• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    仔豬腸道發(fā)育和氨基酸營(yíng)養(yǎng)調(diào)控機(jī)制

    2018-11-28 09:19:24譚碧娥王婧印遇龍

    譚碧娥,王婧,印遇龍

    (中國(guó)科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所,亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)過(guò)程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖南 長(zhǎng)沙 410125)

    腸道生長(zhǎng)是仔豬生長(zhǎng)發(fā)育的核心和快速生長(zhǎng)的基礎(chǔ)。腸道是消化和吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的主要場(chǎng)所,也是抵抗病原體的重要屏障。由于仔豬的腸道發(fā)育不夠健全,早期斷奶極易引起仔豬腸道黏膜屏障損傷及消化功能紊亂,繼而導(dǎo)致自由采食量下降,能量攝入不足,腹瀉,甚至死亡。通過(guò)優(yōu)化仔豬日糧營(yíng)養(yǎng)水平促進(jìn)腸道發(fā)育,改善腸道黏膜損傷,是緩解仔豬早期斷奶應(yīng)激的有效途徑[1]。氨基酸是小腸優(yōu)先利用的重要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),參與了細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中各種重要的生理生化過(guò)程[2],小腸黏膜氨基酸的利用對(duì)腸道發(fā)育和維持腸道健康具有重要作用。

    1 仔豬腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)育和斷奶適應(yīng)性變化規(guī)律

    仔豬腸道的發(fā)育過(guò)程主要分三個(gè)階段:1)胚胎期,腸道的初步形成與生長(zhǎng);2)哺乳期,腸道的快速發(fā)育;3)斷奶期,腸道的損傷與修復(fù)。

    1.1 胚胎期腸道形成與生長(zhǎng)

    腸道的器官發(fā)生始于早期胚胎發(fā)育階段,由內(nèi)胚層細(xì)胞遷移形成間質(zhì)細(xì)胞環(huán)繞的簡(jiǎn)單腸管,且腸管壁層存在增殖細(xì)胞[3]。隨后,由未分化細(xì)胞形成的層狀內(nèi)胚層,經(jīng)前端至尾端轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂泻?jiǎn)單柱狀上皮細(xì)胞的新生絨毛,絨毛細(xì)胞繼而分化為具有微絨毛結(jié)構(gòu)、刷狀緣水解酶以及營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)運(yùn)載體的腸道上皮細(xì)胞。增殖細(xì)胞在初生絨毛之間的區(qū)域聚集,并侵入基底間質(zhì)區(qū)形成原始隱窩[4]。隱窩中含有多能干細(xì)胞,在隱窩底部增殖,并沿著隱窩—絨毛軸遷移至絨毛頂端,在此過(guò)程中分化為吸收型上皮細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞[5]。此外,腸道上皮還存在M細(xì)胞和塔夫細(xì)胞[6]。絨毛由分化的腸上皮細(xì)胞排列形成后,胎兒開(kāi)始吞咽并消化羊水,胎兒從羊水中吸取自身所需的10%~14%的營(yíng)養(yǎng)和能量用于自身組織合成及發(fā)育[7]。除了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),羊水中還包含了具有生物活性的非營(yíng)養(yǎng)性物質(zhì),如生長(zhǎng)因子和激素,對(duì)調(diào)節(jié)胎兒腸道發(fā)育至關(guān)重要。

    1.2 哺乳仔豬腸道的發(fā)育

    新生仔豬為了適應(yīng)由宮內(nèi)生長(zhǎng)環(huán)境到獨(dú)立的宮外生長(zhǎng)環(huán)境的轉(zhuǎn)變,腸道結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生了巨大的改變。仔豬出生后,初乳刺激腸道快速生長(zhǎng),主要表現(xiàn)為腸道DNA合成和蛋白含量增加,細(xì)胞周轉(zhuǎn)速率下降,并伴隨著絨毛及微絨毛表面積的擴(kuò)張。出生后24 h小腸相對(duì)體重之比是出生時(shí)的2倍[8],腸道隱窩深度與絨毛高度分別增加了40%和30%[9],腸道消化面積增加了50%[10]。在初生的2~3天中,腸道上皮細(xì)胞攝取初乳中的蛋白質(zhì)(免疫球蛋白、激素、生長(zhǎng)因子等)并儲(chǔ)存在消化液泡中,使細(xì)胞體積急劇增大。隨著腸道逐漸成熟,消化液泡由近端空腸至遠(yuǎn)端回腸慢慢消失,這一過(guò)程大約持續(xù)2~3周[11]。腸道通過(guò)折疊增加自身表面積,腸黏膜折疊形成縱向的環(huán)形皺襞,每個(gè)皺襞中包含多個(gè)隱窩—絨毛單位。仔豬出生后1周,腸黏膜血流量增加,絨毛長(zhǎng)度也隨之提高,且絨毛表面逐漸出現(xiàn)大量的橫向溝紋,但隨著仔豬日齡的增加,絨毛變短變粗,絨毛橫向溝紋的數(shù)量與深度減少[11]。Wang等[12]發(fā)現(xiàn),仔豬空腸微絨毛在1日齡時(shí)長(zhǎng)、細(xì)且稀疏,隨著日齡的增長(zhǎng)絨毛逐漸變?yōu)槎?、粗且密集,同時(shí)腸道杯狀細(xì)胞數(shù)逐漸增加(圖1)。仔豬14日齡時(shí),絨毛由初生時(shí)的指狀變?yōu)樯酄?,隱窩深度進(jìn)一步加深,絨毛表面與7日齡相比變得光滑[13]。

    1.3 斷奶仔豬腸道的損傷修復(fù)

    圖1 不同日齡哺乳仔豬(1、7、14、21日齡)和14日齡早期斷奶仔豬(斷奶后第1、3、5、7天)空腸微絨毛結(jié)構(gòu)(掃描電鏡,放大倍數(shù)× 200)(引自:Wang等[12])Fig. 1 The structure of jejunal microvillus in 1, 7, 14, 21-d-old suckling piglets and piglets on days 1, 3, 5, 7 post-weaning at 14 d of age (scanning electron microscopy, magnification × 200) (Quoted from Wang et al. [12])

    在斷奶階段,仔豬腸道面臨著許多應(yīng)激因子,影響著腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)和生長(zhǎng)發(fā)育[9]。斷奶應(yīng)激造成腸黏膜結(jié)構(gòu)和功能損傷,誘導(dǎo)腸道紊亂和腹瀉[14-15]。在斷奶后的前2天,腸黏膜相對(duì)重量(相對(duì)于體重)可下降20%~30%[16],腸黏膜屏障損傷最嚴(yán)重發(fā)生在斷奶后的第3~5天[14,17]。腸黏膜屏障受損主要表現(xiàn)為腸道絨毛萎縮,仔豬21日齡斷奶后24 h內(nèi),絨毛高度降低了75%,絨毛高度與隱窩深度比也隨之降低。14日齡斷奶仔豬空腸和回腸絨毛的高度和密度在斷奶第3 天明顯降低,隨后在第7天逐漸恢復(fù)(圖1)。同時(shí),14日齡早期斷奶導(dǎo)致了斷奶后第3天和第5天空腸中E-cadherin和occludin的基因表達(dá)量以及occludin和ZO-1的蛋白水平顯著降低,腸道屏障功能受損[12]。伴隨著絨毛高度的降低和隱窩深度的增加,腸道刷狀緣酶活也在斷奶后的第4~5天降至最低值[18]。

    腸道黏膜具有損傷后快速修復(fù)的能力[19]。腸黏膜屏障在斷奶后第5~10天才恢復(fù)至正常水平[16]。Hu等[14]發(fā)現(xiàn),絨毛高度和隱窩深度在斷奶后的第14天可恢復(fù)至斷奶前水平。仔豬腸道損傷后的修復(fù)是一個(gè)十分復(fù)雜的過(guò)程,包括了腸上皮細(xì)胞的重建、細(xì)胞增殖、凋亡、血管再生與黏膜重塑[20]。小腸絨毛的萎縮主要是由于腸道細(xì)胞增殖速度緩慢,以及大量成熟腸細(xì)胞在絨毛頂端脫落。腸道絨毛高度的降低導(dǎo)致了腸道上皮細(xì)胞從隱窩底部至絨毛頂端遷移距離 (EMD)縮短,EMD在斷奶第5天時(shí)顯著降低。EMD的縮短使腸上皮細(xì)胞遷移速度加快,與斷奶第0天比,腸上皮細(xì)胞遷移速度在斷奶后第2、4、8天時(shí)分別加快了1.86、3.42和2.60倍[21]。腸黏膜損傷的快速重建,主要依靠已分化的腸上皮細(xì)胞而非隱窩區(qū)域未分化的細(xì)胞[22]。鉀離子通道的激活與多種細(xì)胞的生長(zhǎng)或分化有關(guān)[23]。斷奶后鉀離子通道表達(dá)量的增加,在損傷后分化的腸上皮細(xì)胞的遷移過(guò)程中具有重要作用[12,22]。細(xì)胞內(nèi)多胺與腸黏膜的生長(zhǎng)和修復(fù)進(jìn)程密切相關(guān)[24]。仔豬斷奶后的第1~3天空腸和回腸中亞精胺和精胺濃度增加,腸道多胺合成過(guò)程中的第一限速酶ODC基因和蛋白表達(dá)在斷奶第3天顯著升高[12],可以作為腸道損傷修復(fù)的指征。

    2 仔豬腸道黏膜上皮細(xì)胞氨基酸的代謝利用

    2.1 腸道氨基酸代謝

    日糧蛋白質(zhì)在被運(yùn)輸?shù)侥c細(xì)胞之前在消化道中被水解成小肽和游離AA[25]。日糧中20%~97%的AA被小腸首過(guò)代謝,只有低于20%的AA用于腸黏膜蛋白質(zhì)合成[3]。進(jìn)入腸道中的幾乎所有谷氨酸和天冬氨酸,67%~70%的谷氨酰胺,30%~40%的脯氨酸和35%的支鏈鏈(BCAA)被豬小腸分解[26-27]。許多研究結(jié)果表明,氨基酸而非血糖是小腸黏膜的主要能量來(lái)源[2]。Reeds等[28]采用外科手術(shù)和同位素技術(shù)研究發(fā)現(xiàn),盡管小腸黏膜細(xì)胞攝取了大量的葡萄糖,但大多用于糖原的合成,僅5%被黏膜利用。日糧谷氨酰胺及與谷氨酰胺代謝有關(guān)的天冬氨酸、谷氨酸不僅為小腸黏膜提供能量,也是細(xì)胞的蛋白質(zhì)、核酸及氧化型輔酶Ⅱ(NADP+)等物質(zhì)合成的前體和促進(jìn)劑,對(duì)維持黏膜的正常形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能具有重要作用[28]。體外培養(yǎng)的豬腸上皮細(xì)胞利用谷氨酰胺的基礎(chǔ)代謝和ATP生成均高于葡萄糖,驗(yàn)證了腸上皮細(xì)胞優(yōu)先利用谷氨酰胺作為能量來(lái)源的結(jié)論[29]。Yao等[30]發(fā)現(xiàn),α-酮戊二酸(AKG)對(duì)腸道功能性氨基酸代謝具有節(jié)約效應(yīng)。作為連接細(xì)胞內(nèi)碳氮代謝的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn),AKG可直接進(jìn)入三羧酸循環(huán)為腸道提供能量并劑量依賴性地抑制腸上皮細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺和谷氨酸的降解,降低丙氨酸、天冬氨酸、氨和二氧化碳等代謝產(chǎn)物的形成,使更多的谷氨酰胺和谷氨酸用于機(jī)體蛋白質(zhì)的合成。腸道內(nèi)的細(xì)菌也會(huì)吸收和降解游離AA和小肽,產(chǎn)生氨、CO2、多胺、核苷酸、蛋白質(zhì)和其他氮源 (包括亞硝酸鹽、硝酸鹽和谷胱甘肽)。腸道細(xì)菌能降解所有的AA,主要涉及小腸中賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、蘇氨酸和組氨酸的分解代謝[31-33]。

    2.2 腸道氨基酸吸收和感應(yīng)

    仔豬出生后3 h內(nèi),單位質(zhì)量腸黏膜中天冬氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸和脯氨酸的吸收率顯著下降;隨后,脯氨酸吸收率顯著增加,至7日齡達(dá)到最大值后逐漸降低,至28日齡脯氨酸吸收率趨于穩(wěn)定水平。氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)速度的降低可能是由于腸黏膜單位面積內(nèi)氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體的減少造成的,Yang[34]發(fā)現(xiàn)空腸中氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體B0AT1、ATB0和EAAC1的表達(dá)水平隨著仔豬年齡增加而減少。但是天冬氨酸、蛋氨酸和賴氨酸的吸收率隨著日齡的增長(zhǎng)顯著增加,至28日齡增加至最高值[35]。斷奶應(yīng)激降低了所有氨基酸的攝取率。仔豬出生后腸道的快速生長(zhǎng)促進(jìn)了腸道總氨基酸吸收能力的增加,斷奶后出現(xiàn)的腸道絨毛萎縮和黏膜損傷會(huì)導(dǎo)致腸道氨基酸攝取率的短暫下降[35]。

    腸道氨基酸的吸收由氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體介導(dǎo)。氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體可以調(diào)控氨基酸進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)作用于相應(yīng)的受體,或直接啟動(dòng)細(xì)胞信號(hào),調(diào)控細(xì)胞內(nèi)生理過(guò)程。Na+依賴性中性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體SNAT2作為近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)感受體的典型代表,在調(diào)控氨基酸信號(hào)感應(yīng)中發(fā)揮重要作用[36]。氨基酸饑餓、精氨酸、谷氨酸或亮氨酸能誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞SNAT2的表達(dá),而谷氨酰胺抑制其表達(dá);采用mTOR RT2Profiler PCR Array分析發(fā)現(xiàn),SNAT2抑制后主要調(diào)控mTORC1上游調(diào)控因子;抑制SNAT2顯著降低細(xì)胞增殖和蛋白合成[36]。PATs、CasR和T1R1/T1R3也是重要的氨基酸感應(yīng)受體。PAT1不僅能夠?qū)獍被嶂苯愚D(zhuǎn)運(yùn)入胞漿內(nèi),還能夠作用于mTORC1[37]。PAT1能促進(jìn)質(zhì)子依賴性氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn),促進(jìn)腸腔蛋白質(zhì)在腸道刷狀膜緣酸性小環(huán)境的消化[38]。T1R1/T1R3作為直接感受機(jī)體能量狀態(tài)和胞外氨基酸濃度的感受器,敲除后會(huì)直接影響氨基酸濃度作為信號(hào)傳遞到mTORC的過(guò)程[39]。此外,腸道微生物和宿主通過(guò)代謝感應(yīng)也能調(diào)控氨基酸的利用。Ren等[40]發(fā)現(xiàn),病原菌ETEC感染情況下,微生物發(fā)生了顯著的變化,L.lactissubsp.lactis增加,進(jìn)而通過(guò)產(chǎn)生γ氨基丁酸(GABA)激活腸道免疫信號(hào);GABA轉(zhuǎn)運(yùn)載體2通過(guò)調(diào)控GABA從細(xì)胞外轉(zhuǎn)至胞內(nèi)而終止GABA信號(hào)(圖2)。

    圖2 腸道微生物和宿主互作調(diào)控腸道免疫反應(yīng)機(jī)制Fig. 2 The mechanisms of interactive regulation of intestinal microbe and host on immune responses

    3 功能性氨基酸對(duì)仔豬腸道結(jié)構(gòu)和功能的調(diào)控作用

    氨基酸在腸道的代謝對(duì)營(yíng)養(yǎng)和健康有重要意義[41]。本課題組大量研究證明,氨基酸尤其是功能性氨基酸在黏膜代謝和損傷修復(fù)中具有關(guān)鍵作用[29,42-47]。每天食入的谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸和血液谷氨酰胺進(jìn)入腸黏膜后,成為小腸能量的主要來(lái)源,為小腸養(yǎng)分的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)和蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)提供足量的ATP。在腸黏膜應(yīng)激損傷修復(fù)過(guò)程中,精氨酸、谷氨酰胺和天冬氨酸等可作為線粒體能量基質(zhì)被利用,促進(jìn)腸上皮細(xì)胞DNA合成和損傷修復(fù)[48]。Xiao等[49]研究發(fā)現(xiàn),N-乙酰-L-半胱氨酸能促進(jìn)H2O2誘導(dǎo)損傷的腸上皮細(xì)胞的線粒體生物合成,改善細(xì)胞TCA循環(huán),減少細(xì)胞凋亡和死亡(圖3)。

    精氨酸、谷氨酰胺和脯氨酸是合成多胺的前體物,多胺與DNA、RNA以及蛋白質(zhì)的生物代謝有關(guān),在細(xì)胞分化、細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用,對(duì)新生仔豬細(xì)胞增殖和分化至關(guān)重要,是小腸黏膜生長(zhǎng)、發(fā)育、成熟、適應(yīng)恢復(fù)所必需的物質(zhì)[50],可促進(jìn)腸腺隱窩細(xì)胞的增殖、分化和移行,促進(jìn)腸黏膜的損傷修復(fù)[22]。Wang等[51]研究發(fā)現(xiàn),哺乳仔豬灌服腐胺和脯氨酸提高斷奶后小腸黏膜多胺濃度和ODC蛋白表達(dá),促進(jìn)小腸黏膜細(xì)胞增殖和分化,從而促進(jìn)黏膜成熟;脯氨酸顯著提高空腸ZO-1、occludin和claudin-3以及回腸 ZO-1和claudin-1的蛋白表達(dá),促進(jìn)黏膜屏障功能。

    圖3 氨基酸促進(jìn)腸道DNA合成和蛋白質(zhì)合成的通路Fig. 3 The pathway of amino acids improving DNA and protein synthesis in the intestine

    mTOR可調(diào)控氨基酸利用,從而作為腸道功能調(diào)控的靶標(biāo),調(diào)控作用包括蛋白質(zhì)合成、免疫反應(yīng)、線粒體功能、細(xì)胞增殖分化凋亡等[40,42,52-53]。精氨酸和Ala-Gln等通過(guò)激活mTOR信號(hào)通路促進(jìn)腸上皮細(xì)胞質(zhì)蛋白質(zhì)合成(圖3),同時(shí)抑制了泛素蛋白酶途徑UBE3A基因表達(dá)而抑制蛋白質(zhì)降解,從而促進(jìn)損傷修復(fù)[42,53]。精氨酸和GABA等可激活mTOR通路,調(diào)控機(jī)體免疫功能[40]。精氨酸通過(guò)調(diào)控細(xì)胞因子和抗體產(chǎn)生提高腸道免疫功能[52];通過(guò)抑制了TLR4活性和NFκB的磷酸化,從而抑制LPS誘導(dǎo)的TLR4-NFκB信號(hào)通路,緩解腸上皮細(xì)胞炎癥損傷[42]。GABA能被Th17細(xì)胞通過(guò)GABA受體感應(yīng),從而激活mTOR信號(hào)通路,通過(guò)mTORS6K1-EGR2-GFI1通路影響腸道的Th17的活化以及IL-17的表達(dá);抗生素處理情況下,補(bǔ)充高劑量GABA降低了ETEC感染下IL-7的表達(dá)[40](圖2)。

    腸道氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)感受體作為氨基酸營(yíng)養(yǎng)信號(hào)傳導(dǎo)的重要環(huán)節(jié),對(duì)腸道功能維持發(fā)揮重要作用。轉(zhuǎn)運(yùn)感受體感應(yīng)胞外的刺激及激活胞內(nèi)信號(hào), 影響腸道上皮細(xì)胞的增殖分化與功能[54],還與腸道防御機(jī)制相關(guān)。其中鈣敏感受體CaSR在維持和恢復(fù)腸道穩(wěn)態(tài)方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用,激活CaSR可以刺激腸黏膜屏障再生[55]。芳香族氨基酸包括L-色氨酸、L-苯丙氨酸和L-酪氨酸作為CaSR的變構(gòu)激動(dòng)劑,通過(guò)激活CaSR信號(hào)通路緩解LPS誘導(dǎo)的仔豬腸道炎癥反應(yīng)[56](圖4)。在腸細(xì)胞中芳香族L-色氨酸能夠通過(guò)激活CaSR信號(hào)通路募集β抑制蛋白2抑制NF-κB信號(hào)通路,阻斷炎性信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),從而發(fā)揮抗炎的作用[57]。

    圖4 色氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸(TPT)調(diào)控腸道炎癥反應(yīng)的機(jī)制Fig. 4 The mechanisms of tryptophan, phenylalanine and tyrosine (TPT) regulating intestinal inflammatory response

    4 展望

    腸道氨基酸的代謝對(duì)腸道發(fā)育和健康調(diào)控具有重要意義。腸道氨基酸的利用過(guò)程涉及胃腸道對(duì)蛋白質(zhì)的消化、腸道及其微生物對(duì)蛋白質(zhì)/氨基酸的代謝利用等環(huán)節(jié),需要進(jìn)一步深入研究神經(jīng)內(nèi)分泌對(duì)上述生理過(guò)程的調(diào)控。采用整合生理學(xué)方法研究腸道—肝臟—肌肉等多器官的協(xié)同代謝網(wǎng)絡(luò),以及神經(jīng)內(nèi)分泌對(duì)代謝網(wǎng)絡(luò)的整合調(diào)控機(jī)制;將微生物與宿主作為一個(gè)整體開(kāi)展研究,在腸道及其微生物互作影響蛋白質(zhì)/氨基酸利用方面取得理論突破。此外,深入研究氨基酸感應(yīng)信號(hào)途徑,鑒定新的分子調(diào)節(jié)靶點(diǎn),為腸道代謝紊亂等營(yíng)養(yǎng)代謝失衡疾病的調(diào)控提供依據(jù)。靶向開(kāi)發(fā)營(yíng)養(yǎng)調(diào)控劑,研究其對(duì)仔豬腸道發(fā)育和健康的調(diào)控機(jī)制,為提高仔豬生產(chǎn)力提供新方法和技術(shù)。

    啦啦啦视频在线资源免费观看| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 久久鲁丝午夜福利片| 男女免费视频国产| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲精品国产av蜜桃| 亚洲精品一二三| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 99热国产这里只有精品6| 两个人看的免费小视频| 婷婷成人精品国产| 啦啦啦 在线观看视频| 欧美日韩成人在线一区二区| 青春草亚洲视频在线观看| 国产精品久久久久成人av| 亚洲图色成人| 久久久国产精品麻豆| 嫁个100分男人电影在线观看 | 一二三四社区在线视频社区8| 亚洲av欧美aⅴ国产| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 国产成人av激情在线播放| 日韩 亚洲 欧美在线| 久久狼人影院| 永久免费av网站大全| 少妇人妻久久综合中文| 人妻人人澡人人爽人人| 亚洲第一av免费看| 满18在线观看网站| √禁漫天堂资源中文www| 免费日韩欧美在线观看| 青春草视频在线免费观看| 久久久久精品人妻al黑| 午夜老司机福利片| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 亚洲自偷自拍图片 自拍| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 成年av动漫网址| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 久久99精品国语久久久| 高潮久久久久久久久久久不卡| 麻豆乱淫一区二区| a级片在线免费高清观看视频| 一级片免费观看大全| 久久久国产一区二区| www日本在线高清视频| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 男女免费视频国产| 中文字幕最新亚洲高清| 国产精品久久久久久精品古装| 亚洲男人天堂网一区| 免费高清在线观看视频在线观看| 天堂8中文在线网| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲男人天堂网一区| 亚洲美女黄色视频免费看| 国产精品一区二区免费欧美 | 国产精品二区激情视频| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 国产av国产精品国产| 免费看av在线观看网站| 在线天堂中文资源库| 男人操女人黄网站| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 亚洲七黄色美女视频| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 欧美乱码精品一区二区三区| 国产成人系列免费观看| 亚洲七黄色美女视频| 一边亲一边摸免费视频| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 91精品三级在线观看| 美女主播在线视频| 人妻人人澡人人爽人人| h视频一区二区三区| 久久久久久久久久久久大奶| 久久久久久久久免费视频了| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 叶爱在线成人免费视频播放| 大码成人一级视频| 日韩 亚洲 欧美在线| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 亚洲国产欧美一区二区综合| 人人澡人人妻人| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 国产高清视频在线播放一区 | 男女下面插进去视频免费观看| 大片电影免费在线观看免费| 激情视频va一区二区三区| 高清视频免费观看一区二区| 日本wwww免费看| 最近手机中文字幕大全| 亚洲人成网站在线观看播放| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 亚洲少妇的诱惑av| 1024视频免费在线观看| xxxhd国产人妻xxx| 丝袜喷水一区| 久久久亚洲精品成人影院| 国产高清videossex| 亚洲专区国产一区二区| 国产一区二区三区综合在线观看| 人成视频在线观看免费观看| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 日本av手机在线免费观看| 999精品在线视频| 在线天堂中文资源库| 人人妻人人澡人人看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 中文字幕亚洲精品专区| 国产免费福利视频在线观看| 91老司机精品| 丁香六月天网| 一级片免费观看大全| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 91字幕亚洲| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 欧美少妇被猛烈插入视频| 性色av一级| 亚洲精品美女久久av网站| 老司机午夜十八禁免费视频| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产一区有黄有色的免费视频| 国产福利在线免费观看视频| 91老司机精品| 国产在线观看jvid| 日韩大码丰满熟妇| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 无遮挡黄片免费观看| 欧美精品一区二区大全| 免费在线观看日本一区| 新久久久久国产一级毛片| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 国产高清videossex| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产成人精品久久二区二区91| av天堂久久9| 亚洲精品国产av蜜桃| 国产亚洲精品久久久久5区| 欧美国产精品一级二级三级| 亚洲图色成人| 久久精品成人免费网站| 色播在线永久视频| 国产av一区二区精品久久| 日本av免费视频播放| 久久精品国产综合久久久| 亚洲第一av免费看| 一区在线观看完整版| 亚洲中文日韩欧美视频| 男女无遮挡免费网站观看| 国产精品 国内视频| 黄片播放在线免费| 人人妻,人人澡人人爽秒播 | 午夜激情av网站| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 亚洲精品乱久久久久久| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产精品九九99| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 国产一卡二卡三卡精品| av片东京热男人的天堂| 国产精品国产三级国产专区5o| 黄色视频不卡| 国产成人啪精品午夜网站| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 女人久久www免费人成看片| 久久久久国产一级毛片高清牌| 一二三四在线观看免费中文在| 九草在线视频观看| 日本vs欧美在线观看视频| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 日本欧美视频一区| 亚洲av国产av综合av卡| 丝袜美足系列| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 日本五十路高清| 天天操日日干夜夜撸| 精品第一国产精品| 国产xxxxx性猛交| 亚洲熟女精品中文字幕| 一级毛片我不卡| 精品国产一区二区三区四区第35| 视频区图区小说| 曰老女人黄片| 国产免费现黄频在线看| 制服人妻中文乱码| 亚洲欧美色中文字幕在线| 久久九九热精品免费| 啦啦啦在线免费观看视频4| 国产日韩欧美在线精品| 欧美日韩福利视频一区二区| 欧美性长视频在线观看| 成人免费观看视频高清| 欧美大码av| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产伦人伦偷精品视频| 少妇被粗大的猛进出69影院| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 久久久精品94久久精品| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 男人舔女人的私密视频| 午夜福利在线免费观看网站| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 嫩草影视91久久| 亚洲国产欧美一区二区综合| 高清欧美精品videossex| 尾随美女入室| 亚洲综合色网址| 蜜桃国产av成人99| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| svipshipincom国产片| 成年av动漫网址| 日韩av不卡免费在线播放| 久久 成人 亚洲| 日韩精品免费视频一区二区三区| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 精品福利观看| 黑丝袜美女国产一区| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 久久久久久久大尺度免费视频| 大话2 男鬼变身卡| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 久久久欧美国产精品| 精品国产一区二区久久| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | 亚洲国产欧美一区二区综合| 99国产精品一区二区三区| 尾随美女入室| 夫妻午夜视频| 精品亚洲成国产av| 国产精品成人在线| 国产在视频线精品| 大香蕉久久网| 久久国产精品人妻蜜桃| 男人添女人高潮全过程视频| 亚洲伊人久久精品综合| 天堂俺去俺来也www色官网| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 国产成人精品久久二区二区免费| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 久久久欧美国产精品| 亚洲av男天堂| 三上悠亚av全集在线观看| 男女边摸边吃奶| 亚洲国产欧美网| 国产一卡二卡三卡精品| 777米奇影视久久| 久久久久久人人人人人| 国产精品一国产av| 天堂俺去俺来也www色官网| 满18在线观看网站| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 欧美人与善性xxx| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 亚洲国产日韩一区二区| 黑人欧美特级aaaaaa片| 男人添女人高潮全过程视频| 各种免费的搞黄视频| 国产一级毛片在线| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 高清欧美精品videossex| 美女高潮到喷水免费观看| 免费av中文字幕在线| 涩涩av久久男人的天堂| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 一区二区三区激情视频| 日韩一本色道免费dvd| 一本大道久久a久久精品| 国产在线视频一区二区| 我的亚洲天堂| 欧美黑人欧美精品刺激| 国产一区二区 视频在线| 成年动漫av网址| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 麻豆av在线久日| 一级毛片我不卡| 岛国毛片在线播放| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 久久毛片免费看一区二区三区| 亚洲免费av在线视频| 午夜精品国产一区二区电影| 香蕉国产在线看| 久久久久国产精品人妻一区二区| 满18在线观看网站| www日本在线高清视频| 午夜福利在线免费观看网站| 日日摸夜夜添夜夜爱| 蜜桃在线观看..| 日韩中文字幕视频在线看片| 三上悠亚av全集在线观看| 国产精品成人在线| 性色av一级| 色精品久久人妻99蜜桃| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 久久青草综合色| 另类亚洲欧美激情| 国产片内射在线| 天天影视国产精品| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 嫩草影视91久久| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产亚洲av高清不卡| 亚洲一码二码三码区别大吗| 老司机影院成人| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 国产老妇伦熟女老妇高清| 免费高清在线观看日韩| 啦啦啦在线免费观看视频4| 人妻一区二区av| √禁漫天堂资源中文www| 日本欧美视频一区| 777米奇影视久久| 日本91视频免费播放| 免费在线观看黄色视频的| 亚洲精品国产区一区二| 国产色视频综合| 麻豆乱淫一区二区| 国产精品偷伦视频观看了| 欧美日韩av久久| 亚洲av日韩在线播放| 欧美日韩国产mv在线观看视频| av有码第一页| 国产成人精品久久二区二区免费| 午夜福利在线免费观看网站| 丰满少妇做爰视频| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 在线观看免费高清a一片| 看免费成人av毛片| 真人做人爱边吃奶动态| 久久久久精品人妻al黑| 国精品久久久久久国模美| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 黑人欧美特级aaaaaa片| 精品少妇黑人巨大在线播放| 国产成人av激情在线播放| 尾随美女入室| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 捣出白浆h1v1| 丁香六月欧美| 女性生殖器流出的白浆| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产精品九九99| 亚洲色图综合在线观看| 久久鲁丝午夜福利片| 久久久久久久精品精品| 黄色视频不卡| 亚洲国产欧美网| 夫妻性生交免费视频一级片| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 国产成人系列免费观看| 日韩大片免费观看网站| 国产在线观看jvid| 国产男女内射视频| 国产精品久久久人人做人人爽| 欧美国产精品一级二级三级| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 两个人看的免费小视频| 亚洲男人天堂网一区| 久久久久久久久免费视频了| 亚洲国产日韩一区二区| 男男h啪啪无遮挡| 午夜福利免费观看在线| 亚洲精品国产av成人精品| 精品国产乱码久久久久久男人| 午夜福利影视在线免费观看| 久久99一区二区三区| 男人爽女人下面视频在线观看| 天天操日日干夜夜撸| 黄色视频在线播放观看不卡| 高清黄色对白视频在线免费看| 在线 av 中文字幕| 亚洲精品自拍成人| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 久久久久久免费高清国产稀缺| 久久性视频一级片| 久久久精品区二区三区| 香蕉国产在线看| 飞空精品影院首页| 国产一区二区在线观看av| 999久久久国产精品视频| 国产成人a∨麻豆精品| 一边摸一边做爽爽视频免费| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 亚洲av美国av| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 老熟女久久久| 免费高清在线观看视频在线观看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 精品亚洲成a人片在线观看| 一级,二级,三级黄色视频| 中文字幕av电影在线播放| 少妇精品久久久久久久| 91国产中文字幕| 亚洲色图综合在线观看| 熟女av电影| 精品国产乱码久久久久久小说| 国产黄色视频一区二区在线观看| 叶爱在线成人免费视频播放| 久久青草综合色| 午夜免费男女啪啪视频观看| 首页视频小说图片口味搜索 | 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 欧美久久黑人一区二区| 欧美在线黄色| 亚洲国产av影院在线观看| 热re99久久精品国产66热6| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲欧美清纯卡通| 啦啦啦 在线观看视频| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 日韩电影二区| 成年女人毛片免费观看观看9 | 九草在线视频观看| 99热网站在线观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 日本一区二区免费在线视频| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| 久久青草综合色| 亚洲第一青青草原| www.精华液| 午夜免费观看性视频| 成年女人毛片免费观看观看9 | 91成人精品电影| 后天国语完整版免费观看| 亚洲熟女毛片儿| 国产成人精品久久二区二区91| 又黄又粗又硬又大视频| 90打野战视频偷拍视频| 我的亚洲天堂| 亚洲视频免费观看视频| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产深夜福利视频在线观看| 日韩大码丰满熟妇| 欧美日韩av久久| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 亚洲,一卡二卡三卡| 熟女av电影| 欧美另类一区| 精品国产一区二区三区四区第35| 久久人人爽人人片av| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 午夜精品国产一区二区电影| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 午夜福利乱码中文字幕| 久久久久久久久免费视频了| 老司机影院毛片| a级毛片黄视频| 久久久久久久久久久久大奶| 老司机靠b影院| 国产成人一区二区三区免费视频网站 | av在线app专区| 亚洲成国产人片在线观看| 天天影视国产精品| 9色porny在线观看| 午夜福利免费观看在线| 老司机影院成人| 亚洲av国产av综合av卡| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲国产欧美在线一区| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 美女福利国产在线| 亚洲黑人精品在线| 晚上一个人看的免费电影| 老司机午夜十八禁免费视频| 两个人免费观看高清视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| kizo精华| 热re99久久国产66热| 免费观看av网站的网址| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 青春草视频在线免费观看| 欧美久久黑人一区二区| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 美女国产高潮福利片在线看| 久久精品亚洲av国产电影网| www.自偷自拍.com| 午夜激情久久久久久久| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 国产黄色免费在线视频| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 国产精品三级大全| 国产一区二区激情短视频 | 精品一品国产午夜福利视频| 国产99久久九九免费精品| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 秋霞在线观看毛片| 极品人妻少妇av视频| 国产主播在线观看一区二区 | 亚洲国产精品一区二区三区在线| 热re99久久精品国产66热6| av片东京热男人的天堂| kizo精华| 丰满少妇做爰视频| 日韩大码丰满熟妇| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产精品一区二区在线不卡| 99精国产麻豆久久婷婷| 亚洲欧美激情在线| 国产97色在线日韩免费| 亚洲国产精品999| 9191精品国产免费久久| 国产黄色免费在线视频| 精品人妻1区二区| 男女国产视频网站| 女性生殖器流出的白浆| 国产黄色视频一区二区在线观看| 视频区图区小说| 欧美黑人精品巨大| 精品少妇内射三级| 视频在线观看一区二区三区| 亚洲精品一区蜜桃| 中国国产av一级| 国产精品一区二区在线观看99| 精品福利观看| 午夜老司机福利片| 午夜免费男女啪啪视频观看| netflix在线观看网站| 亚洲av国产av综合av卡| 成年女人毛片免费观看观看9 | 亚洲精品国产色婷婷电影| 90打野战视频偷拍视频| 一级黄色大片毛片| 99热网站在线观看| 欧美黄色片欧美黄色片| 一本久久精品| 成年人黄色毛片网站| 国产在线观看jvid| 亚洲色图综合在线观看| 男的添女的下面高潮视频| 中文字幕制服av| 国产亚洲欧美精品永久| 女人久久www免费人成看片| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 后天国语完整版免费观看| 国产免费又黄又爽又色| 黄片播放在线免费| 在线看a的网站| 国产成人欧美| 国产激情久久老熟女| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | 久9热在线精品视频| 免费少妇av软件| 国精品久久久久久国模美| av网站免费在线观看视频| 美女视频免费永久观看网站| 日韩av免费高清视频| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 午夜日韩欧美国产| 亚洲一码二码三码区别大吗| 蜜桃国产av成人99| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 久久精品国产亚洲av涩爱| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 在线观看免费午夜福利视频| h视频一区二区三区| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 男人添女人高潮全过程视频| 黄色毛片三级朝国网站| 国产黄色免费在线视频| av在线app专区| 久久热在线av| 久久精品国产亚洲av高清一级| 久久久久国产精品人妻一区二区| 久9热在线精品视频| 午夜免费观看性视频| 午夜91福利影院| 婷婷色麻豆天堂久久| tube8黄色片| 高清不卡的av网站| 亚洲国产欧美一区二区综合| 涩涩av久久男人的天堂| 久久99热这里只频精品6学生| 国产福利在线免费观看视频| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 欧美久久黑人一区二区| 国产福利在线免费观看视频| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 丰满迷人的少妇在线观看| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 成年av动漫网址| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 在线看a的网站| 乱人伦中国视频| 我的亚洲天堂| 日本a在线网址| 午夜精品国产一区二区电影| 国产精品一区二区在线不卡| 国产亚洲精品久久久久5区| 中文字幕亚洲精品专区| 搡老乐熟女国产| 男女之事视频高清在线观看 | 叶爱在线成人免费视频播放| 另类精品久久| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲人成77777在线视频| 又紧又爽又黄一区二区| 极品人妻少妇av视频| 一二三四社区在线视频社区8| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 黑人欧美特级aaaaaa片| av网站免费在线观看视频|