豬場(chǎng)PEDV和PCV2雙重感染的診斷及防控

(遵義市紅花崗區(qū)南關(guān)街道辦事處 農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心，貴州 遵義 563000)

1 發(fā)病情況

發(fā)病豬場(chǎng)曾在2016年底出現(xiàn)成年豬腹瀉，但很快得到好轉(zhuǎn)，并未引起重視。在2017年2月初開始出現(xiàn)哺乳仔豬腹瀉、嘔吐、被毛粗亂、消瘦等癥狀；隨著病情的逐步擴(kuò)散，發(fā)展為哺乳仔豬整窩死亡，死亡仔豬發(fā)病前未見明顯癥狀，病程短、急性死亡。曾用青鏈霉素、慶大霉素等抗生素進(jìn)行治療防控，但未見病情好轉(zhuǎn)。

2 剖檢癥狀

剖檢病死仔豬可見發(fā)病豬均嚴(yán)重消瘦脫水，肛周及腹股溝內(nèi)側(cè)粘滿腹瀉物。打開腹腔可見腸壁透薄、充氣(圖1)，腸系膜淋巴結(jié)出血，腎臟發(fā)育不全、且局部可見針尖狀出血點(diǎn)(圖2)，腹股溝淋巴結(jié)、頜下淋巴結(jié)嚴(yán)重出血、腫脹，其余臟器組織未見明顯病理變化。

圖1腸壁透薄且充氣圖2腎臟針尖狀出血

3 病毒PCR/RT-PCR檢測(cè)

將死豬的脾臟、肺臟、腎臟、淋巴結(jié)、腸內(nèi)容物及小腸黏膜進(jìn)行取樣研磨，反復(fù)凍融3次，用勻漿器進(jìn)行勻漿收集其勻漿液，12 000 rpm離心10 min，取其上清，用TaKaRa Min BEST Viral DNA/RNA Extraction Kit Ver.5.0 試劑盒分別提取總DNA/RNA，分別進(jìn)行豬流行性腹瀉病毒(PEDV)、豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)、豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)、豬圓環(huán)病毒3型(PCV3)、豬瘟病毒(CSFV)、豬偽狂犬病病毒(PRV)和豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRSSV)的PCR/RT-PCR擴(kuò)增。反應(yīng)結(jié)束后取5 μL PCR反應(yīng)產(chǎn)物于1%的1×TAE瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳檢測(cè)(90 V，35 min)，用凝膠成像系統(tǒng)觀察結(jié)果并拍照記錄。結(jié)果只檢測(cè)出PEDV和PCV2特異性核酸陽(yáng)性條帶(圖3)，分別將目的條帶膠回收不后送到上海英濰捷基有限公司進(jìn)行測(cè)序，再將測(cè)序結(jié)果在NCBI上進(jìn)行Blast比對(duì)，結(jié)果顯示分別與NCBI上已公布的PEDV和PCV2相應(yīng)序列核苷酸相似性在99.5%以上。

圖3 送檢豬PCR/RT-PCR檢測(cè)結(jié)果

M：DL5 000Marker； 1：PEDV 檢測(cè)結(jié)果； 2：CSFV 檢測(cè)結(jié)果； 3：PRRSV 檢測(cè)結(jié)果；4：PCV2 檢測(cè)結(jié)果；5：PCV3 檢測(cè)結(jié)果；6：PRV 檢測(cè)結(jié)果；7：TGEV 檢測(cè)結(jié)果

4 診斷

綜合流行發(fā)病情況調(diào)查、臨床癥狀分析、剖檢病理，病毒的PCR/RT-PCR檢測(cè)結(jié)果，確診該豬場(chǎng)送檢仔豬為PEDV和PCV2雙重感染。

5 防治

對(duì)發(fā)病豬進(jìn)行隔離；對(duì)檢測(cè)有PEDV和PCV2感染的患病豬根據(jù)養(yǎng)殖場(chǎng)具體情況進(jìn)行淘汰；對(duì)病死豬進(jìn)行深埋或焚燒處理；對(duì)污染的圈舍和四周環(huán)境進(jìn)行嚴(yán)格消毒，糞便發(fā)酵處理，對(duì)飼喂發(fā)病豬的器具使用季銨鹽、氯制劑、碘制劑等消毒藥品進(jìn)行交替消毒。針對(duì)豬場(chǎng)出現(xiàn)PEDV和PCV2感染嚴(yán)重并出現(xiàn)仔豬死亡的現(xiàn)象，建議豬場(chǎng)緊急接種豬PCV2滅活疫苗和豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯(lián)苗。PEDV是一種高度接觸性腸道傳染病，以嘔吐、腹瀉和食欲下降為基本特征，疫苗免疫是目前預(yù)防該病的重要的手段之一，由于發(fā)病日齡小、發(fā)病急、死亡率高，靠自身免疫往往來(lái)不及；因此妊娠母豬在產(chǎn)前1個(gè)月接種1次疫苗，可通過母乳使仔豬獲得被動(dòng)免疫。待疫情穩(wěn)定1個(gè)月后，對(duì)養(yǎng)豬場(chǎng)內(nèi)所有豬進(jìn)行其他常規(guī)免疫。PCV2感染可引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)，其病程由初期消化功能降低，逐步出現(xiàn)呼吸系統(tǒng)癥狀。持續(xù)性腹瀉或間歇性腹瀉致使致病性大腸桿菌大量繁殖，誘發(fā)水腫的現(xiàn)象；進(jìn)而繼發(fā)副豬嗜血桿菌感染，導(dǎo)致病豬呈現(xiàn)消瘦、腹瀉或呼吸道疾病臨床癥狀。綜上，豬場(chǎng)可根據(jù)實(shí)際情況采取以下措施可降低患病率：①提早斷奶，隔離飼養(yǎng)于已徹底清潔、消毒的保育圈舍；飼喂高營(yíng)養(yǎng)水平的代乳飼料，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理；可在發(fā)病豬群的飲水中適當(dāng)添加電解多維和葡萄糖。②加強(qiáng)產(chǎn)房環(huán)境衛(wèi)生并進(jìn)行徹底有效的消毒；盡早發(fā)現(xiàn)，及時(shí)隔離發(fā)病病豬。③如遇成年豬腹瀉，主要注意防止脫水和繼發(fā)感染，可在發(fā)病豬群的飲水中適當(dāng)添加電解多維和葡萄糖，在飼料中添加適量添加諾氟沙星或恩諾沙星以控制大腸桿菌的繼發(fā)感染。④應(yīng)重視加強(qiáng)母豬產(chǎn)前疫苗免疫預(yù)防。除此之外平時(shí)加強(qiáng)豬群飼養(yǎng)管理，控制飼養(yǎng)密度、實(shí)行嚴(yán)格的全進(jìn)全出制度、減少環(huán)境應(yīng)激因素、控制并發(fā)感染、保證豬群具有穩(wěn)定的免疫狀態(tài)、加強(qiáng)豬場(chǎng)內(nèi)部和外部的生物安全措施、購(gòu)豬時(shí)保證豬有相關(guān)的檢疫證明是預(yù)防控制本病、降低經(jīng)濟(jì)損失的有效措施。