急性腦梗死伴頸動脈粥樣硬化患者血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平變化及意義

曾芳彥，彭夏培，肖敏，金錢倩，羅濤

(華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬武漢中心醫(yī)院，武漢430000)

急性腦梗死是由腦組織局部血液供應(yīng)突然減少或者停止，引起腦組織缺血、缺氧而致組織軟化、壞死所致，常伴有不同程度的神經(jīng)功能缺損[1]。該病具有起病急、病情兇險、致殘率和致死率高的特點。頸動脈粥樣硬化是引起急性腦梗死的重要病因，粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定或者斑塊破裂阻塞血管腔，使動脈血流量明顯減少，最終引發(fā)急性腦梗死[2]。載脂蛋白A1(apoA-1)由243個氨基酸殘基組成，是高密度脂蛋白的主要組成部分。apoA-1具有抗炎、抗動脈粥樣硬化的功能[3]。抗載脂蛋白A1抗體(抗apoA-1 IgG)是apoA-1的自身抗體，可抑制apoA-1功能而引起高密度脂蛋白失調(diào)，進(jìn)而參與動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn)，抗apoA-1 IgG通過介導(dǎo)動脈粥樣硬化而參與心血管疾病的發(fā)生發(fā)展[4]。基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)屬于基質(zhì)金屬蛋白酶家族成員，是可降解細(xì)胞外基質(zhì)的鋅依賴性蛋白酶。研究顯示，MMP-9在動脈粥樣硬化斑塊的形成及破裂過程中發(fā)揮重要作用[5]。本研究通過檢測血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平，探討二者在急性腦梗死患者頸動脈硬化發(fā)病中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2016年9月～2018年3月本院神經(jīng)內(nèi)科收治的急性腦梗死患者100例，納入標(biāo)準(zhǔn)：①CT或MRI檢查證實為急性腦梗死，并符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2014》中關(guān)于急性腦梗死的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；②首次發(fā)病，且發(fā)病至入院時間<1周。排除標(biāo)準(zhǔn)：①心功能不全；②肝、腎功能障礙；③急、慢性炎癥性疾??；④血液系統(tǒng)疾??；⑤自身免疫性疾??；⑥惡性腫瘤；⑦2周內(nèi)有創(chuàng)傷史或行外科手術(shù)；⑧入組前1個月內(nèi)服用過免疫抑制劑、類激素類藥物等。根據(jù)彩色多普勒超聲檢查的頸動脈內(nèi)-中膜厚度(IMT)將患者分為頸動脈粥樣硬化組(IMT≥1.00 mm，n=72)和頸動脈正常組(IMT<1.00 mm，n=28)，根據(jù)斑塊性質(zhì)將頸動脈粥樣硬化組分為穩(wěn)定型斑塊組(n=39)，不穩(wěn)定型斑塊組(n=33)。穩(wěn)定型斑塊組男20例、女19例，年齡(57.92±8.92)歲，BMI(24.35±2.27)kg/m2；不穩(wěn)定型斑塊組男18例、女15例，年齡(59.07±8.16)歲，BMI(23.98±2.54)kg/m2；頸動脈正常組男17例、女11例，年齡(56.79±8.57)歲，BMI(25.02±2.60)kg/m2。同期選取體檢健康者30例作為對照組，男16例、女14例，年齡(58.34±9.24)歲，BMI(24.67±2.52)kg/m2。各組性別、年齡、BMI具有可比性。本研究獲得醫(yī)院倫理委員會的批準(zhǔn)，研究對象及家屬均簽署知情同意書。

1.2 頸動脈超聲檢查 采用EPIQ-7型彩色多普勒超聲診斷儀(飛利浦投資有限公司)對患者雙側(cè)頸總動脈遠(yuǎn)段和球部、IMT、血管管腔內(nèi)徑進(jìn)行檢查。其中IMT是指管腔和血管內(nèi)膜交點的垂直距離，以頸總動脈遠(yuǎn)段、球部，頸內(nèi)動脈近段三個位點IMT的平均值為IMT最終值。同時評估IMT厚度及粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性。其中IMT<1.00 mm為頸動脈正常，IMT≥1.00 mm為頸動脈粥樣硬化，根據(jù)斑塊性質(zhì)將其分為穩(wěn)定型斑塊和不穩(wěn)定型斑塊。

1.3 血清抗apoA-1 IgG、MMP-9檢測 清晨采集各組空腹肘靜脈血5 mL，常溫條件下以3 000 r/min離心5 min，收集上清液置于-70 ℃環(huán)境中保存，待檢。用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清抗apoA-1 IgG、MMP-9?？筧poA-1 IgG試劑盒由北京百奧萊博科技有限公司提供，MMP-9試劑盒由艾萊薩生物科技有限公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行相關(guān)操作。

2 結(jié)果

2.1 各組血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平比較 各組血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)；穩(wěn)定型斑塊組、不穩(wěn)定型斑塊組血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平高于頸動脈正常組、對照組(P均<0.05)，且不穩(wěn)定型斑塊組血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平高于穩(wěn)定型斑塊組(P均<0.05)。見表1。

表1 各組血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平比較

2.2 急性腦梗死患者血清抗apoA-1 IgG水平與MMP-9的相關(guān)性 經(jīng)Pearson積矩相關(guān)分析，急性腦梗死患者血清抗apoA-1 IgG水平與MMP-9呈正相關(guān)(r=0.672，P<0.05)。

2.3 血清抗apoA-1 IgG、MMP-9對頸動脈粥樣硬化的預(yù)測價值 抗apoA-1 IgG的AUC為0.837，95%CI(0.740，0.899)，最佳截斷值為1.57 μg/mL，靈敏度、特異度分別為0.87、0.91，準(zhǔn)確度為0.83；MMP-9的AUC為0.816，95%CI(0.725，0.879)，最佳截斷值為1.97 ng/mL，靈敏度、特異度分別為0.81、0.77，準(zhǔn)確度為0.79；抗apoA-1 IgG聯(lián)合MMP-9的AUC為0.938，95%CI(0.839，0.982)，靈敏度、特異度分別為0.93、0.95，準(zhǔn)確度為0.89。

3 討論

急性腦梗死是臨床常見的腦血管疾病，發(fā)病率高，并呈年輕化趨勢，嚴(yán)重威脅人們健康和生命質(zhì)量，頸動脈粥樣硬化是其重要誘因。姚漢云等[7]研究結(jié)果顯示，約68.5%急性腦梗死患者有頸動脈斑塊，其中33.3%為不穩(wěn)定型斑塊；而Kitamura等[8]研究結(jié)果顯示，較頸動脈不伴粥樣硬化斑塊患者而言，伴粥樣硬化斑塊患者發(fā)生腦梗死的風(fēng)險增加3倍，提示斑塊破裂后暴露血管壁膠原以及脂質(zhì)，引起血小板聚集，造成凝血功能障礙，血栓形成導(dǎo)致血液供應(yīng)減少，發(fā)生腦梗死?？梢?，頸動脈斑塊在動脈粥樣硬化所致的急性腦梗死發(fā)病過程中具有重要作用[9]。尋找靈敏度高、特異度好且與動脈粥樣硬化密切相關(guān)的指標(biāo)，對輔助診斷急性腦梗死及評估病情嚴(yán)重程度有重要意義。

抗apoA-1 IgG與氧化應(yīng)激、內(nèi)皮功能障礙及炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，并且參與了心血管疾病的發(fā)病過程，增加了患者血栓事件的發(fā)病風(fēng)險[10]。此外，研究表明，抗apoA-1 IgG是連接動脈粥樣硬化與動脈粥樣硬化斑塊易損性之間的重要活性介質(zhì)，用抗apoA-1 IgG被動免疫小鼠模型，動脈粥樣硬化以及動脈粥樣硬化斑塊易損性明顯增加[11]。推測其機(jī)制可能與抗apoA-1 IgG使血流中的中性粒細(xì)胞浸潤至動脈粥樣硬化斑塊中，并使斑塊穩(wěn)定性減弱而增加其易損性有關(guān)[12]。MMP屬于鈣離子和鋅離子依賴性蛋白酶，參與了中樞神經(jīng)系統(tǒng)的病理生理過程，MMP-9是MMP家族成員之一，是一種分解細(xì)胞外基質(zhì)的多源糖蛋白，主要由中性粒細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等多種細(xì)胞合并并分泌。MMP-9主要作用于Ⅳ型、Ⅴ型明膠原，而Ⅴ型明膠原是粥樣斑塊底膜以及纖維帽的重要成分[13]。研究顯示，MMP-9在動脈粥樣硬化斑塊的形成、破裂過程中發(fā)揮重要作用，其機(jī)制主要為激活Ⅴ型明膠酶原，并誘導(dǎo)其進(jìn)入平滑肌細(xì)胞而促進(jìn)動脈粥樣硬化斑塊的破裂；MMP-9使覆蓋在斑塊表面的纖維帽遭到破壞，降低斑塊的穩(wěn)定性，增加斑塊易損性[14～18]。

關(guān)于抗apoA-1 IgG、MMP-9在急性腦梗死發(fā)病過程中的作用，目前相關(guān)研究相對較少。本研究發(fā)現(xiàn)，穩(wěn)定型斑塊組和不穩(wěn)定型斑塊組血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平高于頸動脈正常組、對照組，且不穩(wěn)定型斑塊組血清抗apoA-1 IgG、MMP-9水平最高，提示抗apoA-1 IgG、MMP-9與頸動脈粥樣硬化程度密切相關(guān)，可作為評估動脈粥樣硬化程度的重要指標(biāo)。該結(jié)果同時提示，抗apoA-1 IgG、MMP-9誘發(fā)頸動脈粥樣硬化斑塊形成，并加速斑塊的破裂而致組織動脈灌注障礙，血供不足導(dǎo)致腦梗死發(fā)生。Pearson積矩相關(guān)分析急性腦梗死患者血清抗apoA-1 IgG與MMP-9呈正相關(guān)，提示抗apoA-1 IgG與MMP-9協(xié)同作用介導(dǎo)頸動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程，進(jìn)而參與急性腦梗死的發(fā)病，其作用機(jī)制需進(jìn)一步研究證實。

采用AUC評估血清抗apoA-1 IgG與MMP-9對急性腦梗死頸動脈粥樣硬化的預(yù)測價值，結(jié)果顯示抗apoA-1 IgG與MMP-9對急性腦梗死頸動脈粥樣硬化具有較好的預(yù)測價值，進(jìn)一步分析顯示，抗apoA-1 IgG聯(lián)合MMP-9對急性腦梗死頸動脈粥樣硬化預(yù)測的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度更高。提示早期聯(lián)合檢測可明顯提高預(yù)測價值。

綜上所述，血清抗apoA-1 IgG與MMP-9通過參與頸動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程而介導(dǎo)急性腦梗死的發(fā)病，二者聯(lián)合檢測可作為預(yù)測頸動脈粥樣硬化的重要生物標(biāo)志物。