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    4種因子對玫瑰紅紅球菌XH2氨氮去除效果的影響*

    2018-12-19 08:19:58田雅潔曹煜成胡曉娟黃小帥許云娜李卓佳文國樑
    漁業(yè)科學進展 2018年6期

    田雅潔 曹煜成, 胡曉娟 黃小帥 徐 煜 許云娜 李卓佳,3 文國樑,

    ?

    4種因子對玫瑰紅紅球菌XH2氨氮去除效果的影響*

    田雅潔1曹煜成1,2胡曉娟2黃小帥2徐 煜2許云娜2李卓佳2,3文國樑1,2①

    (1. 水產科學國家級實驗教學示范中心 上海海洋大學 上海 201306;2. 中國水產科學研究院南海水產研究所 廣東省漁業(yè)生態(tài)環(huán)境重點實驗室 農業(yè)農村部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點實驗室 廣州 510300;3. 南海生物資源開發(fā)與利用協(xié)同創(chuàng)新中心 廣州 510275)

    菌株XH2是從蝦池養(yǎng)殖中后期(50 d)水體環(huán)境中篩選的1株具有氨氮去除功能的菌株,經16S rDNA測序和Biolog生化鑒定,該菌株為玫瑰紅紅球菌()。分析發(fā)現(xiàn),該菌株在鹽度為5~45、pH為6.0~9.0、溫度為15℃~45℃、通氣量為1~2 L/min的條件下生長良好,菌量最高可達1.03×109cells/ml。在鹽度為25~45、pH為6.0~9.0、溫度為15℃~30℃、通氣量為1~ 2 L/min的條件下,菌株對氨氮的去除效果顯著(<0.05),在第1~3天對培養(yǎng)液中氨氮的最高去除率可達90.0%~100.0%,而各實驗組中,亞硝酸鹽氮濃度無明顯變化。結果顯示,菌株XH2對鹽度、pH、溫度等主要環(huán)境因子具有良好的適應性,與大部分水產養(yǎng)殖池塘水體的鹽度、溫度、pH變動區(qū)間大體一致;其對水體氨氮的去除效果良好,可作為養(yǎng)殖池塘水體氨氮防控菌劑產品研發(fā)的備選菌株。

    玫瑰紅紅球菌;氨氮;理化因子

    半集約化、集約化養(yǎng)殖日益受到關注(曹煜成等, 2006),該模式下水體環(huán)境主要依賴人工調控,水體生物多樣性復雜程度低(殷汝新等, 2015; 王善龍等, 2016; 郗建云等, 2016; 李莎莎等, 2017),有害物質容易大量積累(李卓佳等, 2010),控制不當容易引起水質惡化。其中,氨氮的過量積累對魚、蝦等水產動物具有嚴重的毒害作用(董玉波等, 2011; 周平, 2013),其脂溶性強,可透過細胞膜擾亂水產動物正常代謝活動,抑制其生長發(fā)育,損傷機體的抗病或抗逆機能,甚至導致死亡(何玉英等, 2016)。目前,對養(yǎng)殖水體氨氮的去除方法主要有物理、化學和生物3種,相比而言,生物方法利用微生物的生理代謝機制去除水體中的氨氮,具有環(huán)境友好,不易產生二次污染等優(yōu)點(張峰峰等, 2014; 王磊等, 2016)。研究表明,對氨氮具有去除功效的微生物有芽孢桿菌()(匡群等, 2013)、糞產堿桿菌()(劉芳芳等, 2010)、變形桿菌()(張慶華等, 2007)和假單胞菌()(張峰峰等, 2014)等。

    紅球菌()作為水體環(huán)境中的常見微生物,具有代謝多樣性的特點,能有效去除多種化合物(孫艷等, 2004)。當前,對紅球菌功能的研究主要集中在生物脫硫(Kirkwood, 2007),石油污染修復(楊智等, 2015),污水處理(Jorge, 2001),降解有機農藥、有機腈、霉菌毒素(許育新等, 2004; Coady, 2015; Cserháti, 2013)等方面。同時,紅球菌可以作為某些水產養(yǎng)殖動物的益生菌(Sharifuzzaman, 2018; Boutin, 2013; 鄺金媚等, 2010),提供水產養(yǎng)殖動物必須的類胡蘿卜素(鄭曉冬等, 2000)。近年來研究表明,紅球菌對氨氮也有一定的去除效果,這些紅球菌主要由油田外排污水(李沛霖, 2006)、土壤(張光亞等, 2003)、養(yǎng)豬廠的廢水(張智超等, 2017)、污水處理廠的活性污泥(白志輝等, 2013)等非養(yǎng)殖水體中篩出。目前,具有氨氮去除功能的紅球菌在水產養(yǎng)殖池塘中的篩選、氨氮去除機理、環(huán)境適應性及應用方面還少有報道。

    本研究采用了前期從蝦池養(yǎng)殖中后期(50 d)水體環(huán)境中篩選獲得的1株土著菌株XH2,已初步證實具有氨氮去除功效,經鑒定為玫瑰紅紅球菌(),并對其在不同鹽度、pH、溫度、通氣量條件下的生長和氨氮去除效果進行實驗,以期了解上述4種因子對菌株XH2生長及氨氮去除效果的影響,確定其適宜生長并有較好氨氮去除效果的條件,為養(yǎng)殖水體氨氮去除的實際應用提供有效菌源和技術方法。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 菌株 紅球菌XH2由中國水產科學研究院南海水產研究所提供,該菌株從對蝦集約化養(yǎng)殖中后期(50 d)水體中分離獲得,該水體環(huán)境的鹽度為23~25,pH為7.3~8.5,溫度為28℃~30℃。該菌株已于中國典型培養(yǎng)物保藏中心進行了菌種保藏,保藏編號為CCTCCM2017437。

    1.1.2 培養(yǎng)基 光合菌改良液體培養(yǎng)基(楊啟霞等, 2009; 楊鶯鶯等, 2003、2009):NH4Cl1 g,三水合乙酸鈉3 g,酵母膏1 g,MgSO40.2 g,KH2PO40.5 g,生長因子1 ml,蒸餾水1000 ml。其中,生長因子:CaCl25 g,MnSO40.25 g,F(xiàn)eSO40.5 g,谷氨酸0.02 g,蒸餾水100 ml。光合菌改良固體培養(yǎng)基平板:在上述培養(yǎng)基的基礎上添加瓊脂粉20 g/L。菌株活化種子液:在光合菌改良液體培養(yǎng)基的基礎上,將NH4Cl的添加量改為0.068 g/L。分析培養(yǎng)液:在光合菌改良液體培養(yǎng)基的基礎上額外添加NaNO20.134 g/L,同時,將NH4Cl的添加量改為0.068 g/L,使該培養(yǎng)液初始氨氮和亞硝酸鹽氮濃度分別達到約24和20 mg/L。

    1.2 菌株鑒定

    1.2.1 16S rDNA序列分析 細菌總DNA提取采用TIANGEN公司的TIANamp Bacteria DNA Kit產品。依照產品說明書提取菌株XH2的DNA后,對其16S rDNA片段進行PCR擴增。16S rDNA擴增采用的細菌通用引物為:8F(5¢-AGAGTTTGATCCTGGCT-CAG-3¢),1492R(5¢-GGTTACCTT GTTACGACTT-3¢)。PCR反應體系采用50 μl體系,其中加入2 μl模板DNA。PCR反應條件:95℃ 4 min;95℃ 1 min, 48℃ 1 min,72℃ 2 min,30個循環(huán);72℃ 10 min。擴增產物通過1.0%的瓊脂糖凝膠電泳檢測后,送生工生物工程(上海)股份有限公司測序。測序結果用DNAStar軟件包中的Editseq軟件拼接,在NCBI數(shù)據(jù)庫BLAST檢索中進行核酸序列同源性比較,確定菌株的種屬。

    1.2.2 Biolog系統(tǒng)細菌鑒定 采用Biolog微生物全自動分析儀Microlog 3 (Microstation)及Biolog MicroLog 4.2軟件進行菌株的生化反應特性鑒定,選用Biolog GP2微孔鑒定板,按照Biolog自動微生物分析系統(tǒng)的說明書操作,將所獲結果與數(shù)據(jù)庫進行比對,確定菌株的種屬。

    1.3 不同因子對菌株XH2生長及其氨氮去除效果的影響

    將保存的菌株XH2于光合菌固體培養(yǎng)基平板上活化,于實驗開始前挑取單菌落,接入100 ml菌株活化種子液中(裝于250 ml錐形瓶內)。設不同梯度的鹽度、pH、溫度和通氣量實驗組,各實驗組均使用1000 ml錐形瓶,并向其內添加600 ml分析培養(yǎng)液。實驗開始時,將等體積的菌株活化種子液接入各實驗組的分析培養(yǎng)液中,各實驗組初始接菌量均為106cells/ml,每組設3個平行。各實驗組初始氨氮濃度約為24 mg/L,亞硝酸鹽氮濃度約為20 mg/L,依照《海洋監(jiān)測規(guī)范》第4部分:海水分析(GB 17378.4- 2007)的方法,以靛酚藍分光光度法和萘乙二胺分光光度法分別測定實驗過程中氨氮和亞硝酸鹽氮的濃度變化。用血球計數(shù)板在光學顯微鏡下計數(shù),測定菌量變化。

    1.3.1 鹽度 實驗系統(tǒng)的鹽度梯度為5、15、25、35、45,對照組(鹽度為25)不加菌株XH2,通過添加不同劑量的NaCl對鹽度進行調節(jié)。接菌后放入搖床,pH為6.0,30℃,200 r/min振蕩至實驗結束,每天用NaOH、HCl調節(jié)分析培養(yǎng)液的pH值,保持在6.0左右。于第0、1、2、3、4、5、9天取樣檢測其氨氮、亞硝酸鹽氮含量,同時測定菌量。

    1.3.2 pH 實驗系統(tǒng)的pH梯度為4.5、6.0、7.5、9.0、10.5,對照組(pH為6.0)不加菌株XH2。鹽度為25,接菌后放入搖床,30℃,200 r/min振蕩至實驗結束,每天測定分析培養(yǎng)液pH并進行調節(jié),使各實驗組pH維持在初始水平。取樣時間以及測定指標同1.3.1。

    1.3.3 溫度 實驗系統(tǒng)的溫度梯度為5℃、15℃、25℃、35℃、45℃,對照組(溫度為30℃)不加菌株XH2。鹽度和pH分別設為25和7.5。接菌后放入搖床,30℃,200 r/min振蕩至實驗結束。取樣時間以及測定指標同1.3.1。

    1.3.4 通氣量 以2 L發(fā)酵罐(Biostat B型自控通氣發(fā)酵罐)實驗系統(tǒng)為測試平臺,將通氣量設為高、低2組(2和1 L/min),實驗前,需矯正發(fā)酵罐溶氧電極和pH電極,該實驗系統(tǒng)可自動記錄發(fā)酵罐中溶氧量的變化以及自動調節(jié)罐內分析培養(yǎng)液的溫度和pH值。實驗過程中的pH為7.5、鹽度為25、溫度為30℃, 轉子轉速為200 r/min,在第0、1、2、3、4、5天進行取樣,測定指標同1.3.1。

    1.4 數(shù)據(jù)分析

    采用SPSS 20.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進行單因素方差分析(One-way ANOVA),使用Duncan檢驗方法,顯著水平設為<0.05。氨氮去除率的計算:氨氮去除 率=(氨氮初始濃度?培養(yǎng)后氨氮剩余濃度)/氨氮初始濃度×100%。

    2 結果

    2.1 菌株XH2的鑒定

    以16S rDNA序列在NCBI數(shù)據(jù)庫中進行核酸數(shù)據(jù)比對,結果顯示,XH2與紅球菌屬相似度為100%,初步判定菌株XH2為紅球菌屬。在Biolog細菌鑒定系統(tǒng)中,與XH2相似度最高的菌株為玫瑰紅紅球菌,其PROB為98%、SIM為0.617、DIST為5.93。綜合以上鑒定結果,菌株XH2定為玫瑰紅紅球菌。

    2.2 鹽度對菌株XH2生長及其氨氮去除效果的影響

    除鹽度為45實驗組外,其他各組菌株均在第 1天后進入對數(shù)生長期,第3天后,菌量均達到 108cells/ml水平,最高為3.02×108cells/ml(圖1A)。實驗過程中,對照組氨氮濃度無明顯變化(>0.05),第2天時,鹽度為5、15和25實驗組的氨氮濃度大幅降低,氨氮去除率分別達到79.2%、79.5%和90.3%,顯著優(yōu)于其他各組(<0.01),而后,此3組的氨氮濃度始終穩(wěn)定保持在較低水平;第3天時,鹽度為35和45實驗組的氨氮濃度亦明顯降低(<0.05),到第 4天,其氨氮去除率達到100.0%(圖1B)。然而,菌株XH2不能有效去除環(huán)境中的亞硝酸鹽氮(圖1C),在 9 d的監(jiān)測過程中,各實驗組和對照組分析培養(yǎng)液中的亞硝酸鹽氮濃度均無顯著變化(>0.05)。

    圖1 不同鹽度條件下XH2的菌量(A)、分析培養(yǎng)液中氨氮(B)、亞硝酸鹽氮(C)的含量變化

    S:鹽度;對照:鹽度25,不加菌株XH2;

    氨氮初始濃度:24 mg/L;亞硝酸鹽氮初始濃度:20 mg/L,下同

    S: Salinity; Control: Salinity 25 without strain XH2;

    Initial ammonia nitrogen concentration: 24 mg/L; Initial nitrite nitrogen concentration: 20 mg/L, the same as below

    2.3 pH對菌株XH2生長及其氨氮去除效果的影響

    菌株XH2在pH為6.0~9.0條件下均能良好生長,于2 d內菌量即可從106cells/ml增長至108cells/ml,其中,pH為7.5時,菌株生長最快;當初始pH為4.5或10.5時,菌株生長受到明顯抑制(圖2A)。實驗過程中,對照組和pH為4.5實驗組的氨氮濃度始終無明顯變化(>0.05);pH為6.0、7.5和9.0實驗組的氨氮濃度總體呈明顯下降趨勢,pH為10.5實驗組的氨氮濃度略有降低,其中,pH為6.0和7.5實驗組的氨氮濃度在第2天分別大幅降低至0.26和0 mg/L,此后,pH為6.0、7.5、9.0實驗組的氨氮濃度穩(wěn)定在較低水平(圖2B)。就亞硝酸鹽氮的濃度而言,對照組和各實驗組均未呈現(xiàn)下降趨勢,在14.97~24.31 mg/L的范圍內小幅波動(圖2C)。

    2.4 溫度對菌株XH2生長及其氨氮去除效果的影響

    菌株XH2在溫度為5℃時,生長受到明顯抑制,在溫度為15℃~45℃時,均能良好生長,2~3 d時,其菌量可從初始的106cells/ml增長至108cells/ml,并一直維持在該水平(圖3A)。對照組和溫度為5℃實驗組的氨氮濃度無明顯變化(>0.05),其他各實驗組的氨氮濃度總體呈下降趨勢。其中,溫度為30℃、35℃和45℃實驗組的氨氮濃度在第2天時降至最低,其氨氮去除率分別為100.0%、93.8%和70.1%;溫度為15℃、25℃實驗組則在第3天降至最低,其氨氮去除率為99.6%、97.7%;其后,實驗組的氨氮濃度均略有升高,但仍遠低于對照組(圖3B)。就亞硝酸鹽氮的濃度而言,對照組和各實驗組在15.97~22.57 mg/L的范圍內小幅波動(圖3C)。

    圖2 不同pH條件下XH2的菌量(A)、分析培養(yǎng)液中氨氮(B)、亞硝酸鹽氮(C)的含量變化

    對照:pH 6.0,不加菌株XH2

    Control: pH 6.0 without strain XH2

    圖3 不同溫度條件下XH2的菌量(A)、分析培養(yǎng)液中氨氮(B)和亞硝酸鹽氮(C)的含量變化

    T:溫度;對照:溫度30℃,不加菌株XH2

    T: Temperature; Control: Temperature 30℃ without strain XH2

    2.5 通氣量對菌株XH2生長及其氨氮去除效果的影響

    通氣量為1 L/min時,菌株在24 h內進入對數(shù)生長期,并于36 h后進入穩(wěn)定期,菌量最高可達1.03× 109cells/ml,而培養(yǎng)液中的溶氧含量也相應在2 h時達到最低值,隨后不斷升高并穩(wěn)定在90.0%左右;通氣量為2 L/min時,菌株12~36 h進入對數(shù)生長期,60 h后進入穩(wěn)定期,稍遲于上述實驗組,菌量最高可達6.78×108cells/ml (圖4A、圖4B)。菌株在2實驗組中均表現(xiàn)出對氨氮良好的去除效果,低通氣量組在第1天氨氮去除率可達98.6%,高通氣量組第2天的氨氮去除率為98.2%,此后,培養(yǎng)液中的氨氮濃度始終維持在較低水平(圖4C)。但2個實驗組的亞硝酸鹽氮濃度一直維持在13.63 mg/L以上的較高水平(圖4D)。

    圖4 不同通氣量條件下XH2的菌量(A)和分析培養(yǎng)液中溶氧(B)、氨氮(C)、亞硝酸鹽氮(D)的含量變化

    3 討論

    現(xiàn)有報道的紅球菌多篩選自土壤、工業(yè)廢水、畜禽養(yǎng)殖廢棄物等非水產養(yǎng)殖水體環(huán)境。黃鈞等(2010)和張智超等(2017)從活性污泥及畜禽養(yǎng)殖排出物中分離出紅球菌菌株,它們6 d內的氨氮去除率分別達到68.9%和94.4%;司文攻等(2011)從土壤獲得的1株紅球菌,其3 d內氨氮去除率為65.0%。相較上述紅球菌,菌株XH2為養(yǎng)殖池塘土著菌,其在原有環(huán)境中的適應性和競爭力更強,且對原有生態(tài)環(huán)境相對更為安全(何沅濱等, 2015)。在養(yǎng)殖水體環(huán)境中篩選具備生態(tài)適應性強、生長性能好、水質凈化效率高的菌株,并結合水產養(yǎng)殖與漁業(yè)微生物制劑的生產實際開展針對性研究,以此研發(fā)的微生物制劑方能更切合水產養(yǎng)殖產業(yè)的實際需求,才能更有效地促進其在養(yǎng)殖水體原位凈化技術的規(guī)模化應用,助力零換水生態(tài)型養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。本研究選擇以蝦池養(yǎng)殖中后期(50 d)水體環(huán)境為基礎,從中篩選具有高效氨氮去除功能的土著菌株,進而獲得玫瑰紅紅球菌XH2。故從目的性、產業(yè)應用預期目標等方面而言,該研究所獲菌株較以往研究定位更明確,更易滿足水產養(yǎng)殖水體凈化所需。

    鹽度、溫度、pH和通氣量是水產養(yǎng)殖中的幾個重要指標。本研究通過檢測分析培養(yǎng)液中菌量、氨氮及亞硝酸鹽氮濃度的變化,進而了解了上述4個因子對菌株生長和氨氮去除效果的影響。菌株XH2在鹽度為5~45,pH為6.0~9.0,溫度為15℃~45℃及通氣量為1~2 L/min的條件下均能生長良好,在較低鹽度(5~25)和較高溫度(25℃~45℃)下生長更優(yōu)。另一方面,菌株XH2在鹽度為5~15時,最高氨氮去除率約為79.0%,而鹽度為25~45時,最高氨氮去除率在90.0%以上,說明菌株XH2對較高鹽度水體環(huán)境的氨氮去除效果更佳。在pH為6.0~9.0、溫度為15℃~ 35℃時,菌株XH2對氨氮的最高去除率在93.0%以上;當pH為4.5和10.5、溫度為5℃時,氨氮去除效果不明顯,溫度為45℃時,最高氨氮去除率僅為77.1%,表明其在中性偏堿的條件下有較好的氨氮去除效果,而溫度過高或過低均會弱化其氨氮去除效果。在通氣量為1和2 L/min的條件下,菌株XH2的最高氨氮去除率均在98.0%以上,但其在低通氣量組時進入對數(shù)生長期以及氨氮濃度大幅下降的時間均早于高通氣量組。因此,在實際生產中可采用低通氣量來擴培菌株XH2,在節(jié)約資源的同時不會影響其生長和氨氮去除效果。

    在水產養(yǎng)殖生產中,適宜的水體鹽度、pH、溫度的覆蓋區(qū)間分別為0~38.1、6.9~8.7和15℃~35℃,在不同的養(yǎng)殖品種和養(yǎng)殖模式之間會存在一定的差異(李卓佳等, 2007)??梢?,菌株XH2對鹽度、pH、溫度的適應范圍與大部分水產養(yǎng)殖池塘水體的變化區(qū)間相吻合。通常具有氨氮去除功能的菌株環(huán)境適應范圍為鹽度0~35、pH 6.0~9.0和溫度15℃~40℃,該條件下菌株對氨氮的去除率為40.0%~98.0%(李存玉等, 2017; 胡修貴等, 2013)。綜合來看,菌株XH2與上述報道相比大體一致,而其對氨氮的去除效果更優(yōu)。

    微生物轉化氨氮為多種形態(tài)的氮的形式大體分為3類。其一,氨氮被氧化為亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮等;其二,氨氮被微生物同化吸收以合成其生長所需含氮物質;其三,氨氮被轉化為含氮氣體,如NOX、N2等(王弘宇等, 2009)。黃雪嬌等(2016)發(fā)現(xiàn)了一株具有氨氮去除功效的光合菌,培養(yǎng)過程中并未發(fā)現(xiàn)亞硝酸鹽氮及硝酸鹽氮積累,其認為該菌通過同化吸收來去除氨氮。劉志云等(2016)篩選出一株能去除氨氮的粉狀畢赤酵母菌(),其氨氮去除途徑為同化吸收及轉化為硝酸鹽氮。當前,鮮有關于紅球菌氨氮去除機制的報道(張智超等, 2017)。本研究對各實驗組中菌株XH2的分析培養(yǎng)液進行了菌量、氨氮和亞硝酸鹽氮的檢測。各實驗組中菌株XH2菌量的增加與氨氮去除同步,且氨氮濃度大幅下降與菌株對數(shù)生長期吻合,同時,亞硝酸鹽氮的濃度沒有明顯變化,推測氨氮去除過程主要發(fā)生在菌株對數(shù)生長時期,大部分氨氮被菌株同化,用于其自身生長繁殖(陳昢圳等, 2009; 張培玉等, 2010)。后期氨氮的小幅回升,可能是由于分析培養(yǎng)液中營養(yǎng)不足,菌株進入衰亡期,菌體自溶釋放出的氨氮比菌株去除的氨氮多(李泳洪等, 2016)。由于只檢測了氨氮和亞硝酸鹽氮,未檢測其他氮元素指標,并不能明確菌株XH2是否能轉化成其他形式的氮,有待進一步的實驗來證實。

    總體而言,本研究從蝦池養(yǎng)殖水體環(huán)境中獲得的土著玫瑰紅紅球菌XH2對鹽度、pH、溫度的適應性良好,且能有效去除水體環(huán)境中的氨氮,可作為養(yǎng)殖池塘水體氨氮防控菌劑產品研發(fā)的備選菌株。當前,已明確了實驗室條件下4種因子對菌株XH2氨氮去除效果的影響,之后將會對該菌株的氨氮去除機制及其對養(yǎng)殖池塘水體其他生物群落的影響、菌劑規(guī)?;a工藝、在養(yǎng)殖生產中的應用技術優(yōu)化等做進一步的研究。

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    Effects of Four Physical and Chemical Factors on the Ammonia Nitrogen Removal ofXH2

    TIAN Yajie1, CAO Yucheng1,2, HU Xiaojuan2, HUANG Xiaoshuai2, XU Yu2, XU Yunna2, LI Zhuojia2,3, WEN Guoliang1,2①

    (1. National Demonstration Center for Experimental Fisheries Science Education, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306;2. South China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences; Key Laboratory of Fishery Ecology and Environment, Guangdong Province; Key Laboratory of South China Sea Fishery Resources Exploitation & Utilization, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Guangzhou 510300; 3. South China Sea Bio-Resource Exploitation and Utilization Collaborative Innovation Center, Guangzhou 510275)

    The accumulation of ammonia nitrogen in water is highly toxic to cultured aquatic animals. The microbiological method has received widespread attention as an efficient way to remove ammonia nitrogen in aquaculture because of its high efficiency and environment-friendliness. The genusis a very diverse group of bacteria that can remove a variety of compounds, including ammonia nitrogen. Here, the strain XH2, which potently removes ammonia nitrogen, was isolated from aquaculture water during the middle to late (50 d) phase of shrimp cultivation. Its ecological adaptability and feasibility of use as a probiotic to improve aquaculture water quality was evaluated. According to the results of 16S rDNA sequencing and Biolog identification, XH2 was identified as. Its growth performance and ammonia nitrogen removal efficacy were studied under different salinities (5, 15, 25, 35, and 45), pH (4.5, 6.0, 7.5, 9.0, and 10.5), temperatures (5, 15, 25, 35, and 45℃), and aeration levels (1~2 L/min). The results showed that XH2 had high adaptability to varied ranges of salinity (5~45), pH (6.0~9.0), temperature (15℃~45℃), and ventilation (1~2 L/min), with a maximum observed cell amount of 1.03×109cells/ml. Specifically, the concentration of ammonia nitrogen in medium was reduced by 90.0%~100.0% during 1~3 d under the following conditions: salinity 25~45, pH 6.0~9.0, temperature 15℃~30℃ and ventilation volume 1~2 L/min (<0.05). There was no significant difference in nitrite concentrations. Taken together, these data show that the XH2 strain possesses the physico-chemical properties of a suitable alternative in terms of salinity, pH, temperature, and ventilation, which can be applied to most aquaculture ponds for the prevention and control of ammonia nitrogen.

    ; Ammonia nitrogen; Physical and chemical factors

    WEN Guoliang, E-mail: guowen66@163.com

    田雅潔, 曹煜成, 胡曉娟, 黃小帥, 徐煜, 許云娜, 李卓佳, 文國樑. 4種因子對玫瑰紅紅球菌XH2氨氮去除效果的影響. 漁業(yè)科學進展, 2018, 39(6): 164–172

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    * 中國水產科學研究院基本科研業(yè)務費(2017HY-ZD0501)、現(xiàn)代農業(yè)(蝦蟹)產業(yè)技術體系專項(CARS-48)、國家自然科學基金(31602167)、廣東省漁港建設和漁業(yè)發(fā)展專項(B201601-02)、中國水產科學研究院南海水產研究所中央級公益性科研院所基本科研業(yè)務費專項資金項目(2016TS03)和廣東省科技計劃(2017A040405001)共同資助[This work was supported by Central Public-Interest Scientific Institution Basal Research Fund, CAFS (2017HY-ZD0501), China Agriculture Research System (CARS-48), National Natural Science Foundation of China (31602167), Special Funds for Fishery Harbour Construction and Fishery Development of Guangdong Province (B201601-02), Central Public-Interest Scientific Institution Basal Research Fund, South China Sea Fisheries Research Institute, CAFS (2016TS03), and Guangdong Province Science and Technology Plan Project (2017A040405001)]. 田雅潔,E-mail: tiantian_1029@163.com

    文國樑,副研究員,E-mail: guowen66@163.com

    2017-11-01,

    2017-12-22

    10.19663/j.issn2095-9869.20171101002

    Q178.1

    A

    2095-9869(2018)06-0164-09

    (編輯 馬璀艷)

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