湖北省牛羊衣原體抗體流行病學(xué)調(diào)查

周文　彭伏虎　胡思順

摘要：為了解湖北省牛羊衣原體病流行情況，采集了湖北省內(nèi)多個(gè)地區(qū)近40個(gè)不同養(yǎng)殖規(guī)模的牛羊養(yǎng)殖場(chǎng)（18個(gè)牛場(chǎng)、20個(gè)羊場(chǎng)），共380份血清進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)。結(jié)果表明，380份血清中檢出陽性血清168份，總陽性率為44.21%，湖北省各地區(qū)均存在衣原體抗體檢測(cè)呈陽性的養(yǎng)殖場(chǎng)，牛的感染率相對(duì)較高，個(gè)別地區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)的衣原體抗體檢測(cè)陽性率達(dá)100%。調(diào)查表明湖北省牛羊衣原體感染比較普遍，同時(shí)存在一定的地域性。

關(guān)鍵詞：衣原體；流行病學(xué)；抗體；湖北省

中圖分類號(hào)：S859.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：0439-8114（2018）18-0092-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.18.023 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Epidemiological Investigation of Chlamydia Antibody in Cattle and Sheep

in Hubei Province

ZHOU Wen1，PENG Fu-hu2，HU Si-shun1，ZHANG Hai-yan1，XIAO Hong-de2，LIU Yang-yang1，LI Zi-li1，BI Ding-ren1

（1.Key Laboratory of Preventive Veterinary Medicine of Hubei Province，Huazhong Agricultural University，Wuhan 430070，China；

2.Huhei Center for Animal Disease Control and Prevention，Wuhan 430070，China）

Abstract： In order to understand the epidemic situation of Chlamydia in Hubei Province，380 serum species from 40 farms （18 cattle and 20 sheep or goat） in various regions of Hubei province were collected tested by indirect hemagglutination test （IHA）. The results showed that the total positive rate was 44.21%（168/380）. All regions in Hubei province were found positive of Chlamydia antibody detection. The infection rate of cattle was relatively high，and the positive rate in some farms was up to 100%. This survey showed that Chlamydia infection in cattle and sheep was common in Hubei province，and there were also regionality.

Key words： Chlamydia；epidemiology；antibody；Hubei province

衣原體是一類介于細(xì)菌與病毒之間的專性細(xì)胞內(nèi)寄生的單細(xì)胞原核微生物，其存在獨(dú)特的生長發(fā)育周期，能引起人和動(dòng)物的衣原體病，引起多種炎癥，并可影響生殖系統(tǒng)，引起重大的公共衛(wèi)生問題[1-3]。衣原體的宿主廣泛，家畜中以豬牛羊較為易感，沒有明顯的年齡差別，但不同年齡的畜禽感染后的癥狀表現(xiàn)不一。近年來，家畜衣原體的感染在中國養(yǎng)殖場(chǎng)十分普遍，可引起母畜流產(chǎn)、死胎等多種疾患，給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失[4]。而且國內(nèi)動(dòng)物衣原體感染的種類非常多。李靜[5]應(yīng)用FRET-qPCR方法對(duì)中國11個(gè)省的牛衣原體多樣性。研究表明，國內(nèi)奶牛群中檢測(cè)到家禽衣原體、鸚鵡熱衣原體、家畜衣原體和肺炎衣原體。目前，國內(nèi)多個(gè)省份的家畜衣原體感染率與20世紀(jì)90年代相比有顯著的提高[6]，說明衣原體對(duì)家畜的危害在加劇。為了解湖北省牛羊衣原體病的流行情況，本試驗(yàn)采用間接血凝試驗(yàn)對(duì)湖北省衣原體感染情況進(jìn)行了調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 血清樣品

2016年湖北省秋季血清160份，收集自湖北省15縣市11個(gè)牛場(chǎng)、5個(gè)羊場(chǎng)，共16個(gè)養(yǎng)殖規(guī)模不等的養(yǎng)殖場(chǎng)。2017年春季血樣150份，來自5縣15個(gè)場(chǎng)，包括5個(gè)牛場(chǎng)和10個(gè)羊場(chǎng)；2017年8-10月專程采樣70份，包括黃岡1個(gè)牛場(chǎng)、2個(gè)羊場(chǎng)和天門市1個(gè)羊場(chǎng)、1個(gè)牛場(chǎng)。按常規(guī)方法分離血清，置-20 ℃保存。詳細(xì)記錄牛群基本情況，如來源、品種、規(guī)模等。

1.2 診斷液

衣原體IHA抗原、陽性血清、陰性血清、稀釋液均購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。

1.3 抗體檢測(cè)

衣原體微量間接血凝試驗(yàn)方法和判定標(biāo)準(zhǔn)均按中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所提供的說明書方法和判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。具體方法為用微量加樣器在V型反應(yīng)板上每孔滴加75 μL血清稀釋液用以鋪板，然后取25 μL樣品滴加于第1孔，再以4倍遞呈稀釋3孔，即1∶4、1∶16、1∶64。最后1孔棄去25 μL。同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照、陽性對(duì)照和空白對(duì)照各2孔。加25 μL，抗原于各孔后，將反應(yīng)板蓋玻璃板后置微型振蕩器振蕩2 min，于37 ℃下作用2 h后判定結(jié)果。陽性對(duì)照孔的各稀釋度完全凝集，陰性對(duì)照孔、空白對(duì)照孔不發(fā)生凝集，試驗(yàn)成立。被檢血清1∶16稀釋孔內(nèi)呈“++”以上凝集者判為陽性。1∶4孔出現(xiàn)“+”及以下凝集者為陰性；1∶4孔出現(xiàn)“++”而1∶16孔出現(xiàn)“+”以下者判斷為可疑，若有可疑孔則進(jìn)行復(fù)檢。

2 結(jié)果與分析

2.1 衣原體抗體IHA檢測(cè)

被檢的380份血清中檢出陽性血清168份，總陽性率為44.21%。2016年秋季血清，衣原體抗體陽性率為28.13%（45/160），約57.78%（26/45）IHA≥64；2017年春季血清，衣原體抗體陽性率為36.67%（55/150），其中約65.45%（36/55）的血清IHA≥64；根據(jù)衣原體抗體檢測(cè)結(jié)果，從陽性率高的地區(qū)的5個(gè)不同養(yǎng)殖場(chǎng)各隨機(jī)采樣10份，衣原體抗體陽性率為22.00%（11/50），但各場(chǎng)衣原體血清抗體陽性率存在很大的差異。對(duì)IHA效價(jià)高的養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行第2次采樣，衣原體抗體陽性率為70.00%（14/20），其中約30.00%（6/20）的血清IHA≥64。

2.2 衣原體感染分布

2016年秋季的血樣中呈陽性的養(yǎng)殖場(chǎng)多處于丘陵地區(qū)，如鄂州、咸寧、孝感等，某些養(yǎng)殖場(chǎng)的陽性率高達(dá)100%。2017年春季的血樣檢測(cè)結(jié)果表明， 5個(gè)縣市均存在不同程度的感染，養(yǎng)殖場(chǎng)之間存在很大的差異，個(gè)別養(yǎng)殖場(chǎng)檢測(cè)陽性率達(dá)100%，麻城地區(qū)牛場(chǎng)3次檢測(cè)率最高，大悟縣較低；宜昌地區(qū)存在陰性場(chǎng)。

2.3 衣原體感染因素分析

本次調(diào)查所用的血樣來自不同地區(qū)、不同養(yǎng)殖規(guī)模和飼養(yǎng)方式，既有規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)，也有小規(guī)模散養(yǎng)群。血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果并不能反映養(yǎng)殖規(guī)模與衣原體血清陽性率高低相關(guān)，衣原體血清陽性率與地域存在某種聯(lián)系；而在同一地域的養(yǎng)殖場(chǎng)的衣原體血清陽性率與飼養(yǎng)的方式，尤其是放牧散養(yǎng)有關(guān)。

3 討論

衣原體是一類特殊微生物，流產(chǎn)嗜衣原體引起的羊地方性流產(chǎn)作為一種重要的人獸共患傳染病，不僅給養(yǎng)羊業(yè)造成了相當(dāng)大的經(jīng)濟(jì)損失，也危及人員健康。在飼養(yǎng)或處理被感染羊只過程中病原體可通過口腔或呼吸道進(jìn)入人體而造成感染，被感染人員會(huì)出現(xiàn)輕微流感樣癥狀，甚至導(dǎo)致衣原體性腦膜炎、結(jié)膜炎、肺炎。孕期的婦女被流產(chǎn)嗜衣原體感染可能會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的敗血癥進(jìn)而發(fā)生流產(chǎn)或產(chǎn)下死胎[7，8]。

很多報(bào)道衣原體感染狀況與飼養(yǎng)管理水平、規(guī)模、地區(qū)疾病流行情況等多因素有關(guān)[9-13]。但血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示，衣原體陽性率在規(guī)模場(chǎng)和農(nóng)戶散養(yǎng)群之間沒有太大的相關(guān)性，但與地域性有一定的關(guān)聯(lián)。此結(jié)果提示對(duì)衣原體的防控重點(diǎn)應(yīng)在引種。中國大部分地區(qū)如青海、甘肅、內(nèi)蒙、西藏、寧夏、陜西、廣西和北京等都存在衣原體病的危害[6，14，15]。因此，養(yǎng)殖場(chǎng)引種時(shí)注意衣原體檢疫，同時(shí)減少同一地域不同種群之間的交叉活動(dòng)區(qū)域，尤其是在放牧的時(shí)候。衣原體在動(dòng)物消化道中含量很高，通過糞便或其他分泌物污染牧草或水源，導(dǎo)致牧場(chǎng)長期被衣原體污染。

湖北省牛羊衣原體感染率較高，但對(duì)該病的診斷和防治工作在許多地方迄今仍處于空白，應(yīng)當(dāng)對(duì)該地區(qū)的衣原體病尤其是引起的流產(chǎn)病例采取適當(dāng)?shù)目刂拼胧罅ζ占靶笄菀略w病診斷及防治方面的知識(shí)，使該病危害降至最低限度以確保人類和動(dòng)物的健康安全。同時(shí)加強(qiáng)動(dòng)物之間衣原體交叉感染以及流行病學(xué)調(diào)查方面的研究。

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