維生素D對非酒精性脂肪性肝病患者鐵代謝的影響

劉志平，張金華，王湘寧，徐瑩

非酒精性脂肪性肝（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）是以肝臟脂肪含量增多、彌漫性肝細(xì)胞脂肪變?yōu)樘卣鞯募膊　AFLD存在明顯的胰島素抵抗，可導(dǎo)致肝臟脂肪沉積、脂質(zhì)過氧化，使肝細(xì)胞發(fā)生脂肪變性，還可通過慢性微炎癥狀態(tài)激活免疫細(xì)胞，釋放大量炎性介質(zhì)致使肝臟損害［1］。肝臟是儲存鐵的主要部位，鐵超載與NAFLD之間的關(guān)系越來越受重視。鐵超載主要與肝臟對鐵的代謝受到抑制有關(guān)，鐵超載增加NAFLD及相關(guān)并發(fā)癥的發(fā)病風(fēng)險［2-3］。近年來關(guān)于維生素D與NAFLD之間的關(guān)系逐漸受到關(guān)注，然而關(guān)于維生素D在NAFLD中的相關(guān)機(jī)制尚不明確。本研究通過觀察NAFLD患者體內(nèi)維生素D與鐵代謝相關(guān)指標(biāo)血清鐵（serum iron，SI）、血清鐵蛋白（serum ferritin，SF）及鐵調(diào)素（hepcidin，Hepc）的變化及其與胰島素抵抗之間的關(guān)系，探討維生素D缺乏對NAFLD的影響及可能機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年10月—2017年12月在我院就診的單純性NAFLD患者186例為研究對象。NAFLD診斷標(biāo)準(zhǔn)參照亞太工作組NAFLD指南的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］。根據(jù)國內(nèi)相關(guān)指南推薦［5］，按照血清25羥維生素D3［25-hydroxyvitamin D3，25（OH）D3］水平將研究對象分為維生素D缺乏組［25（OH）D3≤20 μg/L，115例］和非缺乏組（71例）。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）酒精性肝病、病毒性肝炎、自身免疫性肝病、wilson病、藥物性肝損傷者。（2）惡性腫瘤、肝膿腫和膽道疾病者。（3）合并糖尿病、貧血、嚴(yán)重心腦血管疾病、腎功能不全、甲狀旁腺疾患以及近3個月內(nèi)服用過影響維生素D代謝的藥物者。

1.2 方法

1.2.1 一般指標(biāo)檢測 所有受試者測量身高、體質(zhì)量，計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）。血壓檢測：研究對象靜坐15 min以上，采用常規(guī)袖套水銀血壓計(jì)測量3次，每次間隔5 min，取平均值。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)室檢查 所有受試者禁食10 h以后于次晨抽取靜脈血標(biāo)本，采用日本日立公司7600全自動生化分析儀檢測肝功能、腎功能、三酰甘油（triglyceride，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterin，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterin，HDL-C）、空腹血糖（fasting plasma glucose，F(xiàn)PG）、SI等指標(biāo)。放免法測定空腹胰島素（fasting insulin，F(xiàn)INS）水平；胰島素抵抗評估：計(jì)算穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）=FPG（mmol/L）×FINS（mIU/L）/22.5。電化學(xué)發(fā)光法測定25（OH）D3、SF濃度，試劑盒購自德國羅氏公司。酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）法檢測Hepc濃度，試劑盒購自上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)；計(jì)數(shù)資料以例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組基本資料比較 缺乏組與非缺乏組比較，年齡、性別、收縮壓、舒張壓、TG、TC、HDL-C、LDLC、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase，ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransferase，AST）、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（gamma glutamyl transferase，GGT）、FPG等指標(biāo)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），缺乏組BMI、FINS水平高于非缺乏組（P＜0.05），見表1。

2.2 2組SI、SF、Hepc及HOMA-IR比較 2組SI差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；缺乏組SF、Hepc水平及HOMA-IR均高于非缺乏組（P＜0.05），見表2。

2.3 維生素D與鐵代謝指標(biāo)及胰島素抵抗的相關(guān)性 186例NAFLD患者中，血清25（OH）D3水平與SF、Hepc及HOMA-IR呈弱負(fù)相關(guān)（r分別為-0.328、-0.314及-0.293，均P＜0.05），而血清25（OH）D3水平與SI之間則無明顯相關(guān)性（r=-0.174，P＞0.05）。

3 討論

NAFLD是一種與胰島素抵抗和遺傳易感密切相關(guān)的代謝應(yīng)激性肝臟損傷，與代謝綜合征互為因果。NAFLD被認(rèn)為是代謝綜合征在肝臟的表現(xiàn)，與代謝綜合征的相關(guān)組分如肥胖、高血糖、血脂紊亂、胰島素抵抗等之間密切相關(guān)。SF是反映體內(nèi)鐵儲存的主要指標(biāo)之一，體內(nèi)SF水平升高通常提示存在鐵超載現(xiàn)象。SF與氧化應(yīng)激、胰島素抵抗及代謝綜合征之間存在顯著相關(guān)性［6］。Kowdley等［7］研究發(fā)現(xiàn)，NAFLD患者體內(nèi)SF水平明顯升高，且SF水平與肝組織病理損傷嚴(yán)重程度之間存在正相關(guān)。筆者既往的研究亦發(fā)現(xiàn)，NAFLD患者SF水平明顯高于健康對照組，SF水平升高是NAFLD胰島素抵抗的主要影響因素［8］。因此，SF水平升高表明NAFLD體內(nèi)存在鐵代謝異常，而鐵負(fù)荷水平升高則參與了NAFLD的發(fā)生和發(fā)展。然而，NAFLD患者體內(nèi)鐵代謝異常產(chǎn)生原因尚未明了。本研究發(fā)現(xiàn)，NAFLD患者中，維生素D缺乏組SF水平明顯高于非缺乏組，提示在NAFLD患者中，維生素D可能參與了鐵代謝的調(diào)控過程。

Tab.1 Comparison of general information between two groups表1 2組基本資料比較

Tab.2 Comparison of SI，SF，Hepc and HOMA-IR between two groups表2 2組血清SI、SF、Hepc及HOMA-IR比較 （x±s）

維生素D受體在體內(nèi)分布極其廣泛，除了在維持骨骼健康中起著至關(guān)重要的作用外，其在骨外的生物學(xué)作用也越來越受關(guān)注。近年來關(guān)于維生素D與心血管疾病、糖尿病以及NAFLD之間的相關(guān)性逐漸受到重視，體內(nèi)維生素D缺乏可能參與了上述疾病的發(fā)生和發(fā)展。動物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在小鼠體內(nèi)維生素D缺乏增加了腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)的活性，并導(dǎo)致了胰島素抵抗的發(fā)生［9］。本研究結(jié)果顯示，NAFLD患者中，維生素D缺乏組HOMA-IR值高于非缺乏組，相關(guān)性分析顯示，維生素D水平與HOMA-IR存在負(fù)相關(guān)，提示維生素D缺乏可能加重了NAFLD患者胰島素抵抗，與動物研究中的發(fā)現(xiàn)一致。Hepc是肝臟合成的一種調(diào)控鐵代謝的重要因子，其主要的作用是抑制小腸對鐵的重吸收以及抑制巨噬細(xì)胞和肝細(xì)胞對鐵的釋放［10］。Bacchetta等［11］則發(fā)現(xiàn)，維生素D通過與維生素D受體結(jié)合，直接導(dǎo)致了肝細(xì)胞中Hepc的mRNA表達(dá)水平下降。本研究發(fā)現(xiàn)在維生素D缺乏的NAFLD患者中，血清Hepc、SF水平均明顯高于非缺乏組，而2組SI水平差異則無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。相關(guān)性研究發(fā)現(xiàn)，血清維生素D水平與SF、Hepc及HOMA-IR之間呈弱負(fù)相關(guān)，表明在NAFLD患者體內(nèi)，維生素D亦參與了鐵代謝的調(diào)控過程，維生素D水平下降對Hepc表達(dá)的抑制作用減弱，肝細(xì)胞等對鐵的釋放減少，體內(nèi)鐵負(fù)荷水平增加，SF水平升高；而體內(nèi)鐵負(fù)荷加重可導(dǎo)致肝臟鐵沉積增多致使肝細(xì)胞受損，進(jìn)而炎癥因子、活性氧簇水平升高則可加重胰島素抵抗。

綜上所述，NAFLD合并維生素D缺乏組患者BMI、FINS、SF、Hepc及HOMA-IR水平明顯高于非維生素D缺乏組。維生素D可能通過調(diào)節(jié)NAFDL患者體內(nèi)鐵代謝過程，導(dǎo)致血清鐵蛋白水平升高，進(jìn)而加重胰島素抵抗。