組蛋白去乙酰化酶2過表達(dá)對(duì)多種腫瘤預(yù)后影響的meta分析

劉哲然 鄧立彬 劉鈺君 江 峰 楊超智 王語晴 劉進(jìn)生 胡 川

(南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院瑪麗女王學(xué)院，江西 南昌 330000)

組蛋白去乙?；?HDACs)可以通過緊密染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和增加核小體正電荷沉默mRNA的轉(zhuǎn)錄。HDAC與組蛋白乙?；腹餐饔茫{(diào)節(jié)相關(guān)基因的激活和轉(zhuǎn)錄。組蛋白乙?；腿ヒ阴；缺碛^遺傳學(xué)修飾在腫瘤發(fā)生和進(jìn)展中起著重要作用，包括抑制有關(guān)調(diào)節(jié)腫瘤增殖，轉(zhuǎn)移，浸潤(rùn)；血管分化與形成的正?；颉?〕。HDAC2從屬于第Ⅰ類HDACs，只在細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)，它可以催化核心組蛋白分子末端的賴氨酸殘基去乙酰化，使分子和組蛋白結(jié)合更加緊密從而阻斷基因轉(zhuǎn)錄，在惡性腫瘤的產(chǎn)生和發(fā)展中起重要的調(diào)節(jié)作用〔2〕。研究表明在胃癌，食管癌，前列腺癌，腎癌等多種腫瘤中均能發(fā)現(xiàn)HDAC2的高表達(dá)〔3～6〕，提示HDAC2的高表達(dá)或許對(duì)腫瘤的發(fā)展進(jìn)程和預(yù)后起到一定影響。目前，關(guān)于HDAC2過表達(dá)對(duì)于多種腫瘤預(yù)后的影響存在一定的爭(zhēng)議。本實(shí)驗(yàn)嘗試運(yùn)用meta分析的方法，通過在Pubmed，Medline，Cochrane Library，中國(guó)知網(wǎng)中進(jìn)行關(guān)鍵字檢索和文獻(xiàn)追溯，通過提取包含風(fēng)險(xiǎn)比(HR)和95%的置信區(qū)間及可用于計(jì)算風(fēng)險(xiǎn)比的腫瘤患者生存期的生存曲線，運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法評(píng)價(jià)HDAC2基因高低表達(dá)對(duì)多種腫瘤患者的預(yù)后影響。

1 材料和方法

1.1文獻(xiàn)檢索策略 以“(HDAC2 or (histone deacetylase 2) or HD2 or RPD3 or YAF1) AND (cancer or carcinoma or tumor or tumors or neoplasm or neoplasms) AND 〔(survival or survivals) or prognosis or prognostic or (predictive value) or (progression or progressions) or outcome or follow-up or (risk or risks)〕”或“(組蛋白去乙?；?2 or HDAC2) AND (腫瘤or癌癥)”為關(guān)鍵詞在Pubmed，Medline，Cochrane Library，中國(guó)知網(wǎng)中進(jìn)行檢索并輔以文獻(xiàn)追溯，收集從1990至2017年6月公開發(fā)表的文獻(xiàn)。

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①原始文獻(xiàn)為已公開發(fā)表的文獻(xiàn)。②研究對(duì)象為任一腫瘤。③研究方法為免疫組化或RT-PCR。④研究中包含HR及95%置信區(qū)間或含有可用于計(jì)算HR的腫瘤患者總生存期(OS)或無病生存期(DFS)的生存曲線。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①無對(duì)照實(shí)驗(yàn)。②原始文獻(xiàn)數(shù)據(jù)不完整。③動(dòng)物或細(xì)胞研究。④腫瘤患者生存期小于24個(gè)月。

1.3文獻(xiàn)篩選和資料提取 由兩名研究者獨(dú)立進(jìn)行文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)，若匯總時(shí)數(shù)據(jù)不一致，則兩名研究者協(xié)商討論，若仍不一致，提交給第三名研究者決定。收集內(nèi)容包括：腫瘤類型、作者、發(fā)表年限、樣本出處、樣本大小、使用方法、cut-off值、隨訪時(shí)間HR。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用Review Manager 5.3(Cochrane Collaboration，Oxford，UK)。通過計(jì)算HR及95%置信區(qū)間評(píng)估HDAC2的表達(dá)與腫瘤患者總體生存率的關(guān)系。當(dāng)異質(zhì)性大于50%時(shí)，采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行分析，當(dāng)異質(zhì)性小于50%時(shí)，采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行分析。發(fā)表偏倚通過漏斗圖進(jìn)行評(píng)估。

2 結(jié) 果

2.1納入文獻(xiàn)的情況和基本特征 在關(guān)鍵詞檢索后進(jìn)行初次篩選，納入文獻(xiàn)623篇，通過逐層篩選，606篇因?yàn)橐韵略虮慌懦孩倬C述或相關(guān)meta分析等無原始數(shù)據(jù)的文獻(xiàn)。②相關(guān)數(shù)據(jù)不完整，不存在或無法被提取。③患者存活期小于24個(gè)月。④采用不合適的方法評(píng)估HDAC2表達(dá)量。

納入研究的基本特征見表1。一共納入17篇文獻(xiàn)〔5～21〕，乳腺癌研究有5篇，肝癌有3篇，肺癌有2篇，其他腫瘤有7篇。7篇來源于歐洲，7篇來源于亞洲，2篇來源于美國(guó)。15篇文獻(xiàn)采用免疫組織化學(xué)(IHC)方法獲取數(shù)據(jù)，2篇文獻(xiàn)采用RT-PCR方法獲取數(shù)據(jù)。

表1 納入研究的基本特征

2.2HDAC2的表達(dá)對(duì)腫瘤患者預(yù)后的影響 研究數(shù)據(jù)合并后，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)，I2=94%，說明文獻(xiàn)間異質(zhì)性較大，采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行分析。研究數(shù)據(jù)合并后顯示HDAC2高表達(dá)的腫瘤患者的總生存期普遍短于低表達(dá)患者CI(HR=1.63，95%CI=1.16～2.30，P=0.005)，見圖1。通過亞組分析進(jìn)一步探究HDAC2高表達(dá)與消化道腫瘤患者及乳腺癌患者的預(yù)后關(guān)系，分別對(duì)乳腺癌組和消化道腫瘤患者組進(jìn)行異質(zhì)性分析，消化道腫瘤組I2=46%，采用固定效應(yīng)模型，乳腺癌患者組I2=95%，采用隨機(jī)效應(yīng)模型。合并后發(fā)現(xiàn)HDAC2高表達(dá)對(duì)于消化道腫瘤患者的預(yù)后有顯著的負(fù)面影響(HR=2.03，95%CI=1.63～2.53，P<0.000 01)，對(duì)乳腺癌患者無顯著差異(HR=1.55，95%CI=0.82～2.95，P=0.19)。見圖2。

圖1 HDAC2表達(dá)與多種腫瘤預(yù)后關(guān)系的meta分析

圖2 HDAC2表達(dá)與消化系統(tǒng)腫瘤預(yù)后關(guān)系的meta分析

2.3敏感性分析和發(fā)表偏倚 通過采用不同的統(tǒng)計(jì)模型和排除低質(zhì)量研究進(jìn)行敏感性分析，發(fā)現(xiàn)結(jié)果并沒有產(chǎn)生顯著改變，說明了現(xiàn)有分析結(jié)果的穩(wěn)定性。發(fā)表性偏倚漏斗圖各點(diǎn)基本對(duì)稱分布，說明不存在明顯的發(fā)表偏倚，見圖3。

圖3 HDAC2表達(dá)與多種腫瘤預(yù)后關(guān)系的漏斗圖

3 討 論

本研究通過合并17篇可用的臨床文獻(xiàn)揭示了HDAC2基因的表達(dá)在多種腫瘤患者預(yù)后中所起的重要作用。發(fā)現(xiàn)HDAC2的高表達(dá)對(duì)于多種腫瘤患者的預(yù)后有明顯的負(fù)面影響。其影響可能是通過組蛋白去乙?；蛊渑c攜帶負(fù)電荷的DNA相互結(jié)合，抑制抑癌基因的表達(dá)與轉(zhuǎn)錄，致使細(xì)胞的過度增殖。HDAC2亦可作用于細(xì)胞周期素和周期蛋白依賴性激酶(CDK)，細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑(CDKi)及視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)基因(Rb)等與參與維持正常細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的相關(guān)因子，影響細(xì)胞的分裂，分化和凋亡，對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖產(chǎn)生影響〔22〕。

有文獻(xiàn)〔23〕稱HDAC2的高表達(dá)與腫瘤的級(jí)別和增殖活性呈正相關(guān)，還能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。通過亞組分析，本研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，HDAC2的高表達(dá)對(duì)于消化系統(tǒng)腫瘤患者的預(yù)后有顯著的負(fù)面影響?？傮w來說，HDAC2表達(dá)量越高，患者的總生存期越短。揭示HDAC2可能是消化系統(tǒng)腫瘤生存率的獨(dú)立預(yù)后因子。

同時(shí)本次Meta分析存在一些局限性：①可能存在漏篩，錯(cuò)篩部分符合標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn)的情況；②異質(zhì)性較大，可能需要進(jìn)一步分離異質(zhì)性。