石墨爐原子吸收分光光度法測(cè)定麝香接骨膠囊中砷含量

王 健，孔 燕

(揚(yáng)州市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，江蘇 揚(yáng)州 25000)

麝香接骨膠囊收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑》第五冊(cè)[1]，為骨傷科常用藥，主要用于跌打損傷、筋傷骨折、瘀血凝結(jié)、閃腰岔氣[2]。但其處方中有自然銅(煅)、朱砂、硼砂等多味礦物藥，會(huì)導(dǎo)致該中成藥中重金屬元素處于一種較高的水平。鉛、鎘、砷、汞、銅等有害重金屬元素易在人體內(nèi)蓄積,其半衰期長(zhǎng),達(dá)到一定數(shù)量,即可呈現(xiàn)毒性作用[3]。目前尚無(wú)研究麝香接骨膠囊中重金屬元素檢測(cè)方法的報(bào)道。本研究將針對(duì)麝香接骨膠囊處方中所含礦物藥的性質(zhì)，建立適合麝香接骨膠囊中砷元素含量的測(cè)定方法，加強(qiáng)該中成藥的安全性控制，給臨床使用提供相應(yīng)數(shù)據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 PE AA800原子吸收分光光度計(jì)：美國(guó)鉑金埃爾默公司；MV3000微波消解儀：奧地利安東帕有限公司；BHW-09A恒溫消解儀：上海博通有限公司；Milli-Q去離子水機(jī)：美國(guó)密理博有限公司；AB204-N萬(wàn)分之一電子分析天平：美國(guó)梅特勒-托利多集團(tuán)；1 mL、5 mL移液槍?zhuān)旱聡?guó)艾本德有限公司。

1.2 試劑 砷元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 000 μg/mL)：國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心；硝酸(BV-Ⅲ級(jí))：北京化學(xué)試劑研究所；雙氧水(優(yōu)級(jí)純)、氫氟酸(優(yōu)級(jí)純)：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；去離子水：自制；硝酸鈀溶液(優(yōu)級(jí)純)：鉑金埃爾默。

1.3 樣品 麝香接骨膠囊(批號(hào) 130104、130602)：吉林金寶藥業(yè)股份有限公司；麝香接骨膠囊(批號(hào) 130402)：吉林一正藥業(yè)集團(tuán)有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 儀器的工作條件

2.1.1 微波消解儀消解程序 見(jiàn)表1。

表1 微波消解程序

注：升壓速率：0.3 bar/s，溫度上限：200 ℃，壓力上限：35 bar

2.1.2 原子吸收光譜儀工作參數(shù) 采用美國(guó)鉑金埃爾默AA800原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定樣品中的砷。分析條件：波長(zhǎng)193.7 nm，狹縫0.7 nm，進(jìn)樣量20 μL，高純氬氣作為載氣，塞曼扣背景模式，選用砷元素?zé)o極放電燈，燈電流380 mA。參考文獻(xiàn)[4-5]，通過(guò)優(yōu)化選擇，設(shè)定石墨爐升溫程序，見(jiàn)表2?；w改進(jìn)劑選擇硝酸鈀溶液(取鉑金埃爾默公司硝酸鈀溶液稀釋10倍)。

表2 石墨爐升溫程序

2.2 溶液的制備

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液的配制 取砷標(biāo)準(zhǔn)溶液逐步稀釋?zhuān)渲坪榉謩e為0、20、40、60、80、100 ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液。

2.2.2 供試品溶液的配制 參照文獻(xiàn)[6]方法配制供試品溶液。取樣品粗粉0.5 g，置聚四氟乙烯消解罐中，置于電熱板上。加硝酸5 mL，氫氟酸0.5 mL，100 ℃預(yù)消化至沒(méi)有棕紅色氣體產(chǎn)生，放冷至室溫。將預(yù)處理好的樣品裝入陶瓷套管中，放置于微波消解儀中進(jìn)行消解。將微波消解完的樣品置于恒溫消解儀上，在125 ℃下趕酸至約1 mL，轉(zhuǎn)移至塑料離心管中，用去離子水定容至25 mL，搖勻。取1 mL至10 mL離心管中，定容至刻度，即得。

2.3 線性與范圍 按照“2.1”項(xiàng)下的儀器參數(shù)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液，測(cè)定各濃度溶液的吸光度，以吸光度y對(duì)濃度x(ng/mL)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程y=0.002 23x+0.004 79，r=0.996，線性范圍為0～100 ng/mL。

2.4 儀器檢出限與定量限 按照“2.2.2”項(xiàng)方法處理7份空白樣品，再按照“2.1”項(xiàng)下的儀器參數(shù)進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算7份測(cè)定結(jié)果的SD值，以3倍的SD值作為檢出限，10倍的SD值作為定量限。儀器檢出限為0.740 ng/mL，定量限為2.47 ng/mL。

2.5 精密度實(shí)驗(yàn) 取麝香接骨膠囊樣品(批號(hào) 130104)粉末1份，按照“2.2.2”項(xiàng)制備供試品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下的儀器參數(shù)進(jìn)行測(cè)定，連續(xù)進(jìn)樣5次，測(cè)定吸光度，計(jì)算RSD為2.85%。顯示實(shí)驗(yàn)儀器的精密度良好。

2.6 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取麝香接骨膠囊樣品(批號(hào) 130104)粉末5份,按照“2.2.2”項(xiàng)制備供試品溶液,按照“2.1”項(xiàng)下的儀器參數(shù)進(jìn)行測(cè)定,樣品中含砷平均值為28.4 μg/g，RSD為2.6%。

2.7 回收率實(shí)驗(yàn) 取已知含量的麝香接骨膠囊樣品(批號(hào) 130104)粉末9份，每份約0.25 g，精密稱(chēng)定，分別精密加入5 μg/mL砷標(biāo)準(zhǔn)溶液1、2、3 mL。按照“2.2.2”項(xiàng)制備樣品溶液,按照“2.1”項(xiàng)下的儀器參數(shù)進(jìn)行測(cè)定,根據(jù)測(cè)定結(jié)果，計(jì)算加樣回收率。計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n=9)

樣品的加樣回收率為94.9%～102.5%,平均回收率為96.9%，可見(jiàn)，此方法可以準(zhǔn)確地測(cè)定樣品中砷元素含量。

2.8 樣品的測(cè)定 取不同來(lái)源的樣品各3份，按照“2.2.2”項(xiàng)下制備樣品溶液,按照“2.1”項(xiàng)下的儀器參數(shù)進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表4。

3 討論

麝香接骨膠囊中有自然銅(煅)、朱砂、硼砂等多味礦物藥，導(dǎo)致該樣品中重金屬元素處于較高的水平，因此非常有必要加強(qiáng)含礦物藥中重金屬元素的研究，以控制藥物使用安全性。

麝香接骨膠囊中含有朱砂，導(dǎo)致樣品中汞元素高出砷元素很多。在測(cè)定時(shí)，分別采用電感耦合等離子質(zhì)譜法、石墨爐原子吸收分光光度法、原子熒光分光光度法測(cè)定樣品中砷元素。用電感耦合等離子質(zhì)譜測(cè)定時(shí)，樣品中大量汞會(huì)污染儀器的進(jìn)樣系統(tǒng)，導(dǎo)致微量的汞無(wú)法準(zhǔn)確測(cè)定。用原子熒光分光光度法測(cè)樣品中砷時(shí)，樣品中大量的汞直接導(dǎo)致樣品中砷無(wú)法測(cè)定。而石墨爐原子吸收分光光度法測(cè)定時(shí)，則不存在污染、無(wú)法測(cè)定等問(wèn)題。所以最后定量方法選擇石墨爐原子吸收分光光度法。

表4 樣品測(cè)定結(jié)果(n=3)

在進(jìn)行砷測(cè)定時(shí)，應(yīng)選用無(wú)極放電燈進(jìn)行數(shù)據(jù)的測(cè)定。因?yàn)榭招年帢O燈砷產(chǎn)生的能量低，不能滿足該元素的含量測(cè)定要求。

在石墨爐原子吸收分析中，為了提高樣品中易揮發(fā)元素的穩(wěn)定性，可以加入某種化學(xué)試劑，提高灰化溫度以降低基體的干擾，而不減少待測(cè)元素的含量[7]。本研究采用磷酸二氫銨溶液、硝酸鎂溶液、硝酸鈀溶液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。因?yàn)橄跛徕Z溶液作為基體改進(jìn)劑的時(shí)候砷元素吸收信號(hào)最大且穩(wěn)定[8]，所以選擇硝酸鈀溶液為本研究的基體改進(jìn)劑。

分別在灰化溫度1 000 ℃、1 100 ℃、1 200 ℃、1 300 ℃、1 400 ℃對(duì)40 ng/mL的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果在灰化溫度1 200 ℃時(shí)，雜質(zhì)干擾少，吸收值最大。分別在原子化溫度1 900 ℃、1 950 ℃、2 000 ℃、2 050 ℃、2 100 ℃對(duì)40 ng/mL的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果在2 050 ℃時(shí)吸收值最大，出峰形態(tài)較好。所以最終選擇灰化溫度1 200 ℃，原子化溫度2 050 ℃。