頤腦解郁方對(duì)缺血性腦卒中及卒中后抑郁、焦慮、癡呆大鼠宏觀表征變化的干預(yù)作用

趙子珺 趙瑞珍 張 媛 趙 蕓 鄭春翔 唐啟盛

(1 北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京，100029； 2 北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院，北京，100029)

腦卒中是導(dǎo)致我國居民死亡的第一大病因，其發(fā)病率呈逐年升高的趨勢(shì)[1-2]。腦卒中后精神疾患的出現(xiàn)，直接影響患者的生命質(zhì)量、軀體功能和認(rèn)知功能的康復(fù)，提高腦卒中的病死率[3-5]。目前對(duì)于卒中后精神疾患的治療，西藥具有較強(qiáng)的不良反應(yīng)，患者普遍依從性差[5]，與之相比，中醫(yī)在腦卒中及卒中后精神疾患的治療方面具有一定優(yōu)勢(shì)和發(fā)展?jié)摿Α．惒⊥问侵嗅t(yī)辨證論治的特色和精髓，唐啟盛教授在既往對(duì)腦卒中后精神疾病的臨床研究中發(fā)現(xiàn)，其中醫(yī)證候多屬于腎虛肝郁型，采用益腎調(diào)氣中藥收效顯著?！坝兄T內(nèi)必形諸外”，動(dòng)物宏觀表征是內(nèi)在病理變化的外在體現(xiàn)，以宏觀表征為著眼點(diǎn)開展研究，比較接近臨床診病過程，符合中醫(yī)整體觀和辨證論治的臨床思路，同時(shí)也是建立中醫(yī)“病證結(jié)合”模型的較好切入點(diǎn)[6]。因此，本研究復(fù)制缺血性腦卒中、PSD、PSA、VaD動(dòng)物模型，動(dòng)態(tài)觀察腦卒中向PSD、PSA、VaD演變過程中不同模型、不同時(shí)點(diǎn)的表征變化特點(diǎn)。探討各模型表征演化趨勢(shì)，并進(jìn)行證候評(píng)價(jià)；再以益腎調(diào)氣方藥頤腦解郁方對(duì)模型大鼠進(jìn)行干預(yù)，同時(shí)以“藥物反證”驗(yàn)證證候模型，觀察并記錄用藥后大鼠體重及表征變化情況，以期評(píng)價(jià)益腎調(diào)氣方藥頤腦解郁方的治療作用，并為卒中后精神疾患的病證結(jié)合研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 SPF級(jí)雄性wistar大鼠，體重(200±10)g，6周齡，購于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，合格證號(hào)：SCXK(京)2016-0006。飼養(yǎng)于室溫(20±2)℃、相對(duì)濕度50%～60%的環(huán)境，光照節(jié)律12 L/12 D(6：00-18：00)。預(yù)養(yǎng)1周后,進(jìn)行Open-field行為學(xué)評(píng)分,取評(píng)分相近的大鼠,隨機(jī)分為卒中模型組、卒中觀察組、卒中假手術(shù)組、PSD模型組、PSD觀察組、PSD假手術(shù)組、PSA模型組、PSA觀察組、PSA假手術(shù)組、VaD模型組、VaD觀察組、正常組，每組8只。

1.1.2 藥物 頤腦解郁方(藥物組成：刺五加20 g、郁金10 g、白芍10 g、梔子10 g)，由北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院提供。以相當(dāng)于成人劑量的7倍計(jì)算，配成419 mg/kg混懸液(即1劑配方顆粒加100 mL蒸餾水)，貯存于4 ℃冰箱中備用，臨用前加熱。

1.1.3 試劑與儀器 戊巴比妥鈉(P3761-5，Sigma)，尼龍栓線(2838-A4，北京沙東生物技術(shù)有限公司)；大鼠夾尾夾(自制)、大鼠束縛架(自制)。

1.2 方法

1.2.1 分組及模型制備 進(jìn)購動(dòng)物并適應(yīng)性預(yù)養(yǎng)1周后，通過Open-filed實(shí)驗(yàn)評(píng)分將大鼠隨機(jī)分為以下12組：卒中模型組、卒中觀察組、卒中假手術(shù)組、PSD模型組、PSD觀察組、PSD假手術(shù)組、PSA模型組、PSA觀察組、PSA假手術(shù)組、VaD模型組、VaD觀察組、正常組。

腦卒中模型：參考新式線栓法[7]，制備大腦中動(dòng)脈梗死的腦卒中模型。動(dòng)物禁食水12 h后，腹腔注射1%戊巴比妥鈉(5 mL/kg體重)麻醉動(dòng)物。頸正中線切口3 cm左右，鈍性分離，暴露右側(cè)胸鎖乳突肌和胸骨舌骨肌之間的三角區(qū)域，沿胸鎖乳突肌內(nèi)側(cè)分離肌肉筋膜，暴露CCA，結(jié)扎CCA近心端，距此節(jié)1 cm處的CCA遠(yuǎn)心端系一松節(jié)備用，在CCA近ICA分叉處以動(dòng)脈夾暫時(shí)夾閉，在CCA的兩線間，距CCA分叉處5 mm左右，剪一小口，松開動(dòng)脈夾，插入經(jīng)多聚賴氨酸處理的尼龍栓線，在栓線標(biāo)記接近CCA與ICA分叉處或遇阻力感時(shí)停止，2 h后進(jìn)行再灌注。入組標(biāo)準(zhǔn)：大鼠于缺血再灌注2 h后出現(xiàn)對(duì)側(cè)前肢蜷曲、行走轉(zhuǎn)圈或行走向?qū)?cè)倒體征則納入，無此體征或于2 h后仍不清醒者棄去。假手術(shù)組僅分離CCA、ICA，不插入栓線。

PSD模型：參考導(dǎo)師唐啟盛教授[8-9]方法復(fù)制PSD模型。首先建立腦卒中模型，手術(shù)1周后，單籠飼養(yǎng)，并予21 d慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激(CUMS)，包括：禁食24 h、禁水24 h、潮濕墊料24 h、晝夜顛倒、夾尾1 min、束縛3 h、鼠籠傾斜24 h，每種方法使用3次。

PSA模型：腦卒中模型術(shù)后1周，采用不確定性空瓶飲水應(yīng)激復(fù)制卒中后焦慮模型。術(shù)后經(jīng)1周適應(yīng)期后，進(jìn)行定時(shí)喂水訓(xùn)練7 d，每天早9:00～9:10和晚21:00～21:10給動(dòng)物飲水，其他時(shí)間撤去水瓶不給水。第8天至第21天，進(jìn)行應(yīng)激實(shí)驗(yàn)，每天在上述2個(gè)時(shí)間段內(nèi)，隨機(jī)選取一個(gè)時(shí)間段給予空瓶刺激，另一時(shí)間段喂水，刺激的給予是無規(guī)律的，但維持1次/d。

VD模型[10]：建立MCAO模型后，大鼠常規(guī)飼養(yǎng)，28 d后進(jìn)行水迷宮評(píng)價(jià)，(實(shí)驗(yàn)組大鼠平均逃避潛伏期-正常組組大鼠平均逃避潛伏期)/實(shí)驗(yàn)組大鼠平均逃避潛伏期>20%定為VD鼠，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)。

正常組：正常飼養(yǎng)。

1.2.2 干預(yù)方法 卒中組自手術(shù)1周后開始藥物干預(yù)，觀察組給予頤腦解郁方灌胃，模型組、假手術(shù)組均給予蒸餾水灌胃，灌胃劑量10 mL/kg，1次/d，持續(xù)2周。PSD組、PSA組、VaD組及正常組，于應(yīng)激結(jié)束后開始藥物干預(yù)，觀察組給予頤腦解郁方灌胃，正常組、模型組、假手術(shù)組均給予蒸餾水灌胃，灌胃劑量10 mL/kg，1次/d，持續(xù)4周。

1.2.3 檢測(cè)指標(biāo)與方法 一般狀態(tài)觀察：每周觀察大鼠的行為活動(dòng)、精神狀態(tài)、對(duì)外界刺激的反應(yīng)性、被毛色澤、糞便、舌色等。大鼠體重增長情況測(cè)量：實(shí)驗(yàn)開始后，每周監(jiān)測(cè)大鼠體重，并根據(jù)體重調(diào)整給藥量。計(jì)算卒中組大鼠灌胃第1、2周以及PSD、PSA、VaD組灌胃第1、2、4周體重增長情況。

2 結(jié)果

2.1 一般狀態(tài)觀察結(jié)果 為更好地體現(xiàn)大鼠表征動(dòng)態(tài)變化情況，觀察結(jié)果根據(jù)時(shí)間順序進(jìn)行描述。見圖1。

實(shí)驗(yàn)前，各組大鼠精神狀態(tài)良好，對(duì)外來刺激反應(yīng)靈敏，行為活躍，被毛致密緊披有光澤，麥粒型糞便且干稀適中，舌色淡紅，舌下脈絡(luò)不明顯、呈淡紫色。

2.1.1 缺血性腦卒中組

2.1.1.1 術(shù)后1周 手術(shù)大鼠術(shù)后蘇醒表現(xiàn)為弓背、少動(dòng)或不動(dòng)，行走時(shí)左側(cè)肢體力弱，或向左側(cè)轉(zhuǎn)圈，或向左側(cè)傾倒，抬頭困難；精神狀態(tài)萎靡不振，雙眼黯淡無神，少數(shù)大鼠觸之不動(dòng)；豎毛；糞便麥粒型，粒細(xì)小，質(zhì)硬色深。術(shù)后1周內(nèi)，抬頭困難表現(xiàn)逐漸減少至消失，肢體力弱、轉(zhuǎn)圈、傾倒的表現(xiàn)趨于好轉(zhuǎn)，少數(shù)大鼠弓背蜷縮、少動(dòng)；精神狀態(tài)、反應(yīng)靈敏性好轉(zhuǎn)，無觸之不動(dòng)表現(xiàn)；少數(shù)大鼠豎毛持續(xù)；糞便棕色麥粒型，質(zhì)軟；口鼻顏色較黯淡，爪甲及足底淡紅色，耳廓微血管清晰淡紅；舌色淡紅。

假手術(shù)大鼠手術(shù)蘇醒后活動(dòng)度低，抬頭困難，無偏癱、追尾表現(xiàn)；精神狀態(tài)差，雙眼黯淡；豎毛；糞便麥粒型，粒細(xì)小，質(zhì)硬色深。假手術(shù)大鼠術(shù)后7 d內(nèi)行為活動(dòng)、精神狀態(tài)、被毛色澤、糞便等恢復(fù)正常。行為活躍，雙眼眼大紅亮、動(dòng)眼靈活，毛色純白，被毛致密緊披有光澤，糞便棕色麥粒型，質(zhì)軟；口鼻潤澤、呈淡粉色，爪甲及足底淡紅色，耳廓微血管清晰淡紅；舌色淡紅。

2.1.1.2 術(shù)后2周 模型組大鼠活動(dòng)度略低于假手術(shù)組，精神狀態(tài)稍差，部分大鼠瞇眼；被毛色白，欠光澤，少數(shù)大鼠豎毛；糞便棕色麥粒型，質(zhì)軟；口鼻顏色稍黯淡，爪甲及足底淡紅色，耳廓微血管清晰淡紅；舌色淡紅。

圖1 實(shí)驗(yàn)流程圖

卒中觀察組大鼠活動(dòng)度較前略增加；精神狀態(tài)改善，雙眼較模型組紅亮，動(dòng)眼靈活；被毛色白，豎毛減少；糞便深棕色麥粒型，質(zhì)軟；口鼻顏色稍黯淡，爪甲及足底淡紅色，耳廓微血管清晰淡紅；舌色淡紅。

卒中假手術(shù)組宏觀表征較前無明顯變化。

2.1.1.3 術(shù)后3周 模型組部分大鼠活動(dòng)度減低，梳理次數(shù)減少，倦臥，精神狀態(tài)轉(zhuǎn)差，雙眼黯淡，聞響后反應(yīng)欠靈敏，口鼻顏色黯淡，舌色較前紫暗；同時(shí)可見部分大鼠攻擊行為較前增加，舌色較前者紅。少數(shù)大鼠出現(xiàn)淺棕色稀便。

卒中觀察組大鼠無明顯活動(dòng)度減低、攻擊行為增加表現(xiàn)，反應(yīng)性可，聞響即抬頭。糞便棕色麥粒型，質(zhì)軟，未見稀便。舌色淡紅，口鼻顏色淡紅。

卒中假手術(shù)組大鼠表征同前，無明顯改變。

2.1.2 卒中后精神疾病組

2.1.2.1 術(shù)后2周 PSD大鼠出現(xiàn)明顯的易激惹表現(xiàn)，束縛及夾尾時(shí)可見明顯反抗、嘶叫、毛須豎立，抓取時(shí)反抗明顯；被毛色白，豎毛；束縛時(shí)，大鼠排泄行為增加，為棕色軟便或稀便，未行束縛時(shí)糞便棕色麥粒型、質(zhì)軟；口鼻顏色稍黯，舌色淡紅。

PSA大鼠探究行為、攻擊行為明顯增多；反應(yīng)靈敏性高，輕微響聲即抬頭；被毛色白，豎毛不明顯；糞便棕色麥粒型，質(zhì)硬。舌少津，色淡紅。

VaD大鼠行為活動(dòng)較前無明顯改變，精神狀態(tài)稍差，部分大鼠雙眼黯淡無神，被毛色白，欠光澤，少數(shù)大鼠豎毛。糞便棕色麥粒型，質(zhì)軟。舌色淡紅。

2.1.2.2 術(shù)后3周 PSD大鼠活動(dòng)度較前減低，修飾行為減少，精神狀態(tài)轉(zhuǎn)差，束縛及夾尾時(shí)反抗、嘶叫程度減低，掙脫束縛次數(shù)減少,出現(xiàn)脫毛現(xiàn)象，被毛凌亂欠光澤。束縛時(shí)，大鼠排泄行為增加，為棕色軟便或稀便，未行束縛時(shí)多為棕色麥粒型軟便，偶見稀便?？诒趋龅?，舌色稍顯紫暗。

PSA大鼠探究行為、攻擊行為持續(xù)，修飾行為減少，有明顯啃咬鼠籠行為，抓取反抗明顯，給水時(shí)段搶奪水瓶激烈。部分大鼠豎毛，被毛欠光澤。糞便麥粒型，粒小色黑質(zhì)硬。舌紅少津。

VaD大鼠自發(fā)活動(dòng)減少，梳理次數(shù)減少，部分大鼠倦臥、對(duì)外界刺激反應(yīng)性下降，被毛欠光澤，偶有稀便。舌潤澤，舌色淡紅。

2.1.2.3 術(shù)后4周 PSD大鼠活動(dòng)度低，自發(fā)活動(dòng)較少，倦臥、少動(dòng)，喜蟄伏于鼠籠角落，精神狀態(tài)差，瞇眼、雙眼黯淡，反應(yīng)淡漠，聞響后不抬頭，抓取反抗。被毛干枯雜亂無光澤，毛色白中夾黃，脫毛現(xiàn)象持續(xù)。形瘦。多為棕色麥粒型軟便，偶見稀便。足底顏色偏紫，口鼻黯淡，舌色紫暗，舌下脈絡(luò)清晰、呈青紫色。

PSA大鼠攻擊行為、探究行為、修飾行為同前，鼠籠托盤內(nèi)可見大量細(xì)碎飼料殘?jiān)?為大鼠啃咬飼料但不食入所致)。抓取時(shí)呈弓背抬頭的攻擊姿態(tài)，抓取反抗激烈、嘶叫。形瘦，豎毛，被毛欠光澤，脫毛。糞便麥粒型，粒小色黑質(zhì)硬?？诒趋龅嗉t少津。

VaD大鼠少動(dòng)、扎堆、倦臥、不活躍，精神狀態(tài)較差，閉目趴臥時(shí)間較長，對(duì)外界刺激反應(yīng)性下降，行動(dòng)略遲緩，被毛色白欠順滑，時(shí)有稀便?？诒巧园?，舌潤澤，舌色淡紅。

2.1.2.4 術(shù)后5～8周 PSD模型組、假手術(shù)組大鼠經(jīng)灌胃后行為活動(dòng)、精神狀態(tài)、被毛色澤等均較灌胃前無明顯差異。

PSD觀察組大鼠經(jīng)灌胃后，較應(yīng)激后活躍，于角落蜷縮蟄伏等表現(xiàn)減少，對(duì)外界刺激興奮性增加，脫毛現(xiàn)象明顯減輕，被毛較前順滑，稀便現(xiàn)象減少。舌色稍暗，舌下脈絡(luò)淡紫。

PSA模型組、假手術(shù)組大鼠停止應(yīng)激并灌胃后無搶奪水瓶表現(xiàn)，探究行為較前減少，攻擊、啃咬鼠籠行為略減少。稀便增多，肛周污染明顯。脫毛。舌較前潤澤，舌紅。

PSA觀察組大鼠探究行為減少，梳理次數(shù)增加，攻擊及啃咬鼠籠行為明顯減少，抓取反抗程度減低，脫毛現(xiàn)象減少，糞便質(zhì)軟色棕。舌體潤澤，舌色淡紅。

VaD模型組大鼠經(jīng)灌胃后，行為活動(dòng)、精神狀態(tài)、被毛色澤等均較灌胃前無明顯差異。舌多津，舌色淡紅。

VaD觀察組大鼠經(jīng)灌胃后，自發(fā)活動(dòng)、梳理次數(shù)增加，精神狀態(tài)改善，倦臥減少，稀便現(xiàn)象減少。舌體潤澤，舌色淡紅。

2.2 大鼠經(jīng)灌胃后體重測(cè)量結(jié)果

2.2.1 卒中組大鼠體重測(cè)量結(jié)果 見表1。卒中組及正常組大鼠體重均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。治療1周后，卒中觀察組較模型組體重略有升高，但無明顯差異。模型組、觀察組體重顯著低于假手術(shù)組、正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。治療2周后，觀察組與模型組比較，體重有明顯上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且與假手術(shù)組比較無顯著差異。模型組與假手術(shù)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。在治療1周后及2周后時(shí)點(diǎn)上，卒中各組體重均顯著低于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

表1 卒中組大鼠體重測(cè)量結(jié)果

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01；與假手術(shù)組比較，△P<0.05，△△P<0.01

表2 PSD組大鼠體重測(cè)量結(jié)果

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01；與假手術(shù)組比較，△P<0.05，△△P<0.01

表3 卒中后焦慮組大鼠體重測(cè)量結(jié)果

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01；與假手術(shù)組比較，△P<0.05，△△P<0.01

表4 血管性癡呆組大鼠體重測(cè)量結(jié)果

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01；與正常組比較，△P<0.05，△△P<0.01

圖2 卒中后精神疾病發(fā)展示意圖

2.2.2 PSD組大鼠體重測(cè)量結(jié)果 見表2。各組大鼠體重均呈上升趨勢(shì)。治療1周及2周后，PSD觀察組較模型組體重均有升高，但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且模型組、觀察組體重顯著低于假手術(shù)組、正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。治療4周后，中藥組較模型組體重有顯著上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，仍明顯低于假手術(shù)及正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)。各時(shí)點(diǎn)假手術(shù)組體重均低于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

2.2.3 PSA組大鼠體重測(cè)量結(jié)果 見表3，治療4周內(nèi)，各組大鼠體重呈上升趨勢(shì)。治療1周及2周后，模型組、觀察組、假手術(shù)組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。治療4周后，模型組大鼠體重明顯低于假手術(shù)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，觀察組與假手術(shù)組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。各時(shí)間點(diǎn)，正常組與PSA各組比較，體重均顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

2.2.4 VaD組大鼠體重測(cè)量結(jié)果 見表4，各組大鼠體重總體呈上升趨勢(shì)。在治療1周、2周、4周時(shí)間點(diǎn)上，模型組大鼠體重均顯著低于正常組，觀察組體重略高于模型組，但二者間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

3.1 卒中后精神疾病的發(fā)展演化及頤腦解郁方的立方依據(jù) 前期臨床及基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn)，腦卒中患者發(fā)病后可出現(xiàn)情緒不穩(wěn)、認(rèn)知功能受損、思維遲滯、注意力下降及睡眠障礙等精神癥狀組群[11]，據(jù)其特征表現(xiàn)可歸屬于閾下抑郁、閾下焦慮或早期癡呆的范疇，其中部分患者最終發(fā)展為卒中后精神疾病。據(jù)此，唐啟盛教授提出，PSD、PSA、VaD是由卒中后精神癥狀組群階段發(fā)展而來。見圖2。

中醫(yī)認(rèn)為，中風(fēng)病的發(fā)展轉(zhuǎn)歸，由內(nèi)風(fēng)、痰濁、邪熱、瘀血等病因與機(jī)體正氣相爭及其消長、變化的結(jié)果所決定。中風(fēng)病后，若腎精虧耗，氣虛痰阻，血行不暢，筋脈失養(yǎng)，則可出現(xiàn)行動(dòng)遲緩、記憶力減退等癥狀；肝郁氣滯，痰瘀氣結(jié)者，可見郁郁寡歡等癥狀；氣郁化火，郁火痰熱，擾亂心神者，又可出現(xiàn)煩躁焦慮、擔(dān)憂緊張等表現(xiàn)。隨著病程遷延，若心神失養(yǎng)，營血受損，肝郁加重，可出現(xiàn)心情抑郁、時(shí)時(shí)欲哭、悲觀絕望、失眠等抑郁癥表現(xiàn)；氣郁化火，灼傷陰津，肝腎陰虛，心失所養(yǎng)則可出現(xiàn)坐立不安、煩躁擔(dān)心及汗出、心悸、手抖等一系列植物神經(jīng)癥狀的焦慮樣表現(xiàn)；病程纏綿，瘀久致虛，氣血虧耗，髓海不足，又可導(dǎo)致癡呆癥狀的出現(xiàn)，如情感淡漠、反應(yīng)遲鈍、認(rèn)知功能障礙等。

究其病機(jī)之根本，不外乎氣機(jī)阻滯、腦絡(luò)痹阻屬實(shí)；氣血不足、腎精虧虛、腦失所養(yǎng)屬虛。根據(jù)中醫(yī)理論，并結(jié)合多年臨床經(jīng)驗(yàn)，唐啟盛教授認(rèn)為，中風(fēng)后情志疾病證屬本虛標(biāo)實(shí)，腎精虧虛為本，氣機(jī)壅滯為標(biāo)。其治療當(dāng)以補(bǔ)腎疏肝、調(diào)氣通絡(luò)、解郁安神為治療原則，以此立補(bǔ)腎調(diào)氣之法，以固本解郁為要，而又虛實(shí)兼顧，組成復(fù)方頤腦解郁方。臨床應(yīng)用于中風(fēng)后情志疾病，收效滿意。頤腦解郁方由刺五加、五味子、郁金、梔子組成，方中刺五加益氣健脾，補(bǔ)腎安神；郁金疏肝解郁，行氣活血，清心安神；五味子益氣生津、補(bǔ)腎寧心；梔子瀉火除煩。四味藥物共奏補(bǔ)腎調(diào)氣之功效?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究同樣提示上述藥物具有一定的腦保護(hù)作用，方中刺五加包含的苷類物質(zhì)具有減緩腦缺血損傷、抗疲勞作用[12-13]，郁金包含的主要活性成分為姜黃素類及揮發(fā)油兩大類，具有抗抑郁功效[14]；五味子的主要活性成分五味子乙素具有保護(hù)腦神經(jīng)的作用[15]；梔子的活性成分具有抗焦慮活性及神經(jīng)保護(hù)作用[16]。

3.2 腦卒中向PSD、PSA、VaD演化過程中的表征變化趨勢(shì) 在本研究中觀察到，卒中模型組大鼠在術(shù)后3周時(shí)宏觀表征出現(xiàn)分化，部分大鼠倦臥、精神狀態(tài)萎靡、對(duì)外界刺激反應(yīng)性下降，同時(shí)可見部分大鼠攻擊行為較前增加。這與前期研究中精神癥狀組群階段具有相同表現(xiàn)。此外，研究結(jié)果可見腦卒中向PSD、PSA、VaD發(fā)展演化過程中，大鼠的宏觀表征變化趨勢(shì)確有不同。

卒中大鼠向PSD演變過程中，首先出現(xiàn)明顯的易激惹表現(xiàn)，如束縛及夾尾時(shí)反抗、嘶叫、毛須豎立、竄叫不安，抓取時(shí)呈現(xiàn)站立攻擊姿態(tài)、反抗激烈，而后攻擊性、對(duì)外界刺激反應(yīng)性、活動(dòng)度均逐漸降低，至應(yīng)激結(jié)束后，表現(xiàn)為少動(dòng)、蟄伏于鼠籠角落，修飾行為少，對(duì)外界刺激反應(yīng)性低，形瘦，被毛結(jié)縷、無光澤，足底顏色偏紫，口鼻黯淡，舌色紫暗，舌下脈絡(luò)發(fā)紺。

卒中大鼠向PSA演變過程中，可見攻擊性行為、探究性行為明顯增加，而后出現(xiàn)修飾行為減少。至空瓶應(yīng)激結(jié)束后，PSA大鼠表現(xiàn)為攻擊性高、探究性高，抓取時(shí)嘶叫、反抗激烈，修飾行為少，形瘦，豎毛，糞便粒小色黑質(zhì)硬。口鼻黯淡，舌紅少津。

卒中大鼠向VaD演變過程中，呈活動(dòng)度、精神狀態(tài)、反應(yīng)性逐漸下降趨勢(shì)，至術(shù)后4周，表現(xiàn)為自主活動(dòng)少，行動(dòng)較遲緩，精神狀態(tài)差，倦臥，對(duì)外界刺激興奮性低，被毛色白欠順滑。偶有稀便?？诒巧园?，舌潤澤，舌色淡紅。

3.3 益腎調(diào)氣方藥的干預(yù)作用及卒中后精神疾病的“病證結(jié)合”探索 動(dòng)物模型是中醫(yī)藥基礎(chǔ)研究的橋梁和重要載體，建立同時(shí)具有西醫(yī)疾病病理和中醫(yī)證候特點(diǎn)的“病證結(jié)合”動(dòng)物模型是中醫(yī)藥研究中亟需解決的問題，并已逐漸成為中醫(yī)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型發(fā)展的新方向。腎虛肝郁證是中醫(yī)腎虛證與肝郁證的復(fù)合證，具有腎虛、肝郁的加和內(nèi)涵。本研究結(jié)果可見，各組大鼠具有不同程度的自主活動(dòng)減少、抓取反抗、對(duì)外界刺激興奮性低、精神萎靡、泄瀉、脫毛等表現(xiàn)，與《中醫(yī)診斷學(xué)》中關(guān)于腎虛及肝郁證的描述“精神萎靡、久瀉不止、發(fā)脫、情志抑郁、脅肋脹痛、急躁易怒”等相符合。除此之外，PSD、PSA、VaD模型大鼠宏觀表征也不盡相同，各模型具有諸多特異性表征，提示各模型腎虛和肝郁的偏重有所不同。PSD大鼠活動(dòng)度低、精神狀態(tài)差、舌色紫暗、舌下脈絡(luò)發(fā)紺，提示疾病證候偏重于肝郁；PSA大鼠攻擊性高、抓取反抗激烈、舌紅少津，提示偏重于肝郁化火；VaD大鼠活動(dòng)度低、精神萎靡、時(shí)有稀便、舌淡，其證候類型偏重于腎虛。在應(yīng)用益腎調(diào)氣中藥頤腦解郁方后，各模型大鼠在行為活動(dòng)、精神狀態(tài)、被毛色澤、糞便情況及體重等方面均有不同程度的改善，揭示了益腎調(diào)氣方藥對(duì)治療腦卒中及卒中后精神疾病的有效性，并從藥物反證的角度進(jìn)一步驗(yàn)證了腎虛肝郁的證候模型。

本研究從動(dòng)物宏觀表征入手，對(duì)腦卒中及卒中后精神疾患的“病證結(jié)合”進(jìn)行了初步探索，但尚缺乏客觀指標(biāo)的佐證，在下一步的研究中，可以運(yùn)用現(xiàn)代檢測(cè)指標(biāo)進(jìn)一步印證中醫(yī)證候。就目前而言，明確的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和公認(rèn)的評(píng)價(jià)方法，需要我們?cè)谝院蟮难芯恐胁粩嗝骱屯晟啤?/p>

綜上所述，本研究初步驗(yàn)證卒中后精神疾病在其演變過程中具有腎虛肝郁的共同病機(jī)，益腎調(diào)氣方藥頤腦解郁方對(duì)缺血性腦卒中及卒中后精神疾病具有一定療效，并為腦卒中、卒中后精神疾病的“病證結(jié)合”研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。