白芨組培繁殖技術(shù)研究

摘 要：通過(guò)對(duì)種子成熟度、增殖、生根生長(zhǎng)的研究，本試驗(yàn)得出用于誘導(dǎo)最佳類型的種子為類型1種子，最佳的增殖培養(yǎng)基為MS+6BA1.0mg/L+NAA0.6mg/L+香蕉35g/L+馬鈴薯40g/L+活性炭0.5g/L+白糖30g/L，最適合的生根培養(yǎng)基為MS+NAA0.8mg/L+香蕉35g/L+馬鈴薯40g/L+活性炭0.5g/L+白糖30g/L。

關(guān)鍵詞：白芨；藥材；組織培養(yǎng)；試驗(yàn)

中圖分類號(hào)：S567.23+9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1004-7344（2018）36-0204-02

白芨為一種典型的蘭科白芨屬多年生草本植物。它的野生資源廣泛分布于東亞地區(qū)、朝鮮半島、日本、中國(guó)云南等地。白芨藥用價(jià)值高，對(duì)消腫生肌、收斂止血具有較好的功效，且白芨含有的部分化學(xué)物質(zhì)對(duì)結(jié)核桿菌、癌細(xì)胞的生長(zhǎng)分裂均具有較好的抑制作用。它作為一種常見的名貴中藥，白芨?jìng)涫苤嗅t(yī)界各學(xué)者的關(guān)注，但由于白芨自然繁殖率低，為了滿足市場(chǎng)對(duì)白芨的需求，且從培育成本方面進(jìn)行考慮，通過(guò)對(duì)白芨種子的選取及培養(yǎng)基的篩選試驗(yàn)，以達(dá)到最佳繁殖效果。

1 材料與方法

材料來(lái)源于人工種植白芨的未開裂蒴果。

1.1 材料選?。裕?/p>

1.2 種子消毒

超凈工作臺(tái)上，根據(jù)外觀顏色、飽滿度，把種子分成類型1種子即種皮黃色而不破裂和類型2種子即種皮青而飽滿兩類。然后用無(wú)菌水分別對(duì)兩類種子進(jìn)行沖洗3次，再用75%酒精對(duì)種子進(jìn)行浸泡20s，用無(wú)菌水沖洗3次后，再用0.2%升汞消毒20min和15min，最后再用無(wú)菌水沖洗3～6次，消毒好的種子待用。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 不同成熟度的種子對(duì)生長(zhǎng)的影響

把類型1和類型2兩種種子進(jìn)行消毒后，接入以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，設(shè)6BA1.0mg/L，NAA0.6mg/L，添加香蕉35g/L，馬鈴薯40g/L，活性炭0.5g/L，白糖30kg/L，pH值為5.8的培養(yǎng)基中，接種密度以種子鋪滿培養(yǎng)基80%為宜。每類型的種子接種培養(yǎng)基50瓶，培養(yǎng)溫度均為25±1℃，60d后進(jìn)行結(jié)果統(tǒng)計(jì)。

1.3.2 不同的激素配比對(duì)其增殖生長(zhǎng)的影響

以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，設(shè)6BA0.2mg/L、0.6mg/L、1.0mg/L，NAA0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L，添加香蕉35g/L，馬鈴薯40g/L，活性炭0.5g/L，白糖30g/L，pH值為5.8作為增殖的培養(yǎng)基，以摸索適宜白芨增殖的配方。培養(yǎng)基設(shè)計(jì)處理為9個(gè)，如表2。把萌動(dòng)抽高1cm左右高的幼芽，接種于處理1～9中，每處理接種20瓶，培養(yǎng)溫度均為25±1℃，30d后進(jìn)行結(jié)果統(tǒng)計(jì)。

1.3.3 不同濃度的NAA對(duì)生根的影響

把2～3cm高的無(wú)根苗接入如表3生根培養(yǎng)基中，每處理接種20瓶，每瓶20株。培養(yǎng)溫度為25±1℃，40d后，對(duì)生根情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

1.3.4 添加不同濃度的香蕉、馬鈴薯對(duì)生根的影響

生根的培養(yǎng)基以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，設(shè)相同濃度的生長(zhǎng)素NAA0.8mg/L、活性炭0.5g/L，白糖30kg/L，pH值為5.8，添加不同的香蕉、馬鈴薯濃度，把2～3cm左右高的無(wú)根苗接入表4中的處理1～4中，每處理接種培養(yǎng)基20瓶，每瓶20株，培養(yǎng)溫度均為25±1℃，40d后進(jìn)行結(jié)果統(tǒng)計(jì)。

2 試驗(yàn)分析

2.1 不同成熟度的種子對(duì)萌動(dòng)的影響

通過(guò)對(duì)兩種類型的種子接種后60d進(jìn)行觀察，類型1種子萌動(dòng)率高，基本達(dá)到100%，且萌動(dòng)均勻，長(zhǎng)勢(shì)較快，整齊。而類型2的種子萌動(dòng)率約73.6%，且萌動(dòng)不均勻，長(zhǎng)勢(shì)相對(duì)較慢，不整齊。因此，可通過(guò)種皮的顏色判斷種子成熟度，進(jìn)行挑選種子繁殖。

2.2 不同濃度6-BA和NAA對(duì)白芨增殖生長(zhǎng)的影響

植物激素6BA和NAA對(duì)白芨增殖生長(zhǎng)影響如表5，從表5中可看出隨著6BA濃度的增加，增殖倍數(shù)及莖粗壯度均逐漸增加，當(dāng)6BA濃度達(dá)到1.0mg/L時(shí)，高生長(zhǎng)逐漸緩慢，而當(dāng)6BA濃度相同時(shí)，隨著NAA濃度的增加，高生長(zhǎng)隨著增加。因此，MS+6BA1.0mg/L+NAA0.6mg/L+香蕉35g/L+馬鈴薯40g/L+活性炭0.5g/L+白糖30g/L。最適宜增殖的生長(zhǎng)。

2.3 不同濃度的NAA對(duì)白芨生根的影響

生長(zhǎng)素NAA對(duì)白芨的生根有促進(jìn)作用，隨著NAA濃度的增加，根系逐漸長(zhǎng)而多，但當(dāng)NAA濃度達(dá)到1.0mg/L時(shí)，根系會(huì)從細(xì)而柔軟逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)榇侄?。因此，本?shí)驗(yàn)中最適合白芨生根的培養(yǎng)基為MS+NAA0.8mg/L+香蕉35g/L+馬鈴薯40g/L+活性炭0.5g/L+白糖30g/L。

2.4 添加不同濃度的香蕉、馬鈴薯對(duì)誘導(dǎo)根生長(zhǎng)的影響

從試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)中看出，未添加香蕉、馬鈴薯的生根率100%，但根系相對(duì)較短而少，而添加有香蕉75g/L與香蕉35g/L+馬鈴薯40g/L兩種培養(yǎng)基從生根率、根系平均長(zhǎng)度及根系條數(shù)上區(qū)別不明顯。而只有馬鈴薯的培養(yǎng)基中，生根率83.4%，根系平均長(zhǎng)度只有3.2cm，根系條數(shù)平均為4.6條。因此，MS+NAA0.6mg/L+香蕉35g/L+馬鈴薯40g/L+活性炭0.5g/L+白糖30g/L為最適宜白芨生根生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

3 結(jié)論與討論

（1）本試驗(yàn)只通過(guò)白芨種子的形態(tài)成熟方式來(lái)判斷種子的成熟度，該方法很容易造成因目測(cè)不準(zhǔn)而造成種子在消毒的過(guò)程中種皮破裂，種子流失，因此，還需進(jìn)一步的以種子的生理成熟，來(lái)挑選誘導(dǎo)的種子。

（2）在增殖生長(zhǎng)中，隨著6BA、NAA濃度的繼續(xù)增加，是否更有利于增殖生長(zhǎng)，有待更進(jìn)一步的試驗(yàn)。

參考文獻(xiàn)

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收稿日期：2018-11-16

作者簡(jiǎn)介：吳玉華（1976-），女，廣西荔浦人，中級(jí)工程師，本科，主要負(fù)責(zé)苗木培育工作。