白木香樹干木塊對(duì)小鼠經(jīng)口給藥急性毒性實(shí)驗(yàn)觀察

李春林

摘要：目的 按中華人民共和國衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》規(guī)定的方法研究白木香樹干木塊茶對(duì)小鼠單次經(jīng)口給藥可能產(chǎn)生的的毒性反應(yīng)，評(píng)價(jià)其安全性。方法 將白木香樹干木塊提取物于24 h內(nèi)兩次經(jīng)口灌胃給予昆明種小鼠2.15 g/kg·BW、4.64 g/kg·BW、10 g/kg·BW、21.5 g/kg·BW劑量，并加入空白對(duì)照組，對(duì)小鼠的生存狀態(tài)進(jìn)行觀察和記錄14天。結(jié)果 在14 d天試驗(yàn)期間，小鼠沒有出現(xiàn)任何明顯的中毒跡象，更無死亡。結(jié)論 結(jié)果表明對(duì)昆明種小鼠的經(jīng)口急性毒性劑量大于21.5 g/kg·BW，大于人體攝入量的100倍，可判斷白木香樹干木塊為無毒性食品。

關(guān)鍵詞：白木香樹干木塊茶;經(jīng)口急性毒性;小鼠;霍恩氏法

中圖分類號(hào)：R965.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1007-2349（2018）08-0068-03

Observation on Acute Toxicity Experiment of Oral Administration

of Trunk Brick of Aquilaria Sinensis to Mice

LI Chun-lin

（Peoples Hospital of Maoming City，Maoming 525000，China）

【Abstract】Objective：To study the toxicity of oral administration of trunk brick of Aquilaria sinensis to mice by single oral administration according to the method specified in the Technical Specifications for Health Food Inspection and Evaluation of the Ministry of Health of the Peoples Republic of China，and evaluate its safety.Methods：Kunming mice were given 2.15 g/kg·BW，4.64 g/kg·BW，10 g/kg·BW and 21.5 g/kg·BW of the extract from trunk brick of Aquilaria sinensis by oral gavage twice within 24 h.The dose of 21.5 g/kg·BW was added to the blank control group，and the survival state of the mice was observed and recorded for 14 days.Results：During the 14-day test period，the mice showed no signs of any signs of poisoning and none died.Conclusion：The results show that the acute toxicity oral dose of Kunming mice is more than 21.5 g/kg·BW，which is greater than 100 times of human intake.It can be judged that the trunk brick of Aquilaria sinensis is a non-toxic food.

【Key words】trunk brick of Aquilaria sinensis，oral acute toxicity，mice，Horns method

沉香是中醫(yī)常用藥之一，歷版《中國藥典》均有記載，來源于瑞香科植物沉香Aquilaria agallocha Roxb.和白木香Aquilaria sinensis（Lour.）Gilg含樹脂的木材。自2005年版《中國藥典》開始，沉香的來源只收載白木香一種[1]。沉香味辛、苦，性微溫，具有行氣止痛、溫中止嘔、納氣平喘的功效，用于治療胸腹脹悶疼痛、胃寒嘔吐呃逆、腎虛氣逆喘急[2]。研究發(fā)現(xiàn)，白木香樹干木塊的化學(xué)成分中含有豐富的黃酮類化合物，其中以芫花素和洋芹素-7，4-'二甲醚為主要成分，具有良好的清除羥自由基活性和好的清除超氧陰離子和清除過氧化氫活性，在抗氧化等方面具有良好前景[3]。而現(xiàn)在市場上越來越多的白木香茶出現(xiàn)，其中最受青睞的就是沉香葉和白木香樹干木塊制成的，而白木香樹干木塊制成的沉香茶更為昂貴，顯得更為高端而廣受歡迎，但對(duì)于沉香莖木的毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)方面的研究還很少，國內(nèi)未見報(bào)道。因此，本研究對(duì)白木香樹干木塊進(jìn)行急性毒性檢測[4]，為白木香樹干木塊的進(jìn)一步開發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

樣品白木香樹干木塊（茂名市君元沉香種植有限公司提供），5 g/袋推薦用量為每日1至3袋，約為每日83 mg/kg·BW至250 mg/kg·BW

2 方法

2.1 受試物提取 取白木香葉樹干木塊粉碎為粗粉，100 ℃蒸餾水1000 mL煮10 min后浸泡60 min，用雙層紗布過濾5次，將過濾液合并，然后在80 ℃恒溫水浴箱中濃縮至100 mL。得到1 g/1mL的濃縮液。

2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種健康小鼠，由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供;

2.3 小鼠經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)

2.3.1 預(yù)試驗(yàn) 先取白木香樹干木塊茶常見推薦每日用量250 mg/kg的4倍1000 mg/kg·BW作預(yù)實(shí)驗(yàn)觀察經(jīng)口急性毒性。取10只昆明種小鼠，雌雄各半。小鼠隔夜禁食8 h后，于24 h內(nèi)按動(dòng)物每100 g，體重2 mL體積經(jīng)口灌胃2次，間隔4 h，總灌胃劑量為1000 mg/kg·BW，第2次灌胃4 h后開始投放飼料和飲水，觀察14 d。觀察期內(nèi)小鼠無一死亡，期間小鼠活動(dòng)正常、無震顫流涎、大小便失禁、躁動(dòng)等異常反應(yīng)，毛發(fā)干凈、齊整有光澤，體重保持正常增長。預(yù)實(shí)驗(yàn)無法得到LD50數(shù)據(jù)，并且可判斷：經(jīng)口途徑時(shí)，白木香樹干木塊茶常見推薦用量250 mg/kg·BW的4倍推薦用量1000 mg/kg·BW對(duì)小鼠并無急性毒性作用。

2.3.2 正式實(shí)驗(yàn) 采用霍恩氏法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。選取昆明種小鼠共40只隨機(jī)分為四組，雌雄各半（18.0～22.0 g），實(shí)驗(yàn)前禁食16 h，禁飲水。然后按2.15 g/kg·BW、4.64 g/kg·BW、10 g/kg·BW、21.5 g/kg·BW劑量經(jīng)口給予受試物，灌胃2次，間隔4 h，每次灌胃容量為2 mL/100 g·BW，試物濃度為1 g/mL，第二次灌胃4 h后開始投放飼料和飲水。另取昆明種小鼠10只，雌雄各半（18.0～22.0 g）作為對(duì)照組，操作方法同上灌以蒸餾水。觀察時(shí)間14 d，觀察死亡情況、體重情況及是否有活動(dòng)不能、震顫流涎、大小便失禁、躁動(dòng)、厭食等異常反應(yīng)，并作記錄。

2.3.3 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析與處理 試驗(yàn)結(jié)果均采用SPSS軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。采用SPSS做方差分析，數(shù)據(jù)采用（x±s）表示，組間對(duì)比運(yùn)用方差分析t檢驗(yàn)，得到P<0.05，可知差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 死亡情況 實(shí)驗(yàn)期間小鼠死亡數(shù)為0，見表1。

表1 白木香樹干木塊茶對(duì)小鼠的經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)死亡情況

3.2 小鼠行為情況 期間小鼠并未出現(xiàn)斷尾、舉尾、聲音異常、身體震顫、覓食、進(jìn)水、排便異常等生理現(xiàn)象，未見腹瀉、便秘、眼屎分泌、流血、流淚、流鼻涕、呼吸困難和毛色糙亂等異常小鼠活動(dòng)正常靈活、目光有神、無震顫流涎、大小便失禁、躁動(dòng)等異常反應(yīng)，毛發(fā)干凈、齊整有光澤，飲水進(jìn)食無異，無明顯中毒跡象。見表2。

表2 白木香樹干木塊茶對(duì)小鼠的經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)異常情況

3.3 體重情況 體重保持正常增長。見表3。

表3 白木香樹干木塊對(duì)小鼠的經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)小鼠體重變化情況

3.4 剖檢分析 受試小鼠和空白對(duì)照組的小鼠各項(xiàng)觀察指標(biāo)未見明顯的毒性反應(yīng)，亦未能有相應(yīng)的生理組織、和臟器的病變。解剖小鼠觀察，胃形狀、大小正常，胃黏膜無出血點(diǎn)、壞死等，胃內(nèi)容物性狀正常，心臟、肝臟、脾臟、腸胃、肺、腎臟等主要器官外觀顏色、形狀、大小比例、表面黏膜附著情況都顯示正常，沒有發(fā)現(xiàn)壞死、組織結(jié)構(gòu)腫瘤、結(jié)締組織結(jié)節(jié)、肥大增生等病理病變。

4 討論

14 d的實(shí)驗(yàn)觀察期間，沒有發(fā)現(xiàn)小鼠有任何的中毒癥狀，更無一死亡，結(jié)果表明白木香樹干木塊茶對(duì)昆明種小鼠的經(jīng)口急性毒性劑量大于21.5 g/kg·BW。根據(jù)中華人民共和國衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》中急性毒性的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，白木香樹干木塊茶屬無毒物質(zhì)。

因?yàn)槌料愕乃幉男纬芍芷诤荛L，故而古今都是一味稀有名貴中藥材。傳統(tǒng)中醫(yī)中藥只用沉香有黑色樹脂的木質(zhì)部來人藥，卻沒有有效地利用沉香樹的其他部分如樹干、葉、根等資源?，F(xiàn)代科學(xué)研究表明，白木香包含多種具有抗炎鎮(zhèn)痛等生理活性的化學(xué)成分，如：多糖、氨基酸、苷類黃酮、酚類黃酮及三萜類黃酮[5];具有鎮(zhèn)靜、抗菌、抗腫瘤、神經(jīng)保護(hù)等作用[6]且產(chǎn)量巨大，開發(fā)前景非常廣闊。但對(duì)于其毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)方面的研究還很少，國內(nèi)未見報(bào)道。本研究對(duì)其經(jīng)口急性毒性進(jìn)行探討，得出其在21.5/kg體重以內(nèi)無經(jīng)口急性毒性，望能為進(jìn)一步的開發(fā)利用提供幫助。

參考文獻(xiàn)：

[1]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2005：128-129.

[2]梅全喜.現(xiàn)代中藥藥理與臨床應(yīng)用手冊[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2009：404-405.

[3]彭可，梅文莉，吳嬌，等.白木香樹干中的黃酮類成分[J].熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)，2010，18（1）：97-100.

[4]中華人民共和國衛(wèi)生部.食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和方法GB15193.1～15193[S].21-2003.

[5]李薇，梅文莉，王昊，等.白木香樹干的化學(xué)成分研究[J].中國中藥雜志，2013，38（17）：2826-2831.

[6]李紅念，梅全喜，林煥澤，等.沉香的化學(xué)成分、藥理作用和臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J].中國藥房，2011（35）：3349-3351.

（收稿日期：2018-04-19）