豬場豬瘟免疫情況調查及首免日齡優(yōu)化試驗

卓婷

摘 要：目的：調查豬場豬瘟的免疫情況以及通過優(yōu)化試驗確定最佳首免日齡。方法本次論文選擇對規(guī)?；i場的豬瘟免疫的整體情況進行調查，在調查基礎上，進行仔豬豬瘟首免日齡試驗，得到仔豬最佳的首免日齡。結果：2017年整體的豬瘟抗體水平均不夠理想，整體平均抗體水平陽性率只有66.45%，低于70%的陽性保護率水平。2018年，整體的豬瘟抗體水平有了大幅度的提高，平均陽性率達到了83.17%0最佳首免日齡試驗，14日齡免疫組和21日齡免疫組的抗體水平在免疫一周后均出現較大幅度的下降。兩周后，14日齡免疫組抗體水平仍在下降，21日齡免疫組上升緩慢。28日齡免疫組，在免疫后兩周整體的抗體水平均有明顯的上升，而35日齡免疫組兩周內抗體上升較緩慢。結論：對不同階段的豬群的抗體水平調查發(fā)現，哺乳仔豬、種公豬、后備豬、育肥豬的抗體水平較為理想，保育豬抗體水平陽性率為全場不同階段豬群最低。為達到較為理想的免疫效果，最佳的首免日齡應是仔豬28日齡。

關鍵詞：豬瘟；首免日齡；免疫情況；預防

中圖分類號：S858.28 文獻標識碼：A 文章編號：1004-7344（2018）21-0247-02

豬瘟又叫爛腸瘟，是由豬瘟病毒引起的一種急性、熱性、接觸性傳染病。該病是對豬危害較大的一種傳染病。資料報導21世紀前五年豬瘟發(fā)病率20～25%，每年豬瘟死亡占飼養(yǎng)量的3～5%，占病死豬30%[1]。

1 豬瘟發(fā)病的特點

1.1 流行特點

不分品種、性別、年齡，一年四季發(fā)生。目前主要發(fā)生于免疫豬群，早的十幾日齡，晚的成年豬。也可發(fā)生于初產和經產的母豬。據報導帶毒母豬產出的仔豬有長期病毒血癥，可持續(xù)排毒，病程緩慢，先后于2～11日齡引起死亡[2]。

1.2 癥狀特點

一般體溫升高、稽留熱，皮膚粘膜，尤其耳根、胸腹皮膚發(fā)紺呈敗血經過（見圖）。病程長的拱背，寒戰(zhàn)，厭食，初便秘后腹瀉、便秘交替發(fā)生，當糞便惡臭時附粘液，多在1周死亡，不死的轉慢性，體溫時高時低，食欲時好時壞，病程20d以上，多數轉歸死亡[3]。

2 豬瘟診斷

2.1 臨床診斷

根據上述流行特點和臨床癥狀，剖檢變化及治療情況進行綜合診斷。

2.2 實驗室診斷

（1）豬體免疫試驗：用病料接種易感豬觀察發(fā)病的情況，方法是取4只小豬，2只注免化弱毒苗，兩只對照，注苗12～14d后接病料免疫豬不發(fā)病，未免疫豬發(fā)病則判豬瘟陽性[4]。

（2）兔體交叉免疫試驗：根據豬瘟強毒不引起家兔的體溫反應，但能使家兔產生免疫力，當用兔化弱毒攻擊時不引起體溫升高的表現，先用病料接種兔，再用兔化弱毒攻擊。如病料含強毒可引起體溫反應。

2.3 免疫程序

（1）常規(guī)免疫程序：配種前注射過豬瘟苗的母豬。含有母源抗體仔豬。首免日齡20～25日齡，二免為50～60日齡。體弱，食欲不正常，發(fā)病豬注苗效果不好[5～6]。

（2）超前免疫：初生仔豬在吃乳前1～1.5h首免，斷奶后或60日齡2免。當豬場長期受豬瘟病毒嚴重污染時，仔豬免疫受到母源抗體影響，20日齡接種，使一部分豬成為易感豬，因個體差異母抗水平一致，如提前免疫受母抗干擾更多，推遲免疫得到抗體的保護降低。所以超前免疫是凈化豬場的好辦法，但母豬多在夜間分娩，同時產仔房溫度高，給免疫接種帶來一定困難[7～9]。

一般豬胎70日齡免疫系統(tǒng)對抗原刺激產生免疫應答，而仔豬獲得的母源抗體3h產生，6～12h達高峰[10]。

3 豬場豬瘟免疫情況調查

3.1 材料與方法

3.1.1 血清的來源

2017～2018年間，隨機采集11個規(guī)模化豬場，共6910份不同階段豬群的血清樣品，其中2017年3293份；2018年3617份。不同豬群采集記錄如表1所示。對仔豬從前腔靜脈進行采血，別的豬群要從耳緣靜脈進行采血。對血樣采集完成后，采取常規(guī)處理，將血清分離，并置于零下20℃保存，待測。

3.1.2 診斷試劑

采用美國IDEXX公司的豬瘟抗體阻斷ELISA試劑盒。

3.1.3 儀器設備

96孔酶標儀（美國寶特BIO-TEK公司，型號ELX800）、臺式離心機（上海安亭科學儀器廠，型號LXJ-IIC）、海爾冰箱（BCD-215KS）。

3.2 豬瘟抗體檢測方法

3.2.1 樣品和檢測試劑

被檢血清樣品；CSFV抗原包被板：CSFV陰、陽性對照血清；樣品稀釋液；（10x）洗滌液；HRPO標記的CSFV酶標抗體；TMB底物和終止液等。

3.2.2 檢測方法的原理

該檢測方法主要是采用阻ELISA原理，通過被CSFV包被的微量包被板，來檢測被測血清樣品中的CSFV抗體。室溫下，加入的被測樣品經過孵育，如果被測樣品中含有特異性的CSFV抗體，那么就會與CSFV抗原產生結合，繼而會阻斷HRPO標記的抗CSFV酶標抗體和抗原的結合。通過HRPO與TMB底物進行反應，反應后的顯色的深淺程度，可以判斷出酶標抗體和包被抗原的結合程度。

3.2.3 結果判斷

結論成立的條件：陽性對照：阻斷率>50%；陰性對照：平均OD值>0.500。

判斷條件如下：

陽性判定：阻斷率≧40%，被測樣品中有CSFV抗體存在；

陰性判定：阻斷率≦30%，被測樣品中無CSFV抗體存在；

可疑判定：30%≦阻斷率≦40%，該檢測結果的樣品來源動物要在數天之后進行抗體再次檢測。

3.3 豬群的整體豬瘟抗體水平情況（見表2）

4 合適首免日齡試驗

4.1 試驗設計

在調查基礎上，對規(guī)?；i場進行仔豬豬瘟首免日齡試驗，進而全面的了解哺乳仔豬母源抗體消長的規(guī)律，為確定最佳的首免日齡，制定科學合理的免疫程序提供依據。出生仔豬分別于0，1，7，14，21，28，35，42日齡從前腔靜脈采血2～3mL，進行血清分離，檢測抗體，每天對試驗仔豬的精神狀態(tài)，飲水、飲食，糞便、尿液進行觀察，看是否出現明顯的異常表現。

4.2 抗體檢測結果

5 討 論

通過對規(guī)模化豬場2017年和2018年共6910份的血清樣品進行了抗體檢測，結果表明，2017年的豬瘟抗體的水平都不理想，測試結果的整體平均陽性率要低于70%。2018年整體的豬瘟抗體的水平均有著顯著的提高，對不同階段的豬群，進行抗體水平調查，調查結果發(fā)現哺乳仔豬、種公豬、后備豬、育肥豬抗體水平都比較理想，其中保育豬的平均抗體水平是豬群最低。

首免日齡為28日齡的免疫組，免疫后兩周內抗體水平明顯上升，疫苗免疫效果比其他首免日齡免疫組要理想。結合哺乳仔豬在14日齡母源抗體水平開始下降，到35日齡時半數仔豬達不到臨界保護值的母源抗體水平消長規(guī)律，認為以28日齡為首免日齡的免疫方案較適合C畜牧公司。為達到較為理想的免疫效果，最佳的首免日齡應是仔豬28日齡。

參考文獻

[1]黃紅梅，陳鳳蓮，華 俊，等.廣西豬瘟病毒流行現狀及與HCLU免疫原性比較分析[A].中國畜牧獸醫(yī)學會動物傳染病學分會第三屆豬病防控學術研討會論文集，2015：105～109.

[2]羅 勇.陳刨夫，楊建疆，等.豬瘟疫苗超一前免疫效果觀察[J].畜牧獸醫(yī)雜志，2013，25（3）：6～7.

[3]黃 夏，覃芳蕓，等.廣西種豬場豬瘟免疫抗體調查與分析[J].中國獸醫(yī)雜志，2016，42（1）：26～27.

[4]江明甫，楊 紅，等.豬瘟免疫程序篩選優(yōu)化研究[J].疫病防治，2015，1：29～30.

[5]丁明孝，陸 寧，陳建日.豬瘟病毒及其疫苗研究[C].謝慶閣，翟中和，主編.畜禽重大疫病免疫研究進展.北京：中國農業(yè)科技出版社，2016.

[6]吳建敏，蔣冬福，等.廣西豬瘟流行現狀的調查分析[J].中國獸醫(yī)科技，2012，32（2）：16～18.

[7]王火平.仔豬豬瘟超前免疫的研究.[J].福建畜牧獸醫(yī)，2015，27（4）：8～9.

[8]張 宇，張憲強.對仔豬豬瘟疫苗乳-前免疫技術的研究.民營科技，2017，7：17～19.

[9]陸文俊，黃 夏，等.廣西部分種豬場豬瘟抗體監(jiān)測和免疫效果分析[J].畜牧與獸醫(yī)，2012.34（7）：26～27.

[10]劉 莉，金璐娟，楊 旭，等，規(guī)?；i場仔豬豬瘟母源抗體消退規(guī)律[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2014（10）：46～47.

收稿日期：2018-6-12

作者簡介：卓 婷（1979-），女，助理獸醫(yī)師，主要從事動物檢疫和動物防疫工作。