分化型甲狀腺癌患者的NIS表達(dá)情況及其與甲狀腺超聲特征的關(guān)系

呂彥利,康秀梅,岳勝南,王燕

鄭州市人民醫(yī)院超聲科,鄭州4500000

甲狀腺癌是一種常見的內(nèi)分泌系統(tǒng)惡性腫瘤,占所有惡性腫瘤的1%,且發(fā)病率呈逐年遞增趨勢(shì),根據(jù)分化程度,可以將其分為分化型甲狀腺癌和未分化型甲狀腺癌,分化型甲狀腺癌又可以根據(jù)組織學(xué)來源分為甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)和甲狀腺濾泡狀癌(follicular thyroid carcinoma,FTC)[1-3].鈉/碘轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(sodium/iodide symporter,NIS)是一種跨膜蛋白,近年來隨著對(duì)NIS基因序列以及分子結(jié)構(gòu)的深入研究,發(fā)現(xiàn)其表達(dá)水平與甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展有著密切的關(guān)系[4].超聲檢查具有操作方便、及時(shí)、準(zhǔn)確等特點(diǎn),在臨床中已獲得廣泛應(yīng)用.隨著高分辨率彩超儀的普及,超聲檢查逐漸成為診斷甲狀腺癌的首選方法,目前超聲診斷良惡性甲狀腺疾病主要是通過觀察病灶形態(tài)、邊界、回聲強(qiáng)度以及血流分布[5-7].本研究通過檢測甲狀腺結(jié)節(jié)、PTC和FTC患者中NIS的表達(dá)情況,分析NIS表達(dá)與甲狀腺超聲特征的關(guān)系,旨在為分化型甲狀腺癌的診斷和治療提供依據(jù),現(xiàn)報(bào)道如下.

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2016年2月至2017年2月于鄭州市人民醫(yī)院治療的甲狀腺結(jié)節(jié)或甲狀腺癌患者的臨床資料.納入標(biāo)準(zhǔn):①經(jīng)甲狀腺結(jié)節(jié)和分化型甲狀腺癌診治指南(2006年版)[8]確診為甲狀腺結(jié)節(jié)或PTC或FTC;②接受過彩色多普勒超聲檢查.排除標(biāo)準(zhǔn):合并其他重大疾病的患者.根據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn),本研究共納入45例甲狀腺結(jié)節(jié)患者(甲狀腺結(jié)節(jié)組)、51例PTC患者(PTC組)和21例FTC患者(FTC組).甲狀腺結(jié)節(jié)組中,男12例,女33例;年齡 39～59歲,平均(43.2±2.8)歲.PTC組中,男20例,女31例;年齡35～63歲,平均(46.1±3.3)歲.FTC組中,男6例,女15例;年齡36～64歲,平均(48.1±3.1)歲.3組患者的年齡和性別比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性.

1.2 免疫組織化學(xué)檢測

將石蠟切片脫蠟、水化,使用雙蒸水沖洗兩次,采用3%的雙氧水對(duì)內(nèi)源性過氧化氫酶進(jìn)行滅活,置于磷酸鹽緩沖液中,微波加熱進(jìn)行抗原修復(fù),滴加兔抗人NIS多克隆抗體,室溫孵育1 h,然后滴加兔抗鼠多克隆抗體,室溫孵育30 min,滴加二氨基聯(lián)苯胺(diaminobenzidine,DAB)進(jìn)行顯色,然后自來水沖洗終止染色,采用蘇木素復(fù)染1～2 min,使用梯度酒精脫水,二甲苯透明,然后封片,顯微鏡下觀察.

1.3 結(jié)果判斷

按照Soslow等[9]提出的方法對(duì)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果進(jìn)行評(píng)分.根據(jù)染色程度進(jìn)行評(píng)分:未染色為0分,淺黃色為1分,黃色為2分,棕黃色為3.根據(jù)陽性細(xì)胞比例進(jìn)行評(píng)分:0分,陽性細(xì)胞比例為0;1分,陽性細(xì)胞比例為1%～25%;2分,陽性細(xì)胞比例為26%～50%;3分,陽性細(xì)胞比例為51%～75%;4分,陽性細(xì)胞比例為76%～100%.每個(gè)切片選取5個(gè)視野,取平均值.每張切片的最后得分為兩項(xiàng)評(píng)分之和,免疫組化評(píng)分(immunohistochemical score,IHS)>6分為陽性.

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0軟件對(duì)-數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析.計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和率(%)表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法.以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.

2 結(jié)果

2.1 3組患者NIS表達(dá)情況和IHS評(píng)分的比較

PTC組和FTC組患者的NIS陽性表達(dá)率分別為72.5%(37/51)和66.7%(14/21),均高于甲狀腺結(jié)節(jié)組的24.4%(11/45),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);PTC組和FTC組患者的NIS陽性表達(dá)率比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05).PTC組患者的IHS評(píng)分為(7.83±0.34)分,高于FTC組的(5.29±0.26)分,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);甲狀腺結(jié)節(jié)組患者的IHS評(píng)分為(3.07±0.24)分,低于PTC組和FTC組患者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05).

2.2 PTC組和FTC組患者甲狀腺超聲特征的比較

甲狀腺超聲結(jié)果顯示,FTC組患者的腫瘤直徑為(1.77±0.10)cm,大于PTC組患者的(1.68±0.11)cm,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05).兩組患者的頸部淋巴結(jié)腫大情況比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);兩組患者在回聲、形態(tài)、邊界、鈣化以及血流方面比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表1).

表1 PTC組和FTC組患者甲狀腺超聲特征的比較

2.3 PTC組和FTC組患者NIS表達(dá)情況與甲狀腺超聲特征的關(guān)系

PTC組中,NIS陽性表達(dá)患者的腫瘤直徑為(1.70±0.11)cm,明顯大于NIS陰性表達(dá)患者的(1.64±0.10)cm,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01).FTC組中,NIS陽性表達(dá)和陰性表達(dá)患者的腫瘤直徑分別為(1.77±0.12)cm和(1.76±0.09)cm,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05).PTC組中,NIS陽性表達(dá)和陰性表達(dá)患者在回聲、形態(tài)、邊界、鈣化以及頸部淋巴結(jié)腫大方面比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);而血流方面比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),NIS陽性表達(dá)患者血流表現(xiàn)以點(diǎn)條狀為主,NIS陰性表達(dá)患者則以血流豐富為主.FTC組中,NIS陽性表達(dá)和陰性表達(dá)患者的上述甲狀腺超聲特征比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表2).

表2 PTC組和FTC組患者的超聲特征和NIS蛋白表達(dá)情況[n(%)]

3 討論

NIS作為一種跨膜蛋白,含有13個(gè)跨膜片段,在人體內(nèi)不同組織中均有不同程度的表達(dá),但在甲狀腺中的表達(dá)水平最高,其功能主要是轉(zhuǎn)運(yùn)鈉離子和碘離子,從而為人體合成甲狀腺激素提供原料[10].研究報(bào)道,在不同的甲狀腺疾病中,NIS的表達(dá)水平有所不同[11-13].Lazar等[14]研究報(bào)道,甲狀腺癌患者對(duì)放射性核素的攝取能力較低,這是由NIS低表達(dá)造成的,并且腫瘤分期越高,NIS的表達(dá)水平越低.Dohán[15]則得出了與之相反的結(jié)論,其應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)對(duì)57例甲狀腺惡性腫瘤患者的NIS表達(dá)水平進(jìn)行檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn)超過60%的甲狀腺癌組織的NIS表達(dá)水平與正常組織相當(dāng),甚至超過正常組織.Saito等[16]采用蛋白質(zhì)免疫印跡法對(duì)PTC患者的NIS表達(dá)水平進(jìn)行檢測,發(fā)現(xiàn)甲狀腺癌中NIS出現(xiàn)了過表達(dá),分化良好的甲狀腺癌組織的NIS表達(dá)水平高于分化較差的甲狀腺癌組織,且NIS在未分化癌中不表達(dá).也有研究認(rèn)為,不同病理分型甲狀腺癌患者的NIS表達(dá)水平也有不同,其中乳頭狀癌中的NIS表達(dá)水平最高,其次是濾泡狀癌,而濾泡型乳頭狀癌中NIS的表達(dá)水平最低[17].NIS不能正確定位于甲狀腺濾泡基底膜,可能是造成131I治療效果不佳的主要原因.本研究通過免疫組織化學(xué)方法檢測甲狀腺結(jié)節(jié)、PTC和FTC患者中NIS的表達(dá)水平,結(jié)果顯示PTC組和FTC組患者的NIS陽性表達(dá)率均高于甲狀腺結(jié)節(jié)組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);PTC組患者的IHS評(píng)分高于FTC組,PTC組和FTC組患者的IHS評(píng)分均高于甲狀腺結(jié)節(jié)組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05).

彩色多普勒超聲的分辨率較高,可以清晰地從形態(tài)上對(duì)甲狀腺病變進(jìn)行評(píng)價(jià),根據(jù)超聲特征可以有效地診斷甲狀腺癌.研究報(bào)道,PTC的超聲特征多表現(xiàn)為單發(fā)、低回聲且伴有鈣化、血流豐富等,FTC的超聲特征多表現(xiàn)為低回聲、不均質(zhì)腫塊等[18],未分化癌的超聲表現(xiàn)為體積大、回聲多樣化、出現(xiàn)鈣化等[19].鈣化在甲狀腺超聲圖像中最為常見,研究表明,微鈣化、低回聲、形態(tài)不規(guī)則以及邊界不清晰是甲狀腺惡性腫瘤的征象[20].本研究中彩色多普勒超聲檢查結(jié)果顯示,FTC組患者的腫瘤直徑大于PTC組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);兩組患者在回聲、形態(tài)、邊界、鈣化以及血流方面比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05).提示術(shù)前彩色多普勒超聲可以有效地對(duì)PTC和FTC進(jìn)行鑒別.PTC組中,NIS陽性表達(dá)和陰性表達(dá)患者在腫瘤直徑和血流方面比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);NIS陽性表達(dá)患者的腫瘤直徑大于NIS陰性表達(dá)的患者,NIS陽性表達(dá)患者的血流表現(xiàn)以點(diǎn)條狀為主,NIS陰性表達(dá)患者則以血流豐富為主.提示NIS表達(dá)情況與血流豐富程度和腫瘤直徑相關(guān).FTC組中,NIS陽性表達(dá)和陰性表達(dá)患者的上述甲狀腺超聲特征比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05).

綜上所述,術(shù)前采用彩色多普勒超聲可以有效鑒別PTC和FTC.盡管NIS陽性表達(dá)和陰性表達(dá)的甲狀腺癌患者在血流方面存在差異,但本研究樣本量較少,尚不足以證明超聲可以預(yù)測分化型甲狀腺癌組織中NIS的表達(dá)情況,有待于進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行證實(shí).