松江區(qū)泖港鎮(zhèn)犬狂犬病免疫抗體評(píng)價(jià)

徐衛(wèi)青 上海市松江區(qū)泖港鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心 上海 201607

犬狂犬病是由狂犬病病毒引起的人畜共患病，臨床上以恐水、畏光、吞咽困難、狂躁等為主要表現(xiàn)特征[1]，是一種危害嚴(yán)重的人畜共患傳染病。該病一般通過(guò)被帶有病毒的動(dòng)物咬傷、舔舐或者抓傷等引起感染，病死率幾乎為100%，是迄今為止人類(lèi)病死率最高的急性傳染病[2]。據(jù)世界衛(wèi)生組織等調(diào)查發(fā)現(xiàn)，疫苗免疫接種是預(yù)防人感染狂犬病最有效的手段，當(dāng)犬群體免疫覆蓋率達(dá)到70%以上時(shí)，可有效抑制狂犬病傳播[3-4]。隨著農(nóng)村地區(qū)散養(yǎng)犬飼養(yǎng)數(shù)量的不斷增加，狂犬病的潛在威脅也變得越來(lái)越嚴(yán)峻。為了解泖港鎮(zhèn)犬狂犬病免疫抗體水平，于2014-2017年有計(jì)劃地對(duì)泖港鎮(zhèn)的散養(yǎng)犬開(kāi)展了狂犬病免疫抗體檢測(cè)，并進(jìn)一步作出分析，為更好地做好犬狂犬病的防控工作提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 待檢血清 隨機(jī)采自泖港鎮(zhèn)散養(yǎng)犬。

1.1.2 檢測(cè)試劑 狂犬病病毒抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）定性檢測(cè)試劑盒由北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)為：20140603、20150302、20160608、20170202。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)操作 將被檢血清及診斷試劑置21℃平衡至試驗(yàn)要求；用超純水將濃縮洗液作10倍稀釋?zhuān)挥脴悠废♂屢簩⒈粰z血清作1∶100稀釋?zhuān)粚㈥庩?yáng)性對(duì)照及臨界對(duì)照直接取100 L加入相應(yīng)孔中，臨界對(duì)照加3孔，陰陽(yáng)性對(duì)照各加1孔；在微量反應(yīng)板其余相應(yīng)孔中加入己處理被檢血清100 L，另留1孔不加樣品作空白對(duì)照，振蕩混勻，封膜，置37℃下孵育30 min；用約300 L洗滌液洗滌板孔，重復(fù)3次，每次靜置60 s，最后一次洗滌后將板拍干；除空白對(duì)照外，每孔加酶標(biāo)記物50 L，混勻，封膜，37℃下孵育30 min；用約300 L洗滌液洗滌板孔，重復(fù)3次，每次靜置60 s，最后一次洗滌后將板拍干；每孔加入底物和顯色劑各50 L，振蕩混勻，封膜，置37℃下孵育10 min；每孔加入終止液50 L，混勻，使反應(yīng)終止；酶標(biāo)儀上在單波長(zhǎng)450 nm讀取結(jié)果。

1.2.2 結(jié)果判定 在試驗(yàn)成立 (陰性對(duì)照值應(yīng)小于或等于0.15，臨界對(duì)照平均值應(yīng)在0.20～0.80)條件下：若樣品OD值≥臨界對(duì)照平均值，該樣品為狂犬病抗體陽(yáng)性；若樣品OD值＜臨界對(duì)照平均值，該樣品為狂犬病抗體陰性。

2 結(jié) 果

2.1 血清樣品數(shù)量 共采集了326份犬血清，見(jiàn)表1。

表1 2014-2017年散養(yǎng)犬血液樣品采集情況

2.2 結(jié)果 用ELISA方法共檢測(cè)犬血清326份，總抗體合格率為82.2%，其中2014年合格率較低，為71.1%，見(jiàn)表 2。

3 討 論

1）該次對(duì)犬狂犬病免疫抗體檢測(cè)的血液樣品是采用隨機(jī)抽樣進(jìn)行的，由于是散養(yǎng)犬，流動(dòng)性大、攻擊性較強(qiáng)，加上有些犬主不配合，給樣品的采集工作加大了難度，雖然樣本數(shù)量不夠多，但也具有一定的代表性，基本上反映了犬群狂犬病免疫抗體的現(xiàn)狀。

表2 2014-2017年散養(yǎng)犬狂犬病免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

2）從結(jié)果可以看出，雖然近四年犬狂犬病免疫抗體合格率有升有降，但近三年的結(jié)果顯示，犬群狂犬病免疫抗體水平逐步維持在一個(gè)相對(duì)平衡的狀態(tài)。免疫抗體水平的高低與疫苗免疫及樣品來(lái)源有關(guān)，相關(guān)研究表明狂犬病疫苗最后一次免疫時(shí)間與免疫抗體合格率存在相關(guān)性[5]。首先是免疫質(zhì)量，由于散養(yǎng)犬的攻擊性及犬主不配合，造成免疫劑量不足及漏免等現(xiàn)象存在；其次是免疫時(shí)間，散養(yǎng)犬的流動(dòng)性及不同年齡犬的混合，使疫苗免疫在時(shí)間上參差不齊；最后，人們對(duì)狂犬病危害的認(rèn)識(shí)不夠，主動(dòng)預(yù)防意識(shí)不強(qiáng)，存在僥幸心理，認(rèn)為免疫與不免疫無(wú)所謂，使免疫犬與未免疫犬共存，導(dǎo)致免疫抗體合格率的差異。

3）防治。由于狂犬病是一種危害嚴(yán)重的人畜共患急性傳染病，應(yīng)采取一系列綜合的防控措施。首先，加強(qiáng)監(jiān)測(cè)仍然是控制和消滅狂犬病的有效措施[6]，通過(guò)監(jiān)測(cè)，及時(shí)掌握犬群狂犬病的抗體水平現(xiàn)狀，為防控計(jì)劃提供依據(jù)；其次，加大對(duì)犬貓狂犬病的免疫工作力度，做到不留死角、杜絕漏免，并做好適時(shí)補(bǔ)針工作；再次，加強(qiáng)宣傳，提高人們對(duì)狂犬病的認(rèn)知度，增強(qiáng)自我防護(hù)意識(shí)，一旦被犬貓咬傷、舔舐或抓傷，應(yīng)及時(shí)對(duì)傷口進(jìn)行正確處理，并就醫(yī)；最后，健全基層動(dòng)物防疫體系建設(shè)，鞏固并提高獸醫(yī)從業(yè)人員的專(zhuān)業(yè)技術(shù)及操作技能，力爭(zhēng)做到狂犬病免疫密度達(dá)100%，免疫抗體合格率達(dá)100%，為控制和消滅狂犬病而不懈努力。