肝素鋰對電化學(xué)發(fā)光法測定甲狀腺激素影響的研究

黃 俊，聶 鑫，羅開宏，李貴星

(四川大學(xué)華西醫(yī)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)科，四川 成都 610041)

近年來，我國甲狀腺疾病發(fā)病率逐年增高[1]。甲狀腺相關(guān)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目檢查對甲狀腺疾病的診斷和和療效評估非常重要，檢查方法由最初的放免法、酶聯(lián)免疫法更換為準(zhǔn)確度和靈敏度更高的電化學(xué)發(fā)光法。為縮短實(shí)驗(yàn)室檢測時(shí)間，實(shí)驗(yàn)室采用抗凝血來快速分離血漿，有研究顯示：肝素鈉會導(dǎo)致游離甲狀腺素(FT4)和促甲狀腺激素(TSH)測定結(jié)果較血清檢測結(jié)果偏高[2]，肝素鋰以及 EDTA-K2對甲狀腺素(T4)及TSH的測定有影響[3，4]。甲狀腺自身抗體是指由于自身免疫紊亂產(chǎn)生的針對甲狀腺某些成分的免疫球蛋白，主要包括促甲狀腺激素受體抗體(TRAb)、抗甲狀腺球蛋白抗體(A-TG)和抗過氧化物酶抗體(A-TPO)，對 Graves 病和橋本氏甲狀腺炎等甲狀腺疾病的鑒別診斷與療效評估非常重要。目前尚未有研究探討抗凝劑對甲狀腺自身抗體的檢測影響。作者采用羅氏Cobas e601 型電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑，比較分析肝素鋰抗凝血漿和無添加劑血清樣本甲狀腺全套功能指標(biāo)的差異，探究肝素鋰抗凝血漿對甲狀腺指標(biāo)的影響，指導(dǎo)臨床采血管的正確使用。

1 資料與方法

1.1一般資料選擇 2017 年 8-9 月在華西醫(yī)院就診的疑似甲狀腺疾病的門診患者 60 例，其中男 23 例，女 37 例；年齡 10～73 歲，中位年齡 43 歲。同時(shí)采用肝素鋰抗凝的綠頭管和無添加劑的紅頭管各采血 3 ml，所得血液樣本均在室溫放置 30 分鐘待紅頭管血清析出后采用 3500 轉(zhuǎn)/分離心 5 分鐘分別收集綠頭管血漿或紅頭管血清。

1.2儀器及試劑及檢測方法FT3、FT4、T3、T4、TSH、A-TG、A-TPO、TRAb和甲狀腺球蛋白(TG)濃度檢測均采用羅氏 Cobas e601 電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑和校準(zhǔn)品進(jìn)行。所有檢測均嚴(yán)格按照儀器操作和試劑說明書等相關(guān) SOP 文件進(jìn)行，本實(shí)驗(yàn)室通過美國病理學(xué)家協(xié)會(CAP)認(rèn)可，保證結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用 SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。所有指標(biāo)采用中位數(shù)(四分位數(shù)間距)表示。兩種標(biāo)本處理方式之間的數(shù)據(jù)比較采用秩和檢驗(yàn)，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1綠頭管血漿與紅頭管血清中甲狀腺激素檢測水平比較綠頭管血漿與紅頭管血清中FT3、FT4、T3、T4和TSH檢測結(jié)果如表 1 所示，兩組各指標(biāo)檢測差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P> 0.05)。

表1 綠頭管血漿與紅頭管血清中甲狀腺激素檢測水平

2.2綠頭管血漿與紅頭管血清中TG水平比較綠頭管血漿和紅頭管血清中TG檢測水平分別為 8.24 μg/L[(1.61～18.52)μg/L]和 7.74 μg/L[(1.02～18.31)μg/L]，兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-0.079，P= 0.937)。見圖 1。

圖1 綠頭管血漿與紅頭管血清中甲狀腺球蛋白檢測水平

2.3綠頭管血漿與紅頭管血清中甲狀腺自身抗體水平比較綠頭管血漿和紅頭管血清中A-TPO檢測水平分別為 14.58 IU/ml[(10.85～98.11)IV/ml]和 11.44 IU/ml[(8.01～86.82)IU/ml]，兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-1.474，P= 0.141)(見圖 2)。綠頭管血清中A-TG和TRAb檢測水平為 35.00 IU/ml[(22.37～284.70)IU/ml]和 3.55 IU/ml[(3.30～4.08)IU/ml]，明顯高于紅頭管血清中 15.3 IU/ml[(10.00～238.22)IU/ml]和 0.68 IU/ml[(0.41～1.00)IU/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-3.072 和-7.147，P= 0.002和 0.000)(見圖 3)。

3 討論

近年來，甲狀腺相關(guān)疾病的發(fā)病率逐年增高，甲狀腺激素及相關(guān)項(xiàng)目檢查對甲狀腺疾病的診斷、鑒別診斷及療效評估非常重要。在臨床工作中，為縮短標(biāo)本處理時(shí)間及臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本檢驗(yàn)結(jié)果回報(bào)時(shí)間(Turn Around Time，TAT)，臨床常采用抗凝血來快速分離血漿。為提高檢測的準(zhǔn)確性，明確抗凝血是否會對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響尤為重要。不同的文獻(xiàn)報(bào)道不一，并且缺乏抗凝血對甲狀腺自身抗體檢測影響的相關(guān)研究。

圖2 綠頭管血漿與紅頭管血清中抗過氧化物酶抗體檢測水平

圖3 綠頭管血漿與紅頭管血清中抗甲狀腺球蛋白抗體和促甲狀腺激素受體抗體檢測水平

本研究的結(jié)果顯示：采用肝素鋰抗凝血漿標(biāo)本和無添加血清標(biāo)本檢測 FT3、FT4、T3、T4、TSH、TG 和 A-TPO 時(shí)，結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明當(dāng)患者檢測FT3、FT4、T3、T4、TSH、TG 和 A-TPO 時(shí)，可采用肝素鋰抗凝血體進(jìn)行分析。

TRAb 是針對促甲狀腺素受體(TSHR)的自身抗體，與 Graves 病(GD)和自身免疫性甲狀腺功能減退癥的發(fā)病密切相關(guān)。目前，TRAb 的檢測主要應(yīng)用于 GD 的診斷以及治療方案的選擇，連續(xù)監(jiān)測TRAb 還可以反映抗甲狀腺藥物的療效以及預(yù)測復(fù)發(fā)，因此，TRAb 檢測結(jié)果可影響臨床醫(yī)生對患者的診斷、治療和預(yù)后判斷。A-TG 是自身免疫性甲狀腺疾病病人血清中的一種常見自身抗體，臨床上常應(yīng)用于橋本氏甲狀腺炎等自身免疫性甲狀腺疾病的篩選診斷，也是A-TG陽性甲亢患者 I131治療后發(fā)生甲減的主要預(yù)測因子[5]，本研究結(jié)果顯示：采用肝素鋰抗凝血 TRAb和A-TG檢測結(jié)果明顯高于血清樣本，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P< 0.05)。我們認(rèn)為：當(dāng)患者檢查甲功有 TRAb和A-TG項(xiàng)目時(shí)，不能采用肝素鋰抗凝血漿樣本代替血清樣本，應(yīng)該使用無添加劑的紅頭管。

綜上所述，對于 FT3、FT4、T3、T4、TSH、TG 和 A-TPO，必要時(shí)可采用肝素鋰抗凝血漿樣本縮短標(biāo)本處理時(shí)間以提高檢測時(shí)效性，測定 TRAb 以及 A-TG 時(shí)只能采用血清樣本以保證準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。然而，肝素鋰影響 TRAb 及 A-TG 檢測結(jié)果的機(jī)制尚不清楚，還需進(jìn)一步研究。