復合營養(yǎng)液對中華絨螯蟹單體養(yǎng)殖試驗效果

黃 堅，陳義培，岳武成，陳曉雯，劉慶華，彭智文，王 軍，王成輝

(上海海洋大學農(nóng)業(yè)部淡水水產(chǎn)種質(zhì)資源重點實驗室,水產(chǎn)科學國家級實驗教學示范中心，上海水產(chǎn)養(yǎng)殖工程技術研究中心，上海 201306)

中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)俗稱河蟹，為雜食性甲殼類，具有好格斗與搶食的生活習性[1-2]。中華絨螯蟹的這種互相間好格斗習性，造成了養(yǎng)殖生產(chǎn)上總產(chǎn)量不高[3]。因而，中華絨螯蟹單體養(yǎng)殖也逐漸引起了人們的重視。楊培根等[4]于1997年開展了中華絨螯蟹的單體籠養(yǎng)試驗，發(fā)現(xiàn)4個多月內(nèi)平均蛻殼2.3次，蛻殼后體質(zhì)量平均增長33.2%。黃姝等[5]在250 L的實驗水槽內(nèi)進行了中華絨螯蟹成蟹階段的單體蛻殼與生長觀察，在200 d的實驗期內(nèi)，河蟹進行了4次蛻殼，每次蛻殼后的體質(zhì)量平均增長率為48.7%～80.1%。陳嬌[6]在室內(nèi)60 L水槽內(nèi)對成蟹在一個蛻殼周期內(nèi)的單體蛻殼與生長進行了連續(xù)觀察，發(fā)現(xiàn)河蟹的肥滿度60% 左右時啟動下一次蛻殼。但由于受單體養(yǎng)殖設施等條件的制約，國內(nèi)對中華絨螯蟹單體養(yǎng)殖中添加營養(yǎng)液的試驗一直較少。

近年來，一種新型的蟹類養(yǎng)殖設施—“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”開始進入人們的視線[7-8]。個體養(yǎng)殖系統(tǒng)是將一個個小型養(yǎng)殖盒進行立體式組裝，宛如一棟“公寓”，每棟“公寓”配備了水處理設備、殺菌設備和控溫設備等，以實現(xiàn)蟹類的循環(huán)水控溫養(yǎng)殖?！皞€體養(yǎng)殖系統(tǒng)”是將“扁平開放式”轉變?yōu)椤傲Ⅲw封閉式”的蟹類單體養(yǎng)殖，避免了蟹類間的互相格斗，為蟹類的單體養(yǎng)殖創(chuàng)造了條件。此外，“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”采用循環(huán)水養(yǎng)殖，節(jié)約了水資源，避免了養(yǎng)殖廢水的排放污染。然而，目前尚無在“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”中添加營養(yǎng)液進行中華絨螯蟹單體養(yǎng)殖試驗的報道。本實驗向“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”水體中添加營養(yǎng)液進行了中華絨螯蟹的成蟹單體暫養(yǎng)試驗，旨在了解“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”水體中添加營養(yǎng)液對中華絨螯蟹成熟單體養(yǎng)殖后生長指標與營養(yǎng)成分的差異情況。

1 材料和方法

1.1 樣品的采集

2016年10月底，取上海福島水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社飼養(yǎng)的“江海21”配套選育B系，經(jīng)親本篩選后的剩余雄蟹，規(guī)格為每只100～130 g，數(shù)量150只。

1.2 試驗設計

“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”為本實驗室與上海泓循環(huán)境科技發(fā)展有限公司合作開發(fā)的自動控溫循環(huán)水全封閉的河蟹養(yǎng)殖系統(tǒng)。養(yǎng)殖盒規(guī)格為40 cm×30 cm×18 cm，每個盒內(nèi)放養(yǎng)一只蟹。實驗蟹在系統(tǒng)內(nèi)適應一周開始正式試驗，將“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”分為A、B兩組，水源均為自來水。A組放養(yǎng)63只成蟹，其飼養(yǎng)水體中加入1‰ 的葡萄糖和1‰ 的谷氨酸鈉作為營養(yǎng)液，每周日晚換水并重新加入同樣的營養(yǎng)液；B組放養(yǎng)56只成蟹，其水體不加營養(yǎng)液；其余31只成蟹直接測量其體質(zhì)量、殼長、殼寬等生長指標，解剖后取肝胰腺、性腺進行營養(yǎng)成分分析作為暫養(yǎng)前對照組。放養(yǎng)前測量每只河蟹的體質(zhì)量、殼長、殼寬等生長指標。試驗期間的水溫設置為20 ℃，每天傍晚6點投喂甌江彩鯉“龍申1號”魚肉，采用“飽食投喂法”，第二天早晨9點清除殘餌。其中A、B兩組水質(zhì)指標一樣。正式試驗日期從2016年11月7日—12月7日，共30 d。

1.3 生長參數(shù)測定

試驗結束時，分別對所有河蟹稱重后，取肝胰腺、性腺進行營養(yǎng)成分分析。相關生長參數(shù)的計算方法如下：

成活率=試驗結束時成活個體數(shù)/試驗開始時個體數(shù)×100%

RBW=(WBn﹣WBn-1)/WBn-1× 100%

F=W/L3×100

式中，RBW為增重率(%)，WB為體質(zhì)量(g)，F(xiàn)為肥滿度，L為殼長(cm)

1.4 背甲色度值測定

利用色差儀分別對暫養(yǎng)前后試驗河蟹在水煮前、后(沸水煮10 min)的背甲5個部位點(左上、左下、中部、右上、右下)的顏色色度值進行測定，然后換算成每只蟹的平均色度值。

1.5 肝胰腺的甜度測定

取試驗河蟹的肝胰腺 0.5 g于1.5 mL離心管中并放入鍋中煮10 min，對煮熟的肝胰腺進行研磨，利用糖度計對研磨出汁的肝胰腺進行測定。

1.6 營養(yǎng)成分分析

試驗河蟹肝胰腺和性腺組織中氨基酸、脂肪酸含量的測定參照劉慶華等[9]的方法。

1.7 數(shù)據(jù)處理與分析

所有數(shù)據(jù)采用平均數(shù)±標準差(Mean±SD)表示，應用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理與顯著性檢驗，P<0.05為顯著，P<0.01為極顯著。

2 結果分析

2.1 暫養(yǎng)前后及暫養(yǎng)方式的相關表型差異分析

通過30 d的“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”暫養(yǎng)， A組和B組的成活率均在70% 以上，A組平均增重3.76%，B組平均增重1.34%，與暫養(yǎng)前相比，體重和肥滿度均有極顯著增加，且A組的增重率顯著高于B組(表1)。從肝胰腺的甜度看， A組在暫養(yǎng)后極顯著高于暫養(yǎng)前，而B組在暫養(yǎng)后卻極顯著低于暫養(yǎng)前，其中A組極顯著高于B組。從背甲的顏色色度值看，A組和B組在水煮前(活體)的顏色色度值均比暫養(yǎng)前有極顯著提高，且B組極顯著高于A組。

表1 暫養(yǎng)前后中華絨螯蟹的相關表型差異比較Tab.1 Relative phenotypic difference of E.sinensis before and after preservation

注：同行不同上標小寫字母表示差異顯著(P<0.05),不同上標大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。

2.2 暫養(yǎng)前、后及暫養(yǎng)方式肝胰腺營養(yǎng)成分比較

2.2.1 肝胰腺氨基酸含量

暫養(yǎng)前、后的肝胰腺中均檢測出17種氨基酸。從暫養(yǎng)前后來看，暫養(yǎng)后的必需氨基酸總量略高于暫養(yǎng)前，但只有暫養(yǎng)B組的苯丙氨酸(PHE)含量極顯著高于暫養(yǎng)前(表2)。從暫養(yǎng)方式來看，B組必需氨基酸總量與氨基酸總量略高于A組，除了B組的苯丙氨酸(PHE)含量極顯著高于A組，其它單個氨基酸組分及其鮮味氨基酸總量均不存在顯著差異?？梢?“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”水體中添加營養(yǎng)液對中華絨螯蟹肝胰腺中的氨基酸含量不存在顯著影響。

表2 暫養(yǎng)前、后中華絨螯蟹肝胰腺中的氨基酸組成與含量Tab.2 Amino acid composition and content in hepatopancreas of E.sinensis before and after preservation g/kg

注：同行不同上標小寫字母表示差異顯著(P<0.05),不同上標大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。

2.2.2 肝胰腺脂肪酸含量

本實驗蟹的肝胰腺中共檢出28種脂肪酸(表3)。從暫養(yǎng)前后來看，4種飽和脂肪酸(C14∶0、C17∶0、C22∶0、C23∶0)、3種單不飽和脂肪酸(C14∶1、C20∶1N9、C22∶1N9)和3種多不飽和脂肪酸(C18∶2N6C、C18∶3N6、C22∶2N6)在暫養(yǎng)前后存在顯著差異。從暫養(yǎng)方式來看，2種飽和脂肪酸(C17∶0、C22∶0)、2種單不飽和脂肪酸(C20∶1N9、C22∶1N9)、3種多不飽和脂肪酸(C18∶2N6C、C18∶3N6、C22∶2N6)在A、B兩個暫養(yǎng)組間存在顯著差異，其中暫養(yǎng)A組的飽和脂肪酸總量(ΣSFA)顯著低于B組。結果表明：“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”水體中添加營養(yǎng)液對中華絨螯蟹肝胰腺中的總體脂肪酸含量沒有顯著影響。

表3 暫養(yǎng)前、后中華絨螯蟹肝胰腺中的脂肪酸組成與含量Tab.3 Composition and content of fatty acids in hepatopancreas of E.sinensis before and after preservation g/100g

注：同行不同上標小寫字母表示差異顯著(P<0.05),不同大寫上標字母表示差異極顯著(P<0.01)。

2.3 暫養(yǎng)前、后及暫養(yǎng)方式性腺營養(yǎng)成分比較

2.3.1 性腺氨基酸含量

暫養(yǎng)前、后從實驗蟹的性腺中也均檢出了17種氨基酸(表4)。從暫養(yǎng)前后來看，A組暫養(yǎng)后的必需氨基酸、鮮味氨基酸和氨基酸總量分別比暫養(yǎng)前提高31.10%、51.75%和50.70%；B組暫養(yǎng)后的必需氨基酸、鮮味氨基酸和氨基酸總量分別比暫養(yǎng)前提高49.11%、89.99%和80.71%，差異顯著。從暫養(yǎng)方式來看，B組的必需氨基酸、鮮味氨基酸和氨基酸總量分別比A組高13.74%、22.79%和19.91%。通過“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”暫養(yǎng)中華絨螯蟹性腺中的氨基酸含量有明顯提高，但水體中添加營養(yǎng)液對中華絨螯蟹性腺中的總體氨基酸含量沒有顯著影響。

表4 暫養(yǎng)前后中華絨螯蟹性腺中的氨基酸組成與含量Tab.4 Amino acid composition and content in gonads of E.sinensis before and after preservation g/kg

注：同行不同上標小寫字母表示差異顯著(P<0.05),不同上標大寫字母表示差異極顯著(P<0.01).

表5 暫養(yǎng)前、后中華絨螯蟹性腺中的脂肪酸組成與含量Tab.5 Composition and content of fatty acids in gonads of E.sinensis before and after preservation g/100g

注：同行不同上標小寫字母表示差異顯著(P<0.05),不同上標大寫字母表示差異極顯著(P<0.01).

2.3.2 性腺脂肪酸含量

本次實驗蟹的性腺中只檢出19種脂肪酸(表5)。從暫養(yǎng)前后來看，4種飽和脂肪酸(C17∶0、C18∶0、C22∶0、C24∶0)、2種單不飽和脂肪酸(C16∶1、C24∶1N9)和2種多不飽和脂肪酸(C20∶3N6、C20∶4N6)在暫養(yǎng)前后存在顯著差異。從暫養(yǎng)方式來看，3種飽和脂肪酸(C17∶0、C18∶0、C24∶0)、2種單不飽和脂肪酸(C16∶1、C24∶1N9)和2種多不飽和脂肪酸(C20∶3N6、C20∶4N6)在A、B兩個暫養(yǎng)組間存在顯著差異，其它脂肪酸在A、B兩個暫養(yǎng)組間均不存在顯著差異。A組的性腺飽和脂肪酸(SFA)、單不飽和脂肪酸(MUFA)和多不飽和脂肪酸均顯著高于B組。結果表明：“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”暫養(yǎng)后，對中華絨螯蟹性腺中的總體脂肪酸含量沒有顯著影響，但向水體中添加營養(yǎng)液中華絨螯蟹性腺中的總體脂肪酸會明顯提高。

3 討論

不同的養(yǎng)殖水體環(huán)境[10-11]和水體營養(yǎng)[12]對中華絨螯蟹的生長具有明顯的影響。本研究發(fā)現(xiàn)，通過“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”對中華絨螯蟹的單體暫養(yǎng)，成活率在70% 以上。A組的增重率顯著高于B組。表明“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”對中華絨螯蟹的成熟單體暫養(yǎng)確實有育肥作用，在“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”水體中添加葡萄糖、谷氨酸鈉對中華絨螯蟹的成熟單體暫養(yǎng)的育肥更為明顯，這可能是中華絨螯蟹吸收了營養(yǎng)液中的谷氨酸鈉后增大了食欲，加快生長。對于肝胰腺的甜度，A組極顯著高于B組，表明在“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”水體中添加葡萄糖、谷氨酸鈉能夠改善中華絨螯蟹的肝胰腺甜味，這可能是中華絨螯蟹在吸收了營養(yǎng)液中的葡萄糖后積累到肝胰腺，使其變甜。

中華絨螯蟹蟹殼體色對其價格有直接的影響[13]，孔麗[14]的研究結果表明不同的體色，主要由于體內(nèi)含有不同的色素細胞，影響中華絨螯蟹體色的色素細胞大部分來自于胡蘿卜群的色素[15]。龔志等[13]的研究結果表明蟹殼內(nèi)含有類胡蘿卜素，伴隨著中華絨螯蟹的生長，其體內(nèi)產(chǎn)生的胡蘿卜素也就越多。本研究發(fā)現(xiàn)，A組水煮前(活體)的背甲顏色色度值顯著低于B組，這可能是葡萄糖消耗了部分類胡蘿卜素。因為，葡萄糖氧化后會產(chǎn)生熱量[16]，而丘生譯[15]研究發(fā)現(xiàn)胡蘿卜素在低溫情況下不容易分解，在高溫情況下會加快分解。

中華絨螯蟹的口感風味與鮮味氨基酸的含量有關，劉慶華等[9]研究結果表明中華絨螯蟹鮮味氨基酸主要有丙氨酸(ALA)、谷氨酸(GLU)、甘氨酸(GLY)、天冬氨酸(ASP)4種氨基酸。本研究還發(fā)現(xiàn)，B組肝胰腺必需氨基酸總量、鮮味氨基酸、氨基酸總量分別比A組高9.96%、8.13%、7.64%，B組性腺必需氨基酸總量、鮮味氨基酸、氨基酸總量分別比A組高13.74%、22.79%和19.91%。這可能是營養(yǎng)液中的葡萄糖消耗了部分氨基酸。因為葡萄糖與甘氨酸(GLY)、蘇氨酸(THR)、丙氨酸(ALA)、谷氨酸(GLU)、天冬氨酸(ASP)等會發(fā)生取代反應[17-22]，生成葡萄糖氨基酸糖胺，消耗了氨基酸的含量。

中華絨螯蟹的口感風味還與不飽和脂肪酸的含量有關，劉慶華等[9]研究結果表明不飽和脂肪酸含量越高，中華絨螯蟹的口感風味也就越好。本研究還發(fā)現(xiàn)，A組肝胰腺的單不飽和脂肪酸(MUFA)和多不飽和脂肪酸(PUFA)與B組均不存在顯著差異，而A組性腺的飽和脂肪酸總量(SFA)、單不飽和脂肪酸(MUFA)和多不飽和脂肪酸(PUFA)均顯著高于B組，這可能是水體中添加營養(yǎng)液增加了脂肪酸的含量。因為葡萄糖可以轉化成脂肪酸[23-24]，從而增加了脂肪酸的含量。

綜上所述，本研究揭示了在“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”暫養(yǎng)前、后及暫養(yǎng)方式中華絨螯蟹的體重肥滿度、甜度、背甲顏色值、營養(yǎng)成分的變化特征，表明在“個體養(yǎng)殖系統(tǒng)”水體中添加營養(yǎng)液對中華絨螯蟹成熟單體的體重、甜度、性腺的脂肪酸營養(yǎng)成分是有顯著提高的。