肺癌組織不同核因子E2相關(guān)因子2及切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1水平在接受含鉑化療方案的晚期非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后中的價(jià)值

劉滿慶，黃劍

(淮安市第一人民醫(yī)院,a核醫(yī)學(xué)科，b檢驗(yàn)科，江蘇 淮安 223300)

非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)是肺癌常見類型之一，其占所有類型肺癌的80%左右，惡性程度高，患者5年生存率低[1]。目前針對(duì)NSCLC已經(jīng)發(fā)展出手術(shù)、化療、放療、免疫治療等多種治療方法，但效果均不理想。含鉑化療方案作為治療NSCLC經(jīng)典方案，其療效受多方面影響，且不同患者預(yù)后存在較大差異[2]，因此研究影響接受含鉑化療方案的晚期NSCLC患者預(yù)后的因素具有十分重要的意義。核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)及切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)近年研究較多，有研究推測(cè)Nrf2及ERCC1可能是影響接受含鉑化療方案的晚期NSCLC患者預(yù)后的重要因素[3]。本研究以近期淮安市第一人民醫(yī)院收治的接受含鉑化療方案的NSCLC患者為研究對(duì)象，檢測(cè)了其肺癌組織Nrf2及ERCC1水平，并就肺癌組織不同Nrf2及ERCC1水平在接受含鉑化療方案的晚期NSCLC患者預(yù)后中的價(jià)值進(jìn)行了分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料以淮安市第一人民醫(yī)院2010年1月至2012年12月期間收治的130例晚期NSCLC患者為研究對(duì)象進(jìn)行回顧性分析，男89例，女41例，年齡(56.12±8.91)歲，年齡范圍為26～78歲，鱗癌48例，腺癌56例，其他26例。NSCLC診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《非小細(xì)胞肺癌臨床指南》[4]。納入標(biāo)準(zhǔn)：①TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期；②可接受化療周期≥2；③KPS評(píng)分高于70；④預(yù)計(jì)生存期大于3個(gè)月；⑤簽署治療知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①心電圖、肝、腎功能異常；②之前進(jìn)行過相關(guān)治療。本研究得到了淮安市第一人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2方法一線化療方案：NP[d1、d8：去甲基長春花堿(諾唯本)25 mg·m-2+d1：順鉑75 mg·m-2]或TC(d1：紫杉醇175 mg·m-2+卡鉑 AUC5.5 g·L-1·min-1)或DP(d1：多西他賽70 mg·m-2+順鉑75 mg·m-2)。周期為21 d，至少進(jìn)行2個(gè)周期。二線化療方案：非鉑單藥(多烯紫杉醇75 mg·m-2，每周1次，4周1個(gè)周期)視情況化療1～2周期。對(duì)肺癌組織和癌旁組織中Nrf2及ERCC1表達(dá)情況進(jìn)行對(duì)比，單因素分析肺癌組織中Nrf2及ERCC1在不同臨床資料中的表達(dá)差異，治療后通過電話、信件隨訪方式進(jìn)行隨訪，隨訪3.5年，統(tǒng)計(jì)患者生存時(shí)間，分析不同Nrf2及ERCC1表達(dá)水平的患者生存時(shí)間的差異，最后根據(jù)Cox模型分析Nrf2及ERCC1對(duì)晚期NSCLC患者生存期影響。

1.3臨床檢測(cè)經(jīng)病理組織活檢取得NSCLC標(biāo)本和癌旁組織標(biāo)本。采用免疫組化法(S-P)進(jìn)行檢測(cè)Nrf2及ERCC1陽性情況。將標(biāo)本經(jīng)10%甲醛固定，然后經(jīng)過石蠟包埋、切片、脫蠟、抗原修復(fù)、蘇木素染色等一系列處理后，將切片置于顯微鏡下觀察染色結(jié)果，細(xì)胞核顯示棕黃色則為ERCC1陽性，隨機(jī)選取8個(gè)視野，以每個(gè)視野中100個(gè)細(xì)胞為基數(shù)進(jìn)行計(jì)算ERCC1陽性細(xì)胞比例，陰性為(-)(<5%)和(+)(5%～34%)，陽性為(++)(35%-74%)和(+++)(≥75%)。細(xì)胞質(zhì)顯示棕褐色為Nrf2陽性細(xì)胞，比例﹤10%為陰性，≥10%為陽性。兩者均以PBS緩沖代替一抗。

2 結(jié)果

2.1癌組織和癌旁組織中Nrf2及ERCC1表達(dá)情況對(duì)比肺癌組織的Nrf2陽性率、ERCC1陽性率分別高于癌旁組織的Nrf2陽性率、ERCC1陽性率(P<0.05)。見表1。

表1 肺癌組織和癌旁組織中Nrf2及ERCC1表達(dá)情況對(duì)比/例(%)

2.2肺癌組織中Nrf2及ERCC1在不同臨床資料中的表達(dá)情況有胸腔積液的患者Nrf2陽性率高于無胸腔積液患者，TNM分期為Ⅳ期的患者Nrf2陽性率高于Ⅲ期患者，轉(zhuǎn)移病灶數(shù)≥2個(gè)、原發(fā)腫瘤直徑≥5 cm和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者的Nrf2陽性率、ERCC1陽性率均高于對(duì)立條件下Nrf2陽性率、ERCC1陽性率(均P<0.05)。見表2。

2.3Nrf2及ERCC1不同表達(dá)水平患者的生存情況分析130例患者中位生存時(shí)間為(13.6±5.09)月。ERCC1陽性患者和Nrf2陽性患者的中位生存時(shí)間均短于陰性患者的中位生存時(shí)間(均P<0.05)，見表3?；颊哒w生存曲線如圖1所示，Log-rank檢驗(yàn)結(jié)果顯示，陰性患者的累積生存率優(yōu)于陽性患者，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=11.687，P=0.001)。

圖1 兩組生存曲線對(duì)比

2.4130例患者預(yù)后的Cox模型分析以逐步回歸法篩選因素，入選水準(zhǔn)為0.05，剔除水準(zhǔn)為0.1，Cox模型分析顯示轉(zhuǎn)移病灶數(shù)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ERCC1表達(dá)和Nrf2表達(dá)是影響晚期NSCLC患者生存期的危險(xiǎn)因素。見表4。

表2 肺癌組織中Nrf2及ERCC1在不同臨床資料中的表達(dá)情況/例(%)

表3 Nrf2及ERCC1不同表達(dá)水平患者的生存情況分析

注：與陰性患者比較，aP<0.05

表4 130例患者預(yù)后的Cox模型分析

3 討論

對(duì)于多數(shù)NSCLC患者，含鉑化療方案仍是延長其五年生存率的主要化療方案，但含鉑化療方案的缺點(diǎn)之一是患者易形成耐藥性，導(dǎo)致患者化療效果不佳[5]。近年越來越多研究顯示Nrf2及ERCC1即切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因與鉑類化療藥物耐藥性的產(chǎn)生有一定關(guān)系[6-7]。Nrf2作為轉(zhuǎn)錄因子其主要生理效果是調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激反應(yīng)，涉及到細(xì)胞內(nèi)氧化還原基因、解毒基因、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因等多個(gè)基因的表達(dá)調(diào)控[8-9]。既往有研究提示Nrf2的高表達(dá)可能是導(dǎo)致NSCLC患者接受鉑類化療藥物失敗的可能原因之一[10]，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)干擾Nrf2表達(dá)后，肺癌細(xì)胞株重新恢復(fù)對(duì)鉑類藥物的敏感性[11]。Maki等[12]研究發(fā)現(xiàn)Nrf2高表達(dá)的肺癌患者預(yù)后較Nrf2低表達(dá)患者差，并指出Nrf2高表達(dá)可能是導(dǎo)致肺癌患者5年生存率降低的原因之一。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)Nrf2高表達(dá)的NSCLC患者中位生存時(shí)間為12.11個(gè)月較Nrf2陰性的NSCLC患者中位時(shí)間少4個(gè)月，說明Nrf2高表達(dá)會(huì)顯著降低NSCLC患者中位生存時(shí)間。

ERCC1是一組涉及遺傳物質(zhì)修復(fù)的基因，其發(fā)揮作用機(jī)制是修復(fù)損壞的DNA結(jié)構(gòu)，避免已損壞DNA對(duì)區(qū)域其他遺傳DNA產(chǎn)生不利影響[13]。既往有研究認(rèn)為ERCC1表達(dá)可能是導(dǎo)致多種化療藥物效果不佳的原因之一[14]，王鑫和支修益[15]研究發(fā)現(xiàn)ERCC1高表達(dá)肺癌患者平均5年生存率較ERCC1低表達(dá)的肺癌患者降低6～10個(gè)月。本研究結(jié)果顯示ERCC1高表達(dá)的NSCLC患者中位生存時(shí)間為11.05個(gè)月較ERCC1低表達(dá)的NSCLC患者中位時(shí)間少6個(gè)月，同時(shí)ERCC1高表達(dá)患者2年生存率較ERCC1低表達(dá)患者顯著降低，均提示ERCC1高表達(dá)不利于NSCLC患者預(yù)后。本研究130例入組NSCLC患者均接受含鉑化療方案，結(jié)果顯示Nrf2及ERCC1陰性的NSCLC患者2年生存率可達(dá)16%，提示對(duì)于含鉑化療藥物可使Nrf2及ERCC1陰性的NSCLC患者明顯獲益，但對(duì)Nrf2及ERCC1陽性的NSCLC患者效果不佳。本研究對(duì)眾多可能影響NSCLC患者預(yù)后的因素進(jìn)行了Cox模型分析，結(jié)果提示除腫瘤分期、腫瘤是否轉(zhuǎn)移等影響肺癌患者預(yù)后的常見因素外，Nrf2及ERCC1表達(dá)也成為影響NSCLC患者預(yù)后的危險(xiǎn)因素，分析其原因可能與Nrf2及ERCC1高表達(dá)導(dǎo)致NSCLC患者對(duì)鉑類化療藥物耐藥性增加有關(guān)。

綜上所述，影響NSCLC患者預(yù)后的因素眾多，而Nrf2及ERCC1高表達(dá)可能是導(dǎo)致NSCLC患者接受含鉑化療藥物后化療效果不佳的原因之一，這提示干擾Nrf2及ERCC1將成為提高鉑類藥物化療效果的可能途徑之一。