超聲彈性成像在乳腺癌中的診斷價(jià)值及其與腫瘤細(xì)胞增殖凋亡基因的相關(guān)性分析

李正楠，張健，倪小京

海門(mén)市人民醫(yī)院1超聲科，2病理科，江蘇海門(mén)226100

有研究顯示，近年來(lái)，乳腺癌的發(fā)病率逐年增高，且呈現(xiàn)明顯的年輕化趨勢(shì)[1]。手術(shù)切除是治療乳腺癌的有效方法，但患者術(shù)后極易復(fù)發(fā)。因此，為了改善乳腺癌患者的預(yù)后并延長(zhǎng)患者的生存期，早發(fā)現(xiàn)、早診斷對(duì)乳腺癌患者尤為重要。超聲、數(shù)字乳腺X線攝影及核磁共振成像等均為乳腺癌的常規(guī)診斷方法，并具有檢測(cè)效果明確、無(wú)創(chuàng)及不良反應(yīng)少等優(yōu)點(diǎn)[2]。但是，也有研究顯示，常規(guī)超聲對(duì)乳腺結(jié)節(jié)樣病灶的辨別難度較大，建議選擇超聲彈性成像進(jìn)行診斷與鑒別[3]。目前，超聲彈性成像技術(shù)對(duì)于前列腺疾病、甲狀腺疾病等疾病的診斷效果較好，其作為一種新型超聲診斷技術(shù)，可通過(guò)比較病變組織加壓前后彈性信息超聲圖像的改變情況，對(duì)病變是否存在進(jìn)行推斷，但是關(guān)于超聲彈性成像技術(shù)用于乳腺癌術(shù)前診斷的報(bào)道較少[4]。因此，本研究探討了超聲彈性成像在乳腺癌中的診斷價(jià)值及其與腫瘤細(xì)胞增殖凋亡基因的相關(guān)性，旨在為臨床乳腺癌的診斷提供參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月至2018年1月于海門(mén)市人民醫(yī)院就診的乳腺腫塊患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者均經(jīng)組織病理學(xué)檢查確診為乳腺良惡性腫瘤；患者均行超聲彈性成像檢查和病灶組織基因檢測(cè)。排除標(biāo)準(zhǔn)：乳腺膿腫、急性乳腺炎、乳腺囊腫等乳腺非實(shí)質(zhì)性腫塊患者。根據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，本研究共納入80例乳腺腫塊患者，共102個(gè)病灶；患者的年齡為24～61歲，平均年齡為（48.54±12.13）歲。

1.2 超聲彈性成像檢查及評(píng)分

囑所有患者取仰臥位，充分暴露雙側(cè)腋窩和前胸，首先對(duì)患者行常規(guī)乳腺檢查，主要檢查患者乳腺病灶的形狀、大小、回聲情況，并推斷其與鄰近組織的關(guān)系，以及是否存在鈣化病灶等。然后通過(guò)彩色多普勒超聲檢查患者病灶的血流情況，待患者病情穩(wěn)定后，對(duì)乳腺癌病灶進(jìn)行超聲彈性成像檢查[5]。參考5分制改良評(píng)分法[6]對(duì)良惡性腫瘤進(jìn)行評(píng)分：1分，病灶整體或大部分為綠色；2分，病灶中心為藍(lán)色，周圍為綠色；3分，病灶中心和周圍藍(lán)、綠色分布均勻；4分，病灶整體為藍(lán)色，其內(nèi)有少許綠色；5分，病灶及周圍均為藍(lán)色，其內(nèi)伴或不伴有綠色。其中，≥3分為惡性，＜3分為良性。

1.3 病灶組織基因檢測(cè)

取所有患者的病灶組織，Trizol試劑裂解；加入氯仿0.2 ml，離心10 min，離心速度為12 000 r/min。取上清并加入同體積的異丙醇混勻，沉淀總RNA；75%乙醇清洗RNA沉淀，去除乙醇溶液；紫外光吸收法測(cè)定RNA的濃度及純度；反轉(zhuǎn)錄得到cDNA；采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）試劑盒檢測(cè)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transduction and activator of transcription 3，STAT3）、存活蛋白（survivin）和B細(xì)胞淋巴瘤2（B cell lymphoma 2，Bcl-2）基因的表達(dá)水平；相應(yīng)計(jì)算機(jī)軟件根據(jù)內(nèi)參計(jì)算各基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量[7]。

1.4 觀察指標(biāo)

靈敏度=真陽(yáng)性例數(shù)（/真陽(yáng)性+假陰性）例數(shù)×100%；特異度=真陰性例數(shù)（/真陰性+假陽(yáng)性）例數(shù)×100%；陽(yáng)性預(yù)測(cè)值=真陽(yáng)性例數(shù)（/真陽(yáng)性+假陽(yáng)性）例數(shù)×100%；陰性預(yù)測(cè)值=真陰性例數(shù)（/真陰性+假陰性）例數(shù)×100%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。以組織病理學(xué)診斷結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，將超聲彈性成像結(jié)果與組織病理學(xué)診斷結(jié)果進(jìn)行對(duì)照分析。采用Kappa一致性檢驗(yàn)對(duì)超聲彈性成像診斷結(jié)果與組織病理學(xué)診斷結(jié)果的差異和一致性進(jìn)行檢驗(yàn)（Kappa值＜0.40，表示二者的一致性較差；Kappa值為0.40～0.75，表示二者的一致性尚可；Kappa值＞0.75，表示二者的一致性良好）。采用Spearman法分析良惡性腫瘤的超聲彈性成像評(píng)分與良惡性腫瘤細(xì)胞相關(guān)增殖基因mRNA相對(duì)表達(dá)量的相關(guān)性。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乳腺組織病理學(xué)檢查結(jié)果

經(jīng)組織病理學(xué)診斷后發(fā)現(xiàn)，102個(gè)病灶中，良性病灶41個(gè)，惡性病灶61個(gè)。良性病灶中，乳腺纖維腺瘤26個(gè)，導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤15個(gè)；惡性病灶中，浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌52個(gè)，乳腺導(dǎo)管內(nèi)癌4個(gè)，浸潤(rùn)性乳頭狀癌3個(gè)，髓樣癌2個(gè)。

2.2 超聲彈性成像診斷

超聲彈性成像診斷良惡性病灶與病理組織診斷結(jié)果比較，一致性尚可（Kappa=0.461，P＜0.05）。超聲彈性成像診斷惡性病灶的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為81.97%（50/61）、63.41%（26/41）、76.92%（50/65）和70.27%（26/37）；診斷良性病灶的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為63.41%（26/41）、81.97%（50/61）、70.27%（26/37）和76.92%（50/65）。（表1）

表1 超聲彈性成像與病理診斷結(jié)果對(duì)照

2.3 良惡性腫瘤細(xì)胞相關(guān)增殖基因mRNA相對(duì)表達(dá)量的比較

惡性腫瘤中STAT3mRNA、survivinmRNA和Bcl-2mRNA的相對(duì)表達(dá)量分別為（180.11±25.54）、（130.41±13.50）、（150.46±20.14），均高于良性腫瘤中的（112.01±22.41）、（106.24±16.64）、（100.41±14.54），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=13.856、8.067、13.686，P＜0.05）。

2.4 相關(guān)性分析

102個(gè)病灶中，超聲彈性成像評(píng)分1分病灶20個(gè)，2分病灶17個(gè)，3分病灶32個(gè)，4分病灶33個(gè)。將良惡性病灶的超聲彈性成像評(píng)分與良惡性腫瘤細(xì)胞相關(guān)增殖基因mRNA相對(duì)表達(dá)量的相關(guān)性進(jìn)行Spearman秩相關(guān)分析，結(jié)果顯示，良惡性病灶的超聲彈性成像評(píng)分與STAT3mRNA、survivinmRNA和Bcl-2mRNA的表達(dá)均呈正相關(guān)（rs=0.511、0.606、0.554，P＜0.05）。

3 討論

乳腺癌可對(duì)絕大部分女性患者的身心健康產(chǎn)生嚴(yán)重的負(fù)面影響，但由于乳腺癌組織缺乏神經(jīng)支配，患者于患病前期常無(wú)明顯不適，多于體檢時(shí)發(fā)現(xiàn)，從而耽誤了最佳治療時(shí)機(jī)[8]。目前，臨床尚未發(fā)現(xiàn)與乳腺癌密切相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物，因此，主要通過(guò)影像學(xué)數(shù)據(jù)為臨床醫(yī)師對(duì)乳腺癌的診斷提供參考依據(jù)。

超聲和乳腺鉬靶X線檢查是臨床乳腺癌檢查的主要方法，其中，乳腺鉬靶X線檢查在乳腺疾病的診斷中較為常用，且其操作簡(jiǎn)便，數(shù)據(jù)可靠，對(duì)患者造成的痛苦較少，并具有較高的分辨率[9]。此外，由于乳腺鉬靶X線檢查方法幾乎不受體型和年齡的限制，因此，目前其已成為乳腺體檢篩查和常規(guī)檢查的主要方法。但亦有研究顯示，盡管乳腺鉬靶X線對(duì)于邊緣浸潤(rùn)、形態(tài)不規(guī)則、星芒狀的高密度腫塊及存在惡性鈣化或刺狀邊緣的乳腺腫塊均有較高的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值，但其對(duì)病灶鈣化相當(dāng)敏感，具有一定的誤診率[10]。此外，乳腺鉬靶X線攝影存在一定的重疊圖像，并對(duì)乳腺的輻射較大，尤其是未婚和未生育的女性患者不宜進(jìn)行乳腺鉬靶X線重復(fù)性檢查[11]。

隨著超聲彈性成像技術(shù)的不斷發(fā)展與進(jìn)步，其在宮頸癌和胃癌中的應(yīng)用逐漸廣泛，并具有較好的臨床診斷效能。超聲彈性成像能夠使以病灶前后回聲的位移變化信號(hào)形成實(shí)時(shí)彩色圖像，當(dāng)彈性系數(shù)較大時(shí)，位移受壓變小后組織呈現(xiàn)藍(lán)色；當(dāng)彈性系數(shù)較小時(shí)，位移受壓變大后組織呈現(xiàn)紅色[12-13]。影像科醫(yī)師可通過(guò)直觀的色彩對(duì)不同組織的彈性屬性進(jìn)行觀察而進(jìn)行鑒別診斷。

本研究結(jié)果顯示，經(jīng)病理組織診斷，102個(gè)病灶中，良性病灶41個(gè)，惡性病灶61個(gè)。超聲彈性成像診斷良惡性腫瘤與病理組織診斷結(jié)果比較，一致性尚可（Kappa=0.461，P＜0.05）。超聲彈性成像診斷惡性腫瘤的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為81.97%、63.41%、76.92%和70.27%。上述結(jié)果均提示超聲彈性成像診斷乳腺良惡性腫瘤具有較高的靈敏度和特異度。由于惡性腫瘤組織的硬度較高，彈性較強(qiáng)，腫瘤細(xì)胞活動(dòng)較慢，而良性腫瘤組織的彈性特點(diǎn)正好與惡性腫瘤組織相反，因此，超聲彈性成像可為臨床醫(yī)師診斷惡性腫瘤提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)參考依據(jù)。乳腺組織出現(xiàn)病變后，腫瘤細(xì)胞發(fā)生過(guò)度增殖，腫瘤組織的異常促進(jìn)乳腺病灶組織硬度升高[14]。目前，以病理學(xué)檢查結(jié)果作為診斷良惡性腫瘤的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但由于乳腺癌患者多為女性，其對(duì)無(wú)創(chuàng)檢查具有更高的傾向性，因此，超聲彈性成像在乳腺癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值更高。

基因的異常表達(dá)是導(dǎo)致組織發(fā)生惡變的根本原因，細(xì)胞增殖促進(jìn)基因的表達(dá)對(duì)腫瘤的惡性程度具有直接的決定作用。有研究證實(shí)，STAT3、survivin、Bcl-2與胃癌和宮頸癌細(xì)胞的惡性增殖密切相關(guān)，激活STAT3信號(hào)通路可導(dǎo)致細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化和異常增殖；survivin是重要的凋亡抑制蛋白，在多種腫瘤中高表達(dá)；Bcl-2是重要的原癌基因，可抑制細(xì)胞的凋亡，在骨髓瘤及白血病患者中均表達(dá)異常[15-16]。本研究結(jié)果顯示，惡性病灶中STAT3、survivin和Bcl-2mRNA的相對(duì)表達(dá)量均高于良性病灶（P＜0.05）；超聲彈性成像評(píng)分與惡性病灶中STAT3、survivin和Bcl-2mRNA的表達(dá)均呈正相關(guān)（rs=0.511、0.606、0.554，P＜0.05）。上述結(jié)果提示超聲彈性成像評(píng)分與腫瘤細(xì)胞增殖凋亡基因的表達(dá)具有相關(guān)性，也證實(shí)乳腺腫瘤患者腫瘤組織中的STAT3、survivin和Bcl-2mRNA表達(dá)異常，提示增殖基因可作為判斷乳腺腫瘤良惡性的重要指標(biāo)。

綜上所述，超聲彈性成像在乳腺癌的診斷中具有一定的應(yīng)用價(jià)值，同時(shí)超聲彈性成像評(píng)分與腫瘤細(xì)胞增殖凋亡基因的表達(dá)具有一定的相關(guān)性。