn),利用全自動酶免分析儀進(jìn)行吸光度檢驗(yàn)分析,觀察具體的檢驗(yàn)結(jié)果,并進(jìn)行記錄。

1.3.2 分析組 采用PCR技術(shù)檢驗(yàn)乙型肝炎病毒,檢驗(yàn)人員選擇乙型肝炎病毒核酸定量試劑盒進(jìn)行檢驗(yàn),按照相應(yīng)規(guī)范進(jìn)行操作,并且利用羅氏PCR儀進(jìn)行熒光定量PCR擴(kuò)增檢驗(yàn),并且觀察具體的檢驗(yàn)結(jié)果,并進(jìn)行記錄。

1.4 觀察指標(biāo) 比較兩組患者乙型肝炎檢出率及HBsAg、HBeAg、HBeAb陽性檢出率。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

參照組患者乙型肝炎檢出率為61.70%(29/47),HBsAg、HBeAg、HBeAb 的陽性檢出率分別為63.83%(30/47)、59.57%(28/47)、57.45%(27/47)；分析組患者乙型肝炎檢出率為97.87%(46/47),HBsAg、HBeAg、HBeAb 的陽性檢出率分別為95.74%(45/47)、93.62%(44/47)、91.49%(43/47)。分析組患者乙型肝炎檢出率及HBsAg、HBeAg、HBeAb 陽性檢出率均高于參照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=19.064、14.842、15.192、14.324,P＜0.05)。

3 討論

乙型肝炎病毒是目前最為常見的一種病原體,也是乙型肝炎的病原體［3］。乙型肝炎病毒會利用人體的血液、體液等進(jìn)行傳播,且會給人體的肝臟功能帶來較為嚴(yán)重的損傷,這也導(dǎo)致乙型肝炎成為目前較為常見的一種慢性傳染疾病［4］。在多方面因素的影響下,我國患有乙型肝炎的患者數(shù)量出現(xiàn)了明顯增多。若乙型肝炎患者的診斷不及時、不準(zhǔn)確,就會影響到患者的后續(xù)治療,甚至出現(xiàn)誤診、漏診的情況,這對于患者的后續(xù)治療極為不利［5］。因此,做好患者的臨床診斷,才能為其選擇針對性更強(qiáng)的治療方案。

在乙型肝炎患者的檢驗(yàn)、方法當(dāng)中,ELISA 檢驗(yàn)是最為常見的檢驗(yàn)方式,主要是對患者乙型肝炎病毒表達(dá)蛋白的抗原、抗體水平進(jìn)行相應(yīng)的測驗(yàn),以達(dá)到乙型肝炎診斷的效果。但是,這種檢驗(yàn)方法在實(shí)際應(yīng)用當(dāng)中,可能受到乙型肝炎病毒轉(zhuǎn)錄及翻譯功能減弱等因素的影響,患者的HBsAg 水平會出現(xiàn)下降,導(dǎo)致檢測出現(xiàn)假陰性的情況,致使出現(xiàn)漏診,影響患者的后續(xù)治療,使患者的肝臟功能會受到嚴(yán)重?fù)p傷［6］。

本院針對患有乙型肝炎的患者選擇 PCR 技術(shù)對乙型肝炎病毒進(jìn)行檢驗(yàn),這是一種新型的檢驗(yàn)技術(shù)。PCR 技術(shù)可以對乙型肝炎患者身體當(dāng)中存在的乙型肝炎病毒DNA 進(jìn)行相應(yīng)的熒光標(biāo)記處理,也能對乙型肝炎病毒DNA 的轉(zhuǎn)錄以及翻譯情況進(jìn)行相應(yīng)的檢驗(yàn),這樣就可以避免乙型肝炎病毒DNA在低水平復(fù)制當(dāng)中出現(xiàn)病毒抗體的假陰性情況,出現(xiàn)誤診或者漏診的情況,從而提高乙型肝炎患者檢驗(yàn)的準(zhǔn)確度。此外,與常規(guī)的檢驗(yàn)方式相比, PCR 技術(shù)的科學(xué)度更高,而成本不會過高,檢驗(yàn)人員的操作更為方便,應(yīng)用難度小,在臨床中得到了較為廣泛的應(yīng)用［7,8］。

本研究結(jié)果顯示：參照組患者乙型肝炎檢出率為61.70%(29/47),HBsAg、HBeAg、HBeAb 的陽性檢出率分別為63.83%(30/47)、59.57%(28/47)、57.45%(27/47)；分析組患者乙型肝炎檢出率為97.87%(46/47),HBsAg、HBeAg、HBeAb的陽性檢出率分別為95.74%(45/47)、93.62%(44/47)、91.49%(43/47)。分析組患者乙型肝炎檢出率及HBsAg、HBeAg、HBeAb 陽性檢出率均高于參照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=19.064、14.842、15.192、14.324,P＜0.05)?？?知,采 用PCR 技術(shù)檢驗(yàn)乙型肝炎病毒對乙型肝炎的臨床診斷有十分顯著的優(yōu)勢與價值。

綜上所述,應(yīng)用 PCR 技術(shù)檢驗(yàn)乙型肝炎病毒診斷乙型肝炎的應(yīng)用價值高,可作為乙型肝炎患者檢驗(yàn)的首選方式進(jìn)行推廣。