輻射對(duì)伊立替康的體內(nèi)代謝影響※

喬一杰，楊建鑫，楊 夢(mèng)，周雪姣，辛元堯，年永瓊，朱 琳，李向陽(yáng)*

(1.青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院，青海 西寧 810016；2.青海大學(xué)生態(tài)環(huán)境工程學(xué)院，青海 西寧 810016)

輻射在造福人類的同時(shí)，對(duì)人們的健康也帶來(lái)了不同程度的損害。在輻射條件下，研究藥物代謝的特點(diǎn)，以及如何對(duì)受輻射人群進(jìn)行合理有效的用藥將是未來(lái)研究的熱點(diǎn)。

輻射影響藥物代謝的研究雖在CYP450酶及其相關(guān)藥物方面取得一定的研究成果，但目前仍處于探索階段，存在很大的研究空間[1]。本研究采用HPLC法測(cè)定大鼠體內(nèi)伊立替康(Irinotecan，CPT-11)血漿藥物濃度，并對(duì)其藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)特點(diǎn)進(jìn)行初步研究，探討CPT-11的生物體內(nèi)代謝特征，為其臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SD大鼠[合格證號(hào)：SCXK(甘)2017-0501]12只，雌雄各半，體重(200±20)g，飼養(yǎng)于青海大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心(23℃±2℃，光照明暗12h交替)，實(shí)驗(yàn)前一天禁食。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器

Agilent 1200高效液相色譜儀和色譜工作站(美國(guó)Aglient)；Sartorius電子分析天平(德國(guó)賽多利斯科學(xué)儀器公司)；23EX醫(yī)用電子直線加速器(美國(guó)VaRian)；TGL-16B高速冷凍離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器)；BT224S電子秤(上海醫(yī)大儀器廠)；低速臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)；常低溫冰箱(Thermo，美國(guó))；XW-80A漩渦混合器(上海醫(yī)大儀器廠)；KQ-250DB型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；YDS-30東亞液氮容器(樂(lè)山市東亞機(jī)電工貿(mào)有限公司)。

1.2.2 藥品和試劑

注射用鹽酸伊立替康(批號(hào)：17011012，純度>98%，山東齊魯制藥)；鹽酸伊立替康對(duì)照品(批號(hào)：100737-2017102，北京百靈威科技有限公司)；甲醇(批號(hào)：2016083104，色譜純，山東禹王實(shí)業(yè)有限公司)；磷酸氫二鉀、高氯酸、DEPC水(分析純，天津市百世化工有限公司)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 動(dòng)物分組及給藥

大鼠分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組(X射線一次性全身照射后24h)，每組6只，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)組按人體每天伊立替康注射劑量350 mg·m-2換算，大鼠注射鹽酸伊立替康的劑量為30 mg·kg-1，通過(guò)股靜脈一次性給藥。

1.3.2 大鼠輻射造模

用自制的模具將實(shí)驗(yàn)組大鼠整齊地排列在電子加速器視野中央(視野為40cm×40cm)，源皮距100 cm。輻射的吸收劑量率為300 cGy·min-1，照射劑量為1 Gy。

1.3.3 樣品采集

對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組大鼠給藥后經(jīng)股靜脈注射CPT-11。從眼眶靜脈取血，分別取2、5、15、30、60、180、360、600、960、1440 min時(shí)的全血約300 μL于涂有EDTA抗凝劑的離心管中。

1.3.4 樣品預(yù)處理

全血離心(4000r·min-1)10 min后，吸取上清液置于新的離心管中。加入25%高氯酸50 μL，離心(16000r·min-1)10 min，吸取上清液，待進(jìn)樣檢測(cè)。

1.3.5 色譜條件設(shè)立

2 結(jié)果

2.1 血藥濃度-時(shí)間曲線圖

對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組CPT-11的血藥濃度-時(shí)間曲線圖見(jiàn)圖1。

圖1對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組CPT-11的血藥濃度-時(shí)間圖(n=6，μg·mL-1)

Figure1PlasmaDrugConcentration-TimeCurveofCPT-11inControlandExperimentalGroup(n= 6，μg·mL-1)

表1CPT-11的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)(n=6)

Table 1Pharmacokinetics Parameters of CPT-11(n=6)

*：與對(duì)照組比較，P<0.05；**：與對(duì)照組比較，P<0.01.

2.2 藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

使用DAS2.0軟件計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組CPT-11的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)見(jiàn)表1。

結(jié)果表明，與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組的AUC(0-t)顯著降低15.59 %，AUC(0-∞)顯著降低10.82%。AUMC(0-t)、AUMC(0-∞)、MRT(0-t)、K也有所下降，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MRT(0-∞)、t1/2、CL、V略微升高。該結(jié)果提示X射線輻射后，CPT-11的體內(nèi)吸收減少。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)采用X射線對(duì)大鼠一次性全身照射造模，文獻(xiàn)大多采用鈷60進(jìn)行輻射模型的制備。醫(yī)用直線加速器由于能量范圍寬、操作簡(jiǎn)便、穩(wěn)定性高等特點(diǎn)已成為當(dāng)今放射治療的主要手段，故本實(shí)驗(yàn)采用醫(yī)用直線加速器產(chǎn)生的X射線對(duì)大鼠進(jìn)行造模。

本研究發(fā)現(xiàn)，大鼠輻射后，CPT-11的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)發(fā)生了顯著的改變，AUC(0-t)顯著減小，MRT(0-t)和t1/2無(wú)顯著差異。Hsieh等[2]利用醫(yī)用直線加速器探討了盆腔輻射對(duì)大鼠5-氟尿嘧啶藥物動(dòng)力學(xué)特征的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)2 Gy的γ射線輻射使AUC和MRT分別下降22%和32%，CL升高28%，t1/2和Cmax無(wú)顯著性變化，與本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果基本一致。順鉑的研究表明[3]，大鼠盆腔接收0.5 Gy和2 Gy的γ射線輻射24 h 后，血漿AUC分別升高80%和87%，t1/2分別延長(zhǎng)77%和68%，MRT分別延長(zhǎng)101%和89%，Cmax升高36%和32%，而CL分別降低45%和47%，與本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果相反。Hsieh等[4]也研究了腹腔輻射對(duì)大鼠5-氟尿嘧啶藥物動(dòng)力學(xué)特征的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)0.5 Gy和2 Gy的γ射線輻射分別使其血漿AUC降低21%和32%，MRT分別下降14%和31%，CL分別升高36%和51%。本研究為X射線全身輻射，不同部位的輻射能否得到類似研究結(jié)果還需進(jìn)一步去探討。

Song[5]利用醫(yī)用直線加速器研究了γ射線輻射對(duì)抗輻射藥物18-β-甘草酸代謝動(dòng)力學(xué)特征的影響，發(fā)現(xiàn)3 Gy的γ射線輻射小鼠24 h后，AUC和Cmax分別降低75%和54%，活性代謝物18β-甘草次酸的AUC和Cmax分別降低了70%和66%，提示γ射線輻射加快甘草酸的體內(nèi)代謝。本研究采用X射線輻射研究了CPT-11的藥代動(dòng)力學(xué)的特征變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，X射線輻射后，CPT-11的體內(nèi)代謝加快，提示在輻射條件下特別是臨床化療和放療同時(shí)進(jìn)行時(shí)，應(yīng)適當(dāng)增加CPT-11的給藥劑量。

由于CPT-11的代謝途徑多種多樣，其代謝產(chǎn)物除了活性產(chǎn)物SN-38，還有多種副產(chǎn)物。另外，CPT-11在動(dòng)物和人體內(nèi)的代謝水平略有差別，本研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為大鼠，人體能否得到相同的研究結(jié)果還有待進(jìn)一步去證實(shí)。