• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    劍麻葉綠體基因組編碼序列密碼子的使用特征

    2018-12-14 10:37:32龍凌云王麗萍覃劍峰危丹妮蔡中全
    關(guān)鍵詞:龍舌蘭劍麻同義

    金 剛, 覃 旭, 龍凌云, 王麗萍, 覃劍峰, 危丹妮, 陳 濤, 蔡中全

    (1.廣西壯族自治區(qū)亞熱帶作物研究所,廣西 南寧 530001;2.廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院,廣西 南寧 530004)

    生物體遺傳密碼的功能完整性是由同義密碼子維持的,它提供了基因表達(dá)和蛋白質(zhì)進(jìn)化之間的聯(lián)系[1].大量研究表明,不同物種、同一物種的不同基因在同義密碼子的使用偏好性上存在較大差異[2].這種偏好性保證了最優(yōu)密碼子可以與豐度最大的tRNA基因的反密碼子配對(duì).雖然同義密碼子使用偏好對(duì)蛋白質(zhì)序列沒有直接影響,但由于密碼子使用偏好已被證明是一種重要的進(jìn)化力量,因此它可能影響蛋白質(zhì)產(chǎn)物和細(xì)胞過程[3].

    在植物分子進(jìn)化研究中,葉綠體基因組因分子量較小、拷貝數(shù)較多且許多基因的功能已被注釋而備受生物學(xué)家重視[4].葉綠體基因組中的翻譯過程與單細(xì)胞生物相似,表明其同義密碼子的使用可能與大腸桿菌相同[5].完整的葉綠體基因組可以為認(rèn)識(shí)進(jìn)化和自然選擇提供機(jī)理性的啟示,并已在認(rèn)知物種和葉綠體進(jìn)化機(jī)制上做出重大貢獻(xiàn)[6].

    劍麻又名龍舌蘭麻,是龍舌蘭科(Agavaceae)所屬單子葉植物的統(tǒng)稱.龍舌蘭屬是該科中最有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的一個(gè)屬,包含257個(gè)種,被廣泛應(yīng)用于纖維加工、釀酒、觀賞等領(lǐng)域.東非坦桑尼亞劍麻試驗(yàn)站于1935—1957年將藍(lán)劍麻與假菠蘿麻雜交,并從回交后代中選育出了高產(chǎn)且抗寒性好的龍舌蘭栽培種H.11648.其生命周期可產(chǎn)葉560~600片,出纖率高且葉緣無刺,現(xiàn)被廣泛種植于華南地區(qū)[7].近年來,現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)在龍舌蘭屬植物中得以廣泛應(yīng)用,如抗旱性的轉(zhuǎn)錄組研究[8],以及屬內(nèi)分類的分子標(biāo)記研究等[9].但未見有關(guān)于龍舌蘭屬植物葉綠體基因組密碼子生物學(xué)和基因組進(jìn)化的研究報(bào)道.對(duì)劍麻H.11648葉綠體基因組密碼子使用偏好性的詳盡分析,有利于更深入地揭示龍舌蘭屬植物的系統(tǒng)進(jìn)化地位.本研究系統(tǒng)地分析了劍麻H.11648葉綠體基因組編碼序列的密碼子使用特征,探討導(dǎo)致其密碼子偏好性發(fā)生的重要因素.

    1 材料與方法

    1.1 基因序列

    完整的劍麻H.11648葉綠體基因組序列來源于高通量測(cè)序結(jié)果,GenBank登錄號(hào)為MG642741.剔除重復(fù)基因序列和長(zhǎng)度小于300 bp的編碼序列,最終用于分析的編碼序列有52條.

    1.2 方法

    1.2.1 中性繪圖分析 分別統(tǒng)計(jì)密碼子3個(gè)位置上堿基的GC含量,密碼子第1位、第2位和第3位GC含量循序表示為GC1、 GC2和GC3.以GC12為縱坐標(biāo),以GC3為橫坐標(biāo)作圖,其中GC12定義為GC2和GC1的平均值.同義密碼子第3位堿基的GC含量表示為GC3s.

    1.2.2 相對(duì)同義密碼子使用度分析 利用CodonW 軟件對(duì)劍麻H.11648葉綠體基因組的52個(gè)編碼基因的相對(duì)同義密碼子使用度(relative synonymous codon usage, RSCU)進(jìn)行分析.

    1.2.3 Nc-plot 繪圖分析 為檢測(cè)堿基組成對(duì)密碼子偏好性的影響,以有效密碼子數(shù)(Nc值)為縱坐標(biāo),GC3s為橫坐標(biāo),作二維散點(diǎn)圖;以密碼子偏好性僅由堿基組成決定時(shí)的預(yù)期值作為標(biāo)準(zhǔn)曲線,其計(jì)算公式為:Nc=2+GC3s+29/[GC3s2+(1-GC3s)2].

    1.2.4 奇偶偏好分析 PR2(parity rule 2, PR2)分析,為了避免密碼子第3位堿基的A/T或T/A和G/C或C/G的突變不均衡,僅選擇4種密碼子編碼的氨基酸,即絲氨酸、亮氨酸、脯氨酸、精氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、丙氨酸和甘氨酸.計(jì)算每個(gè)基因A3/(A3+T3)和G3/(G3+C3),分別作縱坐標(biāo)和橫坐標(biāo),以平面圖顯示各基因堿基組成[10].

    2 結(jié)果與分析

    2.1 密碼子使用的總體特征

    劍麻H.11648的52條編碼序列的總體GC含量為38.21%.GC1、GC2、GC3含量分別為46.03%、38.36%和30.22%.GC并非均勻地分布在密碼子的3個(gè)位置上,其呈現(xiàn)出的分布趨勢(shì)為GC1>GC2>GC3.

    有效密碼子數(shù)(Nc)其理論取值范圍為20~61,當(dāng)Nc值為20時(shí),表示每種氨基酸僅使用每組同義密碼子中的1個(gè);當(dāng)Nc值為61時(shí),表示各種同義密碼子的使用機(jī)會(huì)完全均等.劍麻葉綠體基因組編碼序列的Nc值分布于41.34~61.00,且均在41以上(表1).所有基因Nc值均大于40,可以判斷劍麻葉綠體基因密碼子偏好性較弱.劍麻H.11648葉綠體clpP基因的Nc值為61,其同義密碼子的使用沒有偏好性.

    表1 劍麻葉綠體基因組密碼子不同位置GC含量Table 1 GC content in different positions of codons in chloroplast coding sequences of H.11648

    續(xù)表1

    基因GC含量/%GCallGC1GC2GC3GC3s有效密碼子數(shù)個(gè)psbC44.3753.5946.4133.1229.4644.99rps1441.2545.5446.5331.6829.9041.92psaB41.4148.1643.1332.9328.5950.11psaA42.8852.0643.4133.1629.1450.21ycf339.6147.0640.0031.7629.4551.91rps438.1247.0338.6128.7127.4149.24ndhJ39.6247.1738.9932.7028.8658.38ndhK37.8942.7444.4426.5024.0050.48ndhC38.5750.4134.7130.5824.3258.79atpE43.2152.5941.4835.5632.5651.62atpB42.8856.6541.7330.2428.2748.30rbcL43.1757.1743.2429.1026.1248.63accD34.3938.6136.8327.7224.1246.35ycf440.1843.7842.1634.5930.2351.71cemA33.3340.0027.3932.6128.7053.86petA39.6754.2135.8328.9727.6249.87rps1834.9737.2542.1625.4923.2341.34rpl2037.5738.9842.3731.3629.2050.40clpP41.7958.5435.6131.2227.0861.00psbB44.3454.8146.7631.4327.6549.13petD38.8349.4739.3627.6624.0245.82rpoA36.2745.5934.7128.5327.1150.67rps1145.5558.7855.7322.1419.2046.15rps835.0939.8541.3524.0621.2641.41rpl1439.0255.2836.5925.2022.8846.87rpl1643.5550.3653.2827.0122.6642.00rps335.6047.0634.8424.8922.5442.70rpl2238.7342.8641.9031.4329.0056.26rpl244.6150.9149.4533.4531.7252.93ndhB38.1042.2739.9232.0928.3147.05rps740.6053.2145.5123.0820.6747.32ndhF32.7937.0136.0725.3021.2845.04ccsA32.9232.2038.7027.8622.9252.73ndhD36.9940.8436.2533.8629.3651.42ndhE35.2940.2032.3533.3329.9060.44ndhG33.3341.8134.4623.7320.7145.20ndhI34.6240.3336.4627.0724.7153.96ndhA36.2444.9638.6925.0721.9445.23ndhH37.6549.4936.5526.9021.8047.93ycf131.4336.8029.3428.1524.9448.70ycf238.1141.8535.3037.1834.6453.24

    GCall和GC1、GC2、GC3的相關(guān)性呈極顯著水平.GC1與GC2的相關(guān)性也達(dá)到極顯著水平, 但GC3與GC1、GC2的相關(guān)性均未達(dá)顯著水平(表2).表明劍麻H.11648葉綠體編碼基因密碼子第1位和第2位堿基組成比較相似,但與第3位堿基組成顯著不同.此外,有效密碼子數(shù)(Nc)與GC3的相關(guān)性達(dá)到極顯著水平,但與GC1、GC2之間的相關(guān)性未達(dá)到顯著水平,說明第3位上的堿基組成對(duì)密碼子偏好性影響顯著.

    2.2 中性繪圖分析

    中性繪圖顯示各基因坐標(biāo)點(diǎn)未沿對(duì)角線分布或落在對(duì)角線上(圖1).GC12分布于0.3307~0.5725,GC3分布于0.2214~0.3718.GC12和GC3的相關(guān)系數(shù)為0.067,雙尾檢驗(yàn)表明其相關(guān)性未達(dá)到顯著水平.回歸曲線斜率為0.0963.說明密碼子第1、2位與第3位堿基組成不相似,自然選擇對(duì)密碼子使用偏好性的影響較大,而其他因素(例如突變)可能對(duì)密碼子偏好性形成的影響較弱.

    表2 劍麻葉綠體基因組中各基因相關(guān)參數(shù)的相關(guān)性分析1)Table 2 Correlation analysis of parameters related to genes

    1)CC表示密碼子數(shù)目;GCall表示各基因GC總含量;**表示在0.01水平(雙側(cè))上顯著相關(guān);*表示在0.05水平(雙側(cè))上顯著相關(guān).

    2.3 Nc與GC3s的關(guān)聯(lián)分析

    圖1 中性繪圖分析Fig.1 Analysis of neutrality plot

    為了進(jìn)一步判斷選擇或突變等因素對(duì)劍麻葉綠體基因組密碼子偏好性形成的影響,以各基因Nc值為縱坐標(biāo),GC3s為橫坐標(biāo)繪制Nc-plot曲線.標(biāo)準(zhǔn)曲線反映了在突變壓力下的Nc和GC3s的函數(shù)關(guān)系.部分基因坐標(biāo)點(diǎn)沿標(biāo)準(zhǔn)曲線分布或落在標(biāo)準(zhǔn)曲線附近,說明Nc實(shí)際值和預(yù)期值接近,暗示了這些葉綠體基因的密碼子偏好性主要受到突變壓力影響;而另外一部分基因坐標(biāo)點(diǎn)偏離標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖2),說明Nc實(shí)際值和預(yù)期值之間相差較大,偏好性較強(qiáng),暗示堿基組成并不是這部分葉綠體基因密碼子偏好性形成的主要因素,自然選擇也起到重要作用.

    2.4 PR2-plot分析

    采用PR2-plot方法分析了劍麻H.11648葉綠體基因組各編碼序列由4種密碼子編碼的氨基酸家族中密碼子第3位嘧啶(T和C)以及嘌呤(A和G)之間的關(guān)系(圖3).結(jié)果表明,坐標(biāo)點(diǎn)并非均勻地分布于4個(gè)區(qū)域內(nèi),大多數(shù)基因分布于平面圖的左下方,說明在密碼子第3位A的使用頻率低于T,G的使用頻率低于C,即嘌呤使用頻率相對(duì)較低.假如密碼子使用偏好性僅受突變壓影響時(shí),則理論上4種堿基的使用頻率相等.而本研究中4種堿基的使用不均衡,暗示了劍麻H.11648葉綠體密碼子的使用偏好性除了受突變因素影響之外,還受到如選擇等其它因素的影響.

    圖2 Nc-plot分析Fig.2 Analysis of Nc-plot

    2.5 相對(duì)同義密碼子使用度分析

    利用CAI程序統(tǒng)計(jì)52條劍麻葉綠體CDS各密碼子出現(xiàn)次數(shù),再手動(dòng)計(jì)算RSCU值(表3).RSCU>1的密碼子多以A或T結(jié)尾,暗示以A或T結(jié)尾的密碼子出現(xiàn)頻率相對(duì)較高,這些是基因組偏愛的密碼子.而以G或C結(jié)尾的密碼子RSCU值多小于1,暗示以G或C結(jié)尾的密碼子出現(xiàn)的頻率較低,是基因組非偏愛的密碼子.劍麻葉綠體基因在終止密碼子的使用上偏好TAA.

    表3 劍麻葉綠體基因編碼序列的同義密碼子使用相對(duì)頻率Table 3 RSCU analysis of protein coding region in H.11648 chloroplast genome

    3 討論

    最佳密碼子有助于實(shí)現(xiàn)更快的翻譯速度和更高的準(zhǔn)確度.研究表明,同義密碼子的使用偏好性受多重因素影響,例如CpG島、基因組大小、基因長(zhǎng)度、基因表達(dá)水平、蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)和基因密度等[11,12].同義的三聯(lián)體密碼子產(chǎn)生這種偏好性的主要?jiǎng)恿κ亲匀贿x擇和突變[13].突變壓力對(duì)葉綠體基因組同義密碼子使用偏好性形成的重要性也已明確[14].然而,在植物和藻類中自然選擇也是同義密碼子使用變異的驅(qū)動(dòng)力[15].密碼子偏好反映了翻譯優(yōu)化中突變偏好與自然選擇的平衡[16].

    本研究中以劍麻H.11648葉綠體基因組中的52條蛋白編碼序列為研究對(duì)象,對(duì)其密碼子使用特征進(jìn)行了系統(tǒng)分析.劍麻H.11648葉綠體基因組密碼子第3位GC含量為30.22%,這與柿屬葉綠體基因組密碼子GC3含量(30.43%)接近[17].PR2-plot分析表明,劍麻H.11648葉綠體基因組密碼子第3位偏好使用嘧啶,該研究結(jié)果與前人對(duì)于棉花和糜子相關(guān)研究的結(jié)論類似[18,19].劍麻H.11648葉綠體基因組Nc值分布于41.34~61.00,表明密碼子偏好性較弱;GC12和GC3的相關(guān)性未達(dá)到顯著水平,表明選擇在此過程起的作用更大;密碼子第3位嘌呤出現(xiàn)頻率低于嘧啶,表明密碼子使用模式同時(shí)受到突變和選擇壓力的影響.劍麻H.11648葉綠體基因組密碼子的使用偏好性是受到選擇和突變等多重因素共同作用影響而形成的.這一結(jié)論與前人在其他植物葉綠體基因組中的研究結(jié)論相一致[17-19],可能與植物葉綠體基因組進(jìn)化的相對(duì)保守性有關(guān).本研究揭示了劍麻H.11648葉綠體基因組進(jìn)化以及基因表達(dá)的重要信息.在今后開展劍麻H.11648葉綠體基因工程時(shí),可以參考其偏好密碼子對(duì)異源表達(dá)基因進(jìn)行修飾,以提高其表達(dá)效率,也為探索在葉綠體基因組水平上建立龍舌蘭屬植物分類的新方法提供依據(jù).

    猜你喜歡
    龍舌蘭劍麻同義
    Dale Carnegie
    2020年墨龍舌蘭酒出口創(chuàng)14年來最大增幅
    劍麻原纖生物脫膠工藝研究
    劍麻葉片的加工方法及其設(shè)備研制
    西夏文《同義》重復(fù)字研究
    西夏學(xué)(2019年1期)2019-02-10 06:22:08
    西夏文《同義》考釋三則
    西夏學(xué)(2018年2期)2018-05-15 11:25:30
    來一杯龍舌蘭!
    海外文摘(2018年1期)2018-01-18 08:49:43
    讓劍麻回到劍麻,讓花回到花
    高壓脈沖電刺激下龍舌蘭釋放負(fù)離子的研究
    劍麻纖維增強(qiáng)聚乳酸復(fù)合材料酶降解研究
    av片东京热男人的天堂| 亚洲人成电影免费在线| 亚洲精华国产精华精| 成人黄色视频免费在线看| 日本vs欧美在线观看视频| 首页视频小说图片口味搜索| 国产亚洲欧美98| 夜夜夜夜夜久久久久| 一级片'在线观看视频| 久久午夜综合久久蜜桃| 精品久久久久久久久久免费视频 | 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产男女超爽视频在线观看| 男女免费视频国产| 久久久久国内视频| 十八禁人妻一区二区| 99香蕉大伊视频| 日本一区二区免费在线视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲五月天丁香| 最新的欧美精品一区二区| 国产欧美日韩一区二区精品| av福利片在线| 亚洲国产中文字幕在线视频| 91老司机精品| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 国产精品98久久久久久宅男小说| 欧美日韩亚洲高清精品| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 久久狼人影院| 欧美黑人欧美精品刺激| 亚洲av成人av| av有码第一页| 丝袜美腿诱惑在线| 露出奶头的视频| 亚洲少妇的诱惑av| 免费观看精品视频网站| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲 欧美一区二区三区| 亚洲午夜理论影院| 欧美不卡视频在线免费观看 | 热99re8久久精品国产| 在线av久久热| xxx96com| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 亚洲熟女毛片儿| 丝瓜视频免费看黄片| 免费少妇av软件| 91字幕亚洲| 国产亚洲精品久久久久久毛片 | 亚洲av日韩在线播放| 亚洲五月天丁香| 免费在线观看黄色视频的| www.精华液| 久久青草综合色| 成人特级黄色片久久久久久久| 亚洲国产看品久久| 男女免费视频国产| 国产激情久久老熟女| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 国产xxxxx性猛交| а√天堂www在线а√下载 | 亚洲av美国av| 欧美乱妇无乱码| xxx96com| 亚洲精品国产区一区二| 十八禁网站免费在线| 免费观看a级毛片全部| 最新美女视频免费是黄的| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 国产精华一区二区三区| 90打野战视频偷拍视频| 欧美激情极品国产一区二区三区| 在线观看午夜福利视频| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 精品国产一区二区三区四区第35| 亚洲美女黄片视频| 国产精品一区二区免费欧美| 搡老熟女国产l中国老女人| 中文亚洲av片在线观看爽 | 日韩有码中文字幕| 午夜日韩欧美国产| 亚洲少妇的诱惑av| 精品国产乱码久久久久久男人| 十分钟在线观看高清视频www| 亚洲专区字幕在线| 亚洲国产精品sss在线观看 | 桃红色精品国产亚洲av| av天堂久久9| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 成人手机av| 欧美最黄视频在线播放免费 | 啦啦啦免费观看视频1| 亚洲一码二码三码区别大吗| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲国产精品合色在线| 日本欧美视频一区| 午夜福利,免费看| 欧美黑人欧美精品刺激| 叶爱在线成人免费视频播放| 免费高清在线观看日韩| 久久99一区二区三区| 精品久久久久久久毛片微露脸| 在线观看免费视频网站a站| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 在线免费观看的www视频| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲专区国产一区二区| 色播在线永久视频| 色老头精品视频在线观看| 亚洲全国av大片| 99在线人妻在线中文字幕 | 亚洲第一av免费看| 高清黄色对白视频在线免费看| √禁漫天堂资源中文www| 国产精品亚洲一级av第二区| 国产精品免费一区二区三区在线 | 在线观看免费高清a一片| 国产激情久久老熟女| 亚洲片人在线观看| 超碰97精品在线观看| 老司机靠b影院| 好男人电影高清在线观看| 免费少妇av软件| 高清视频免费观看一区二区| 黄色视频,在线免费观看| 日韩大码丰满熟妇| 精品午夜福利视频在线观看一区| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 欧美精品高潮呻吟av久久| 老鸭窝网址在线观看| 搡老乐熟女国产| 999久久久精品免费观看国产| 黄色视频不卡| 操美女的视频在线观看| 岛国在线观看网站| 亚洲精品一二三| 久久久国产成人免费| 亚洲午夜理论影院| 久久狼人影院| 国产精品偷伦视频观看了| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 黄色 视频免费看| 亚洲av成人av| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 精品人妻在线不人妻| 中文字幕人妻丝袜制服| 日韩欧美一区视频在线观看| a级毛片黄视频| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 亚洲午夜理论影院| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 久久国产乱子伦精品免费另类| 91精品三级在线观看| 男女免费视频国产| 国产亚洲欧美98| 国产1区2区3区精品| 精品国产亚洲在线| av欧美777| 午夜福利在线免费观看网站| 99re6热这里在线精品视频| 国产有黄有色有爽视频| 热99re8久久精品国产| 精品久久久精品久久久| 超碰97精品在线观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 一二三四社区在线视频社区8| 国产精品 国内视频| 在线av久久热| 亚洲国产欧美网| 悠悠久久av| 亚洲成人国产一区在线观看| 免费观看a级毛片全部| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 国产主播在线观看一区二区| 欧美成狂野欧美在线观看| 精品国产乱子伦一区二区三区| av天堂在线播放| 母亲3免费完整高清在线观看| 黄色丝袜av网址大全| 国产精品一区二区精品视频观看| 18禁观看日本| 精品视频人人做人人爽| 天堂动漫精品| 日韩视频一区二区在线观看| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 亚洲,欧美精品.| 中亚洲国语对白在线视频| 老司机午夜福利在线观看视频| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 日本五十路高清| 欧美激情极品国产一区二区三区| 亚洲熟女精品中文字幕| 美国免费a级毛片| 他把我摸到了高潮在线观看| 波多野结衣一区麻豆| 中文字幕高清在线视频| 欧美在线黄色| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 一本大道久久a久久精品| 国产蜜桃级精品一区二区三区 | 97人妻天天添夜夜摸| 日本黄色日本黄色录像| 99久久综合精品五月天人人| 国产精品久久久久久精品古装| 亚洲人成77777在线视频| 大片电影免费在线观看免费| 日韩中文字幕欧美一区二区| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 欧美日韩亚洲高清精品| 99国产精品一区二区蜜桃av | 国产精品av久久久久免费| 国产精品欧美亚洲77777| 身体一侧抽搐| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 成人影院久久| 99久久人妻综合| 在线观看午夜福利视频| 韩国av一区二区三区四区| 人妻丰满熟妇av一区二区三区 | 久久久久久久精品吃奶| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久久精品区二区三区| 国产精品av久久久久免费| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 国产精品久久久久久精品古装| 老熟女久久久| 午夜福利乱码中文字幕| 老司机影院毛片| 99精品久久久久人妻精品| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产精品免费视频内射| 一区福利在线观看| 久久99一区二区三区| 国产精品久久电影中文字幕 | 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 国产亚洲精品久久久久久毛片 | 麻豆成人av在线观看| 国产免费现黄频在线看| 国产高清国产精品国产三级| 久久精品国产a三级三级三级| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 精品卡一卡二卡四卡免费| 欧美午夜高清在线| 久久草成人影院| 纯流量卡能插随身wifi吗| 天天操日日干夜夜撸| 丁香六月欧美| 国产不卡av网站在线观看| 老司机午夜十八禁免费视频| 亚洲专区国产一区二区| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 亚洲熟妇中文字幕五十中出 | 成年版毛片免费区| 国产深夜福利视频在线观看| 国产午夜精品久久久久久| 欧美日韩福利视频一区二区| 黄片大片在线免费观看| 69精品国产乱码久久久| 一级毛片高清免费大全| 18禁观看日本| 天堂动漫精品| 中文欧美无线码| 亚洲情色 制服丝袜| 欧美不卡视频在线免费观看 | 伦理电影免费视频| 一级毛片高清免费大全| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲熟妇中文字幕五十中出 | 国产精品成人在线| 两个人看的免费小视频| 国产精品久久久久久精品古装| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产精品亚洲av一区麻豆| 成人av一区二区三区在线看| 久久久久国内视频| 又黄又爽又免费观看的视频| 露出奶头的视频| 国产成人av激情在线播放| 美女午夜性视频免费| 精品久久久久久电影网| 悠悠久久av| 18在线观看网站| 又黄又爽又免费观看的视频| 99国产综合亚洲精品| 亚洲 欧美一区二区三区| 久久久精品免费免费高清| 亚洲成国产人片在线观看| 妹子高潮喷水视频| 国产免费现黄频在线看| 最新在线观看一区二区三区| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 日韩欧美一区视频在线观看| cao死你这个sao货| av天堂久久9| 日韩免费av在线播放| 18禁美女被吸乳视频| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产精品永久免费网站| tube8黄色片| 亚洲人成电影观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 无遮挡黄片免费观看| 一个人免费在线观看的高清视频| 国产国语露脸激情在线看| 咕卡用的链子| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 高清欧美精品videossex| 欧美黄色片欧美黄色片| 欧美国产精品一级二级三级| 天天影视国产精品| 老司机午夜十八禁免费视频| 18禁观看日本| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲三区欧美一区| 麻豆av在线久日| 老司机深夜福利视频在线观看| 国产成人精品在线电影| 欧美最黄视频在线播放免费 | 天天添夜夜摸| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 自线自在国产av| 成年人黄色毛片网站| 国产视频一区二区在线看| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 色老头精品视频在线观看| 中文字幕人妻丝袜制服| 咕卡用的链子| 国产男女超爽视频在线观看| 在线观看免费高清a一片| 日本黄色日本黄色录像| 黄色怎么调成土黄色| 免费在线观看完整版高清| 久久久久精品国产欧美久久久| 一区福利在线观看| 成人三级做爰电影| 午夜影院日韩av| 99久久精品国产亚洲精品| 大型黄色视频在线免费观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 桃红色精品国产亚洲av| 女同久久另类99精品国产91| 麻豆av在线久日| 欧美日韩精品网址| 欧美在线一区亚洲| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 黑人操中国人逼视频| 视频区欧美日本亚洲| 99精品在免费线老司机午夜| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 免费观看精品视频网站| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产精品永久免费网站| 久久天堂一区二区三区四区| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 成年人免费黄色播放视频| 黄色怎么调成土黄色| www.999成人在线观看| 精品一区二区三区av网在线观看| avwww免费| 很黄的视频免费| 亚洲三区欧美一区| 搡老熟女国产l中国老女人| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 母亲3免费完整高清在线观看| 国产精品久久电影中文字幕 | 亚洲精品国产区一区二| 天堂中文最新版在线下载| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 日本欧美视频一区| 久99久视频精品免费| 黄色成人免费大全| 视频区欧美日本亚洲| 制服人妻中文乱码| 亚洲国产精品sss在线观看 | 99国产综合亚洲精品| 欧美久久黑人一区二区| 深夜精品福利| 看免费av毛片| 国产亚洲欧美在线一区二区| 亚洲成人手机| 黄色视频,在线免费观看| 黑人操中国人逼视频| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 成人永久免费在线观看视频| 亚洲av日韩在线播放| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产av精品麻豆| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 不卡av一区二区三区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 精品亚洲成a人片在线观看| 国产单亲对白刺激| avwww免费| 国产片内射在线| 黄片小视频在线播放| 我的亚洲天堂| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 成人精品一区二区免费| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 1024视频免费在线观看| 黄色成人免费大全| 欧美精品一区二区免费开放| 纯流量卡能插随身wifi吗| 亚洲人成伊人成综合网2020| 在线视频色国产色| 一级片'在线观看视频| 国产蜜桃级精品一区二区三区 | 日韩视频一区二区在线观看| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 中亚洲国语对白在线视频| 激情视频va一区二区三区| 一区在线观看完整版| 久久人人97超碰香蕉20202| 久久这里只有精品19| av中文乱码字幕在线| 老司机午夜福利在线观看视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 色尼玛亚洲综合影院| 午夜福利,免费看| 日日爽夜夜爽网站| 国产男女超爽视频在线观看| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 又大又爽又粗| 欧美日韩亚洲高清精品| e午夜精品久久久久久久| 嫩草影视91久久| 亚洲九九香蕉| av国产精品久久久久影院| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲国产欧美网| 99re6热这里在线精品视频| √禁漫天堂资源中文www| 精品亚洲成国产av| 一级作爱视频免费观看| 亚洲五月色婷婷综合| 午夜福利,免费看| 女警被强在线播放| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲综合色网址| 免费看a级黄色片| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 99re在线观看精品视频| 久久精品成人免费网站| 成年版毛片免费区| 波多野结衣一区麻豆| 老熟女久久久| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 亚洲av美国av| 91在线观看av| 母亲3免费完整高清在线观看| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产精品偷伦视频观看了| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 中文字幕色久视频| 国产精品免费一区二区三区在线 | 日本五十路高清| 校园春色视频在线观看| 亚洲熟妇中文字幕五十中出 | 免费黄频网站在线观看国产| 国产亚洲欧美精品永久| 欧美黄色片欧美黄色片| 99久久99久久久精品蜜桃| 久久久国产精品麻豆| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 精品免费久久久久久久清纯 | 精品国产一区二区久久| 成年动漫av网址| 老司机福利观看| 人妻一区二区av| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 久久久水蜜桃国产精品网| 在线观看舔阴道视频| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲精品中文字幕在线视频| 首页视频小说图片口味搜索| 午夜免费观看网址| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 男女免费视频国产| 亚洲精品国产区一区二| 亚洲成国产人片在线观看| 欧美午夜高清在线| 色综合婷婷激情| 欧美在线一区亚洲| 曰老女人黄片| 一级片免费观看大全| 久久久国产成人精品二区 | 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 一区二区日韩欧美中文字幕| 高清av免费在线| av线在线观看网站| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 9色porny在线观看| 亚洲男人天堂网一区| 久久久久精品国产欧美久久久| 日韩精品免费视频一区二区三区| 久久久国产成人精品二区 | 国产男靠女视频免费网站| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产视频一区二区在线看| 亚洲黑人精品在线| 欧美激情久久久久久爽电影 | 老汉色∧v一级毛片| 高清黄色对白视频在线免费看| 热99国产精品久久久久久7| 香蕉丝袜av| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲九九香蕉| 咕卡用的链子| 精品久久久久久久毛片微露脸| 日日夜夜操网爽| 日韩三级视频一区二区三区| 夜夜躁狠狠躁天天躁| www.999成人在线观看| 99精品在免费线老司机午夜| 成人亚洲精品一区在线观看| 午夜91福利影院| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 91在线观看av| 90打野战视频偷拍视频| 热re99久久国产66热| 亚洲av电影在线进入| 99久久99久久久精品蜜桃| 99国产综合亚洲精品| 一本大道久久a久久精品| 国产精品一区二区免费欧美| 他把我摸到了高潮在线观看| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲国产看品久久| 国产男女内射视频| 欧美av亚洲av综合av国产av| 满18在线观看网站| 又黄又爽又免费观看的视频| 男女下面插进去视频免费观看| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 国产精品国产高清国产av | 久久久久精品国产欧美久久久| 国产精品免费一区二区三区在线 | 国产亚洲一区二区精品| 欧美乱妇无乱码| 黄色成人免费大全| 欧美激情高清一区二区三区| 在线国产一区二区在线| 黄色视频,在线免费观看| 成人永久免费在线观看视频| 一夜夜www| 亚洲一区二区三区不卡视频| 亚洲av成人av| 黑人欧美特级aaaaaa片| 久久香蕉国产精品| 成人永久免费在线观看视频| 免费人成视频x8x8入口观看| 亚洲中文字幕日韩| 国产97色在线日韩免费| 亚洲久久久国产精品| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 日本一区二区免费在线视频| 丰满的人妻完整版| 午夜福利影视在线免费观看| 男人操女人黄网站| 国产又色又爽无遮挡免费看| 黄色毛片三级朝国网站| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 午夜视频精品福利| 久久草成人影院| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲一区中文字幕在线| 99精品久久久久人妻精品| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 免费在线观看日本一区| 亚洲国产欧美一区二区综合| av线在线观看网站| 黄片播放在线免费| 日本a在线网址| 纯流量卡能插随身wifi吗| 黑人猛操日本美女一级片| 99国产综合亚洲精品| 老汉色∧v一级毛片| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 大陆偷拍与自拍| 婷婷成人精品国产| 国产精品久久电影中文字幕 | 黄色怎么调成土黄色| 亚洲av欧美aⅴ国产| 精品人妻1区二区| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 男女下面插进去视频免费观看| 嫩草影视91久久| 9色porny在线观看| cao死你这个sao货| 十八禁高潮呻吟视频| 久久影院123| 天堂中文最新版在线下载| 91字幕亚洲| 丰满迷人的少妇在线观看|