追蹤“心臟干細(xì)胞”中國疑影

張淼 錢煒

近日，國家自然科學(xué)基金委已梳理了心臟干細(xì)胞領(lǐng)域的400多個(gè)項(xiàng)目，發(fā)現(xiàn)有近40個(gè)項(xiàng)目，都是直接建立在安維薩被指造假的研究基礎(chǔ)上。

“國內(nèi)現(xiàn)在的大部分研究都是跟風(fēng)，并且是重臨床、輕基礎(chǔ)。”在談及心臟干細(xì)胞研究時(shí)，國內(nèi)一位從事心血管病研究工作的教授、長江學(xué)者這樣說道。這位匿名的專家直言，哈佛大學(xué)教授皮耶羅·安維薩（Piero Anversa）的造假丑聞，已經(jīng)直接影響到國內(nèi)的多項(xiàng)跟風(fēng)研究，并或多或少地對(duì)心臟干細(xì)胞的整個(gè)研究領(lǐng)域產(chǎn)生長遠(yuǎn)影響。

由于安維薩此前的名望與他的“心肌干細(xì)胞”研究的開創(chuàng)性，整個(gè)業(yè)界有不少跟風(fēng)研究，中國的研究者自然也不例外。然而，隨著他提出的理論于一夜之間傾塌，有人認(rèn)為，應(yīng)當(dāng)借此契機(jī)，重新審視中國心臟干細(xì)胞研究領(lǐng)域的投入與發(fā)展策略。

超億元的科研投入

過去，醫(yī)學(xué)界普遍認(rèn)為，心肌細(xì)胞是一種“終末分化細(xì)胞”，也就是說，在人出生以后，心肌細(xì)胞就不再進(jìn)入細(xì)胞周期進(jìn)行分裂。因此，在心肌損傷后，心臟幾乎沒有再生能力。各種心血管疾病造成心肌細(xì)胞的不可逆損傷，最終都會(huì)發(fā)展成為心力衰竭，從而令生命走向絕路。

進(jìn)入新世紀(jì)以來，干細(xì)胞研究迅速成長為一株枝繁葉茂的大樹，將干細(xì)胞用于心肌再生，是這棵大樹的眾多枝杈中較為粗壯的一枝。在這一領(lǐng)域，由于默認(rèn)成體心臟沒有再生能力，即不存在心臟干細(xì)胞，因而大多數(shù)科學(xué)家的研究方向都是試圖將胚胎干細(xì)胞，或者來源于成人骨髓、皮膚的干細(xì)胞分化生成心肌細(xì)胞。因此，對(duì)這一領(lǐng)域的準(zhǔn)確描述應(yīng)為“干細(xì)胞用于心肌再生的研究”。為簡單起見，除有特別注明，本文將這些研究統(tǒng)稱為“心臟干細(xì)胞研究”。

2003年，時(shí)任哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院教授、布列根與婦女醫(yī)院再生醫(yī)學(xué)中心主任的皮耶羅·安維薩石破天驚地聲稱，在成人心臟中就有以c-kit為標(biāo)記物的心肌干細(xì)胞。如今，安維薩的這一重大發(fā)現(xiàn)被認(rèn)為根本就不存在，那么，在“c-kit心肌干細(xì)胞”浪潮退去的時(shí)候，自然會(huì)暴露出這一研究的跟風(fēng)者誰在“裸泳”。

在國家自然科學(xué)基金委與中國科學(xué)報(bào)社合辦的科學(xué)網(wǎng)基金檢索頁面，以“c-kit”為關(guān)鍵詞，在心臟病所在的循環(huán)系統(tǒng)學(xué)科下查詢，可發(fā)現(xiàn)至少有15個(gè)項(xiàng)目與此次被指根本就不存在的“c-kit心肌干細(xì)胞”直接相關(guān)。

這15個(gè)項(xiàng)目涉及多家機(jī)構(gòu)，其中既有中國醫(yī)科院阜外醫(yī)院、復(fù)旦大學(xué)、浙江大學(xué)等國家頂級(jí)醫(yī)院與大學(xué)，也有湖北醫(yī)藥學(xué)院、遵義醫(yī)學(xué)院等地方院校，金額逾500萬元。不過，這個(gè)檢索結(jié)果并不完整。

例如，在這15個(gè)檢索結(jié)果里，遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院心內(nèi)科主任石蓓僅有1個(gè)項(xiàng)目在列。但在自然基金委官方網(wǎng)站上查詢石蓓承擔(dān)的所有5個(gè)項(xiàng)目，其中有3項(xiàng)都與“c-kit心肌干細(xì)胞”相關(guān)。

另據(jù)知情人透露，近日，國家自然科學(xué)基金委已梳理了心臟干細(xì)胞領(lǐng)域的400多個(gè)項(xiàng)目，發(fā)現(xiàn)有近40個(gè)項(xiàng)目，都是直接建立在安維薩被指造假的研究基礎(chǔ)上。“也就是說，屬于不該立項(xiàng)、須立即中止資助的情況”。

就此問題，《中國新聞周刊》多次致電國家自然科學(xué)基金委新聞處工作人員李勇進(jìn)行核實(shí)，他表示已將問題提交到相關(guān)部門，等待答復(fù)。

復(fù)旦大學(xué)中山醫(yī)院葛均波團(tuán)隊(duì)也曾試圖開展c-kit心肌干細(xì)胞研究未果。葛均波是中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病分會(huì)現(xiàn)任主任委員、中科院院士。2010年前后，他所在的中山醫(yī)院心內(nèi)科醫(yī)生白英楠前往哈佛大學(xué)安維薩的實(shí)驗(yàn)室學(xué)習(xí)，現(xiàn)已回到中山醫(yī)院心內(nèi)科工作。

據(jù)《中國科學(xué)報(bào)》報(bào)道，由于安維薩實(shí)驗(yàn)室分工明確，白英楠所在的小組只負(fù)責(zé)心肌梗死小鼠的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分，其上游的c-kit干細(xì)胞分離培養(yǎng)，及下游的體內(nèi)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，操作和數(shù)據(jù)都由其他小組負(fù)責(zé)。

《中國新聞周刊》檢索文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，在安維薩在哈佛工作期間發(fā)表的55篇論文里，至少有5篇的作者署名中都包括白英楠。其中發(fā)表在《循環(huán)》 （Circulation）雜志上的《衰老及功能衰竭的人類心臟的心肌細(xì)胞形成》一文，已于2014年被哈佛醫(yī)學(xué)院撤回。

對(duì)此，葛均波向《中國新聞周刊》解釋說，“長期以來，我們對(duì)心力衰竭沒有有效的治療手段，看著病人一天一天走向死亡，對(duì)一個(gè)醫(yī)生是很痛苦的事情。2000年，法國一個(gè)外科醫(yī)生在美國心臟病年會(huì)上報(bào)道了用骨骼肌成肌細(xì)胞修復(fù)壞死心肌以后，我非常興奮，當(dāng)時(shí)以為人類找到了這個(gè)修復(fù)壞死組織的鑰匙了。我想，天吶！這一天真的到來了！我馬上建議成立干細(xì)胞研究中心，開展這方面的研究。由于自己是一個(gè)臨床大夫，對(duì)這方面不熟悉，當(dāng)時(shí)引進(jìn)了從事基礎(chǔ)研究的科學(xué)家，從離體到在體做了一些研究，做著做著發(fā)現(xiàn)，真實(shí)世界不是那么容易……現(xiàn)在的新聞人物安維薩當(dāng)時(shí)是這個(gè)領(lǐng)域的大科學(xué)家，發(fā)表了一系列有影響力的論文并被美國心臟病學(xué)會(huì)授予杰出貢獻(xiàn)獎(jiǎng)，當(dāng)時(shí)我們真是希望能夠得到他的指導(dǎo)，使我國干細(xì)胞研究趕上國際前沿，誰知道多年以后發(fā)生了這樣的事情……我們沒有機(jī)會(huì)參與他的研究。他發(fā)現(xiàn)的c-kit陽性干細(xì)胞涉嫌造假，但是，干細(xì)胞研究我還是認(rèn)為一定是解決組織修復(fù)的希望?！?/p>

“c-kit心肌干細(xì)胞”，只是中國龐大的心臟干細(xì)胞研究領(lǐng)域的一部分研究內(nèi)容。根據(jù)前述長江學(xué)者的梳理，在安維薩提出“心肌干細(xì)胞”大約7年后，2010年，是中國心臟干細(xì)胞研究的一個(gè)關(guān)鍵時(shí)間節(jié)點(diǎn)。從這一年起，國家自然科學(xué)基金委對(duì)心臟干細(xì)胞相關(guān)課題的資助額度大幅增加，每年資助金額超過1000萬，而此前自2003年至2010年期間，每年資助金額超過200萬。2000～2018年總資助金額在1億元以上。

另據(jù)從事干細(xì)胞研究的國內(nèi)一家一流科研機(jī)構(gòu)某位PI（即研究負(fù)責(zé)人）掌握的信息，近10年來，科技部資助心臟干細(xì)胞領(lǐng)域的重大專項(xiàng)每年至少都有一個(gè)。根據(jù)《中國新聞周刊》查詢的2016～2018年度科技部資助干細(xì)胞領(lǐng)域的項(xiàng)目清單，3年間共啟動(dòng)4個(gè)干細(xì)胞用于心肌再生的研究項(xiàng)目，總經(jīng)費(fèi)高達(dá)8000多萬。

就科技部資助“c-kit心肌干細(xì)胞”相關(guān)研究的具體情況，《中國新聞周刊》電話詢問了科技部生物技術(shù)發(fā)展中心干細(xì)胞項(xiàng)目的負(fù)責(zé)人盧珊，她在電話里表示，“就此事情我們已經(jīng)做了相關(guān)工作，但是按程序我需請(qǐng)示部里才能答復(fù)?！?/p>

據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前中國發(fā)表的“心臟干細(xì)胞”文獻(xiàn)在2009年之前基本上是每年10篇左右，在2010年后基本上是每年40篇左右，累積接近400篇。

另據(jù)《財(cái)新》報(bào)道，國內(nèi)目前有超過四分之一的心臟干細(xì)胞治療研究論文發(fā)表于《中國組織工程研究》。該期刊相關(guān)工作人員稱，自哈佛醫(yī)學(xué)院造假事件爆出以來，雜志方面暫無任何撤稿，“但若發(fā)現(xiàn)任何數(shù)據(jù)造假或論文剽竊行為，一定會(huì)予以堅(jiān)決撤回?！?h3>臨床應(yīng)用型研究“泡沫”

國內(nèi)學(xué)者對(duì)“c-kit心肌干細(xì)胞”的研究，除中科院上海生化細(xì)胞研究所的周斌團(tuán)隊(duì)外，基本上都是將安維薩的發(fā)現(xiàn)當(dāng)成默認(rèn)前提的——不幸的是，安維薩的理論如今被徹底推翻?！按笫蠹毙孕募」Ｋ篮骳-kit+心臟干細(xì)胞增殖分化的時(shí)序觀察”“不同濃度依達(dá)拉奉對(duì)低氧環(huán)境下c-kit～+心臟干細(xì)胞的影響”……在中國知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫中，很容易就能查到此類論文標(biāo)題。

實(shí)際上，多位受訪者表示，國內(nèi)跟風(fēng)“c-kit心肌干細(xì)胞”研究的團(tuán)隊(duì)，也遇到了不能重復(fù)安維薩的實(shí)驗(yàn)結(jié)果的問題。

遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院石蓓的3個(gè)相關(guān)課題，最初是研究如何提高“c-kit心臟干細(xì)胞”的存活率及分化，后來轉(zhuǎn)而研究“心臟干細(xì)胞外泌體”，此處心臟干細(xì)胞指的依然是“c-kit”。公開資料顯示，葛均波與石蓓共同指導(dǎo)過遵義醫(yī)學(xué)院碩士研究生的畢業(yè)論文。葛均波告訴《中國新聞周刊》，遵義醫(yī)學(xué)院的研究也沒有得到安維薩的“c-kit細(xì)胞”再生心肌的結(jié)果，而主要做了外泌體。

在機(jī)制尚未研究清楚的情況下就開始探索臨床應(yīng)用，這一現(xiàn)象在整個(gè)心臟干細(xì)胞領(lǐng)域廣泛存在。除了安維薩提出的“c-kit心肌干細(xì)胞”外，國內(nèi)其他的心臟干細(xì)胞研究更多集中在“骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞”上。

既往的研究發(fā)現(xiàn)，將“骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞”移植到心臟后，90%都無法存活。2002年，浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院院長王建安率領(lǐng)團(tuán)隊(duì)，開始研究“自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞”移植治療心肌梗死。據(jù)報(bào)道，他們的研究將移植細(xì)胞的存活率從過去的10%提高到30%，結(jié)果改善了患者生活質(zhì)量評(píng)分，提高了再住院患者5年累計(jì)存活率。王建安的這一研究，獲得了2012年度國家科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)。

王建安領(lǐng)導(dǎo)的團(tuán)隊(duì)是國內(nèi)開展心臟干細(xì)胞研究最為活躍的團(tuán)隊(duì)之一。

2013年，王建安主持的“缺氧預(yù)處理提高骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞心肌修復(fù)療效：瘦素的作用及機(jī)制研究”獲得國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目支持。

2014年，王建安課題組又獲得科技部“973”計(jì)劃的資助，開展“人胚胎干細(xì)胞衍生細(xì)胞治療心肌梗死后心力衰竭的關(guān)鍵科學(xué)問題研究”。

前述某機(jī)構(gòu)PI指出，要想做心臟干細(xì)胞的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或臨床試驗(yàn)，需要的不僅是充足的經(jīng)費(fèi)，更重要的是需調(diào)動(dòng)很多資源。

另一位在心臟干細(xì)胞領(lǐng)域做得風(fēng)生水起的是蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院的沈振亞團(tuán)隊(duì)。他們?cè)谶^去十多年里，在多個(gè)國家級(jí)項(xiàng)目的資助下開展研究，并于2003年起在國內(nèi)率先開展干細(xì)胞移植技術(shù)成功應(yīng)用于臨床，獲得2017年度中華醫(yī)學(xué)科技獎(jiǎng)一等獎(jiǎng)。

據(jù)《中華醫(yī)學(xué)信息導(dǎo)報(bào)》報(bào)道，沈振亞項(xiàng)目組首次將“骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞”來源的外泌體和心臟干細(xì)胞（編者注：即指“c-kit心肌干細(xì)胞”）一起移植入大鼠心梗模型，干細(xì)胞的心梗修復(fù)能力得到提升，心功能獲得改善。項(xiàng)目組由此提出了“干細(xì)胞組合移植”的新概念。

實(shí)際上，“c-kit心肌干細(xì)胞”近十年來一直受到質(zhì)疑，已有多項(xiàng)國內(nèi)外研究得出“心臟中根本不存在自身干細(xì)胞”的結(jié)論。但沈振亞據(jù)此開展的跟蹤研究，似乎沒有受到這些質(zhì)疑的影響?！犊萍既?qǐng)?bào)》2018年2月6日的報(bào)道稱，沈振亞領(lǐng)導(dǎo)的項(xiàng)目先后共完成135例次干細(xì)胞移植，83.3%的患者癥狀獲明顯改善，生活質(zhì)量顯著提高。

前述某機(jī)構(gòu)PI說，“臨床醫(yī)生很容易申請(qǐng)到課題，但由于科研能力弱，在獲得大量經(jīng)費(fèi)后，往往只開展臨床應(yīng)用型研究?！?/p>

在美國ClinicalTrial（臨床試驗(yàn)）網(wǎng)站上查閱注冊(cè)在案的心血管疾病干細(xì)胞治療臨床研究，中國共有12項(xiàng)研究。其中，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院阜外醫(yī)院有3項(xiàng)，海軍總醫(yī)院、西京醫(yī)院、上海第十醫(yī)院、青島大學(xué)、河北醫(yī)科大學(xué)、南京市鼓樓醫(yī)院與中科院、軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬醫(yī)院、安貞醫(yī)院與浙江大學(xué)第二附屬醫(yī)院各有1項(xiàng)。

多名心血管領(lǐng)域研究人員向《中國新聞周刊》表示，由臨床醫(yī)生主導(dǎo)的心臟干細(xì)胞研究對(duì)基礎(chǔ)科學(xué)問題關(guān)心不足，往往是將國外的成果拿來就用，大多屬低端重復(fù)性科研，讓這個(gè)領(lǐng)域看起來很繁榮，實(shí)際上都是“泡沫”。

像魔法一樣的干細(xì)胞

已發(fā)表的臨床研究結(jié)果表明，在實(shí)驗(yàn)中，雖然注射到心臟的“骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞”絕大部分都死掉了，但與對(duì)照組相比，接受細(xì)胞移植治療的心血管病患者的幾項(xiàng)心功能指標(biāo)都有顯著提高。目前，科學(xué)上對(duì)此現(xiàn)象的解釋主要就是干細(xì)胞的“旁分泌作用”。

旁分泌，簡單地說就是，干細(xì)胞能通過分泌含蛋白質(zhì)成分的外泌體，來影響周邊細(xì)胞。前述某機(jī)構(gòu)PI表示，旁分泌在國際上也是心臟干細(xì)胞領(lǐng)域的一個(gè)熱點(diǎn)問題，有很多團(tuán)隊(duì)都在研究。然而，北京某知名醫(yī)院一位研究干細(xì)胞的博士生指出，在國內(nèi)，即使是對(duì)干細(xì)胞的旁分泌機(jī)制研究也不算多，大家還都是更熱衷于關(guān)注應(yīng)用層面。

在安維薩造假事件震動(dòng)國際學(xué)術(shù)界后，王建安在接受國家衛(wèi)健委主管的《醫(yī)師報(bào)》采訪時(shí)解釋說，以往大眾對(duì)干細(xì)胞的理解是，干細(xì)胞生成心肌，甚至直接生成一個(gè)完整心臟，多年研究證實(shí)，干細(xì)胞作用于心肌，主要通過旁分泌起作用。

王建安一再強(qiáng)調(diào)，無論其作用機(jī)制是什么，只要有臨床效果就可證明其功效，不能因?yàn)閷?duì)“心肌重生”功能的質(zhì)疑，進(jìn)而否定干細(xì)胞的功能。

事實(shí)上，近年來越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，少量存活的“骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞”在心肌內(nèi)根本無法分化成心肌細(xì)胞，被中國研究者們普遍看好的“骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞”正面臨著“身份危機(jī)”。

今年9月26日，國際頂級(jí)學(xué)術(shù)期刊《自然》在線發(fā)表評(píng)論文章，日本理化學(xué)研究所（RIKEN）研究員Douglas Sipp、美國國立衛(wèi)生研究院高級(jí)研究員Pamela G.Robey、明尼蘇達(dá)大學(xué)生物倫理學(xué)中心副教授Leigh Turner三位科學(xué)家提出警告，“骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞”混淆概念，使得那些未經(jīng)證明的療法更易于推銷給患者。

該文稱，迄今為止，大量論文的發(fā)表讓“骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞”變得像魔法一樣無所不能，它已經(jīng)成為很多未經(jīng)證實(shí)的干細(xì)胞干預(yù)手段的首選細(xì)胞類型。

例如， 2016年的一份報(bào)告記錄了351家美國公司向消費(fèi)者銷售所謂的干細(xì)胞療法，幾乎一半的公司在他們的營銷材料中提到了“骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞”。這些公司有選擇性地強(qiáng)調(diào)那些有利于自身的論文，指出這種干細(xì)胞很容易獲取，可以分化產(chǎn)生其他的細(xì)胞類型，或者可以分泌各種各樣的治療因子。

而實(shí)際上，大量研究表明，相比于胚胎干細(xì)胞和多能誘導(dǎo)干細(xì)胞，屬于成體干細(xì)胞的“骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞”的“干性”（即分化能力）有限，只能分化成限定類型的細(xì)胞。而在所謂的“干細(xì)胞療法”中也并非依靠其“干性”，然而這些卻被忽視了。

和干細(xì)胞在其他生命科學(xué)領(lǐng)域的研究一樣，心臟干細(xì)胞研究被懷疑是不可重復(fù)的“假陽性”重災(zāi)區(qū)。

“生物通”網(wǎng)站在報(bào)道安維薩造假門的消息時(shí)說：到目前為止，干細(xì)胞這一研究領(lǐng)域已經(jīng)出現(xiàn)了太多太多的造假事件，從韓國曾經(jīng)的“民族英雄”黃禹錫，到日本的小保方晴子，再到現(xiàn)在的皮耶羅·安維薩，這些都是令人印象深刻的造假事件，但絕不是最后一個(gè)。

一位曾在美國長期學(xué)習(xí)、工作的國內(nèi)生物學(xué)家坦言，心臟結(jié)構(gòu)非常特殊，心肌也非常敏感，無論往心肌打什么干細(xì)胞，甚至是用激光往心臟病患者的心臟外膜上打孔，有時(shí)也能起到一定的恢復(fù)效果。但事實(shí)上，這并不代表打進(jìn)心臟的東西就真正起作用了，而是屬于“假陽性”范疇。更關(guān)鍵的是，在結(jié)果導(dǎo)向的實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)人員的觀察可靠性也令業(yè)內(nèi)人士生疑。

當(dāng)前，中國在干細(xì)胞領(lǐng)域的論文數(shù)量、影響因子等主要?jiǎng)?chuàng)新指標(biāo)進(jìn)入世界前列。今年9月19日，在以干細(xì)胞為主題的香山科學(xué)會(huì)議第635次學(xué)術(shù)討論會(huì)上，會(huì)議執(zhí)行主席、中科院院士周琪指出，“我們應(yīng)當(dāng)清醒地看到，我們所取得的成果仍然缺少真正引領(lǐng)性的工作。從理念到前期理論基礎(chǔ)、核心技術(shù)的創(chuàng)新目前主要還是發(fā)達(dá)國家科學(xué)家做出來的?！?/p>

到目前為止，用干細(xì)胞治療心臟病，似乎仍是一個(gè)遙不可及的夢(mèng)。在哈佛大學(xué)教授安維薩“心肌干細(xì)胞”造假丑聞被揭露之際，中國應(yīng)該重新檢視國內(nèi)心臟干細(xì)胞研究的發(fā)展策略。為了不讓中國版的“安維薩事件”發(fā)生，有關(guān)部門似乎已經(jīng)在行動(dòng)。