尿液核基質(zhì)蛋白22檢測在膀胱癌診斷中的臨床應用

周巍

[摘要] 目的 通過檢測尿液中的核基質(zhì)蛋白22，探討其在膀胱癌篩查中的臨床應用價值。 方法 收集2017年6～12月在我院就診的189例可疑膀胱癌患者的尿液標本，對其進行尿液核基質(zhì)蛋白22檢測與尿液脫落細胞學檢查，比較這兩種檢查方法對膀胱癌的診斷結(jié)果。 結(jié)果 尿液核基質(zhì)蛋白22和脫落細胞學檢測的敏感性分別為80.0%和57.6%，特異性分別為40.4%和94.2%，兩組敏感性和特異性比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。且兩種檢查方法對膀胱癌的陽性預測率分別為68.8%和29.1%，兩者比較差異顯著。 結(jié)論 尿液核基質(zhì)蛋白22作為新的標記物在臨床應用中對患者創(chuàng)傷性較小、敏感度較高，在膀胱癌的診斷中與尿脫落細胞結(jié)合篩查可作為首選方法。

[關(guān)鍵詞] 膀胱癌；尿液核基質(zhì)蛋白22；脫落細胞學；敏感性；特異性

[中圖分類號] R737.14 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2018）16-0132-03

[Abstract] Objective To investigate the clinical value of detecting nuclear matrix protein 22 in urine in the screening of bladder cancer. Methods Urine samples of 189 suspected bladder cancer patients who were treated in our hospital from June 2017 to December 2017 were collected. We performed urinary nuclear matrix protein 22 test and urine exfoliated cytology test to the urine samples. The diagnostic results of bladder cancer of the two tests were compared. Results The sensitivities of urinary nuclear matrix protein 22 and exfoliative cytology were 80.0% and 57.6%， and the specificities were 40.4% and 94.2%， respectively. There were significant differences in sensitivity and specificity between the two groups（P<0.05）. The positive predictive rates of the two methods for bladder cancer were 68.8% and 29.1%， respectively， with significant difference between the two methods. Conclusion Urine nuclear matrix protein 22 as a new marker is less invasive and has high sensitivity in the diagnosis of bladder cancer. Urine nuclear matrix protein 22 combined with exfoliative cytology may be the preferred method in clinic.

[Key words] Bladder cancer； Urine nuclear matrix protein 22； Exfoliative cytology； Sensitivity； Specificity

膀胱癌是指發(fā)生在膀胱黏膜上的惡性腫瘤，是泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，也是全身十大常見腫瘤之一，占我國泌尿生殖系腫瘤發(fā)病率的第一位[1，2]。我國膀胱癌年齡標準化發(fā)病率男性為3.8/10萬，女性為1.8/10萬。近年來，我國部分城市腫瘤發(fā)病率報告顯示膀胱癌發(fā)病率有增高趨勢。膀胱癌男性發(fā)病率為女性的3～4倍。膀胱癌的發(fā)生是復雜、多因素、多步驟的病理變化過程，既有內(nèi)在的遺傳因素，又有外在的環(huán)境因素。

目前臨床上篩查膀胱癌的方法較多，包括常規(guī)檢查、尿脫落細胞檢查、X造影檢查、膀胱鏡以及B超檢查[3]。膀胱鏡檢查是常用的可靠方法，可明確膀胱腫瘤的數(shù)目、大小、形態(tài)等。但存在尿道狹窄或膀胱有活動性出血不能進行膀胱鏡檢查，在出血或炎癥情況下準確性降低，另外在原位癌與正常組織難以區(qū)別。而尿液脫落細胞學檢查雖然快速與簡便，但敏感性略低[4]。尿液核基質(zhì)蛋白22（NMP22）診斷試劑盒能簡便、快速對可疑尿液標本進行篩查[5]。本研究分別采用尿脫落細胞學與NMP22試劑盒檢測了2017年6～12月就診的189例可疑膀胱癌患者的尿液標本，通過檢測結(jié)果比較來探討NMP22在膀胱癌篩查中的臨床應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年6～12月在我院泌尿外科收治的189例可疑膀胱癌患者為研究對象。其中男121例，女68例，年齡37～81歲，平均（59.6±3.2）歲。后經(jīng)手術(shù)病理或膀胱鏡活檢確診膀胱癌患者85例，其他泌尿系疾病患者104例。排除標準：泌尿系器械留置，合并有其他泌尿系惡性腫瘤者。

1.2 診斷方法

所有研究對象留取新鮮尿液標本100 mL送檢，在2 h內(nèi)對送檢標本進行脫落細胞學分級檢查和NMP22膠體金法定性檢查。尿脫落細胞學檢查將涂片中的細胞變化用四級分級方法表示，分為陰性、核異質(zhì)，可疑和陽性四級[6]。尿脫落細胞學檢查能夠客觀地反映細胞學所見。所有操作由同一具有副高職稱的人員進行，并對分級結(jié)果進行陰性和陽性統(tǒng)計。NMP22膠體金檢測嚴格按照說明書進行操作，所有標本在2 h內(nèi)檢測完成。該試劑盒利用裝在塑料盒中的橫流免疫層析條帶定性檢測患者尿樣中的核基質(zhì)蛋白。試驗使用了兩種不同的單克隆抗體：一種是捕獲抗體，另一種是報告抗體。將未經(jīng)處理的尿樣加4滴到塑料盒的樣品孔中，反應30 min后讀取定性結(jié)果。陽性結(jié)果：仔細觀察檢測板的檢測（T）區(qū)。在對照（C）線存在時，檢測（T）區(qū)的任何完整線，均表示結(jié)果陽性。陰性結(jié)果：仔細觀察檢測板的檢測（T）區(qū)。如果存在對照（C）線，而在檢測（T）區(qū)無任何顏色線條出現(xiàn)，即表示結(jié)果為陰性。無效結(jié)果：如果程式對照（C）區(qū)無條帶出現(xiàn)，或檢測（T）線涂抹不清或不完整，試驗無效，必須用新檢測板重測。無效結(jié)果的最常見原因是未能向加樣孔加足4大滴尿樣或尿液中有氣泡[7]。

1.3評價指標

分別計算NMP22檢測、尿脫落細胞檢查兩種方法對膀胱癌的檢出率。最終以患者的組織病理學診斷結(jié)果作為判斷依據(jù)，分別對NMP22與尿脫落細胞學檢查診斷膀胱癌的敏感度、特異性、準確度進行計算。

1.4統(tǒng)計學方法

采用SPSSl7.0軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標準差表示，多樣本均數(shù)比較采用方差分析，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

研究結(jié)果顯示，NMP22檢測和尿脫落細胞檢查兩種方法對膀胱癌的檢測陽性率分別為68.8%（130/189）和29.1%（55/189）。以組織病理學診斷結(jié)果為依據(jù)，則其檢測敏感度分別為80.0%（68/85）、57.6%（49/85），特異性分別為40.4%（42/104）、94.2%（98/104），準確度分別為58.2%（110/189）、77.8%（147/189）?？梢奛MP22檢測在陽性率和敏感度方面要顯著高于尿脫落細胞檢查，而在特異性和準確度方面低于尿脫落細胞檢查，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表1、表2。

3 討論

早期診斷膀胱癌并給予相應的治療對改善患者預后有著十分重要的意義[8]。為了提高無創(chuàng)檢測膀胱癌的水平，尿液膀胱癌標記物的研究受到了很大的關(guān)注，美國FDA已經(jīng)批準NMP22、FISH等用于膀胱癌的檢測，其中NMP22是受關(guān)注較多的一種，在檢測膀胱癌的臨床研究中顯示了較高的性能。NMP22是參與維持細胞核功能的一種三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)蛋白，參與構(gòu)成細胞核內(nèi)部框架，并與DNA復制、RNA合成、激素合成有關(guān)。進一步研究表明核基質(zhì)蛋白參與了基因表達的調(diào)節(jié)和協(xié)調(diào)[9，10]。核有絲分裂器蛋白在核基質(zhì)蛋白中占有很大的比例，在腫瘤細胞內(nèi)，核有絲分裂器蛋白的升高與惡性細胞的細胞核結(jié)構(gòu)/形態(tài)改變相符合。由于細胞死亡（如凋亡），該蛋白從細胞內(nèi)釋放出來并達到可檢測的水平。據(jù)報道，膀胱癌上皮細胞內(nèi)NMP22的表達量是正常的25倍之多，所以NMP22可能作為膀胱癌特有的標記物[11-13]。利用膠體金法可以快速檢測尿液中的NMP22含量，且具有較高的敏感度和特異性，在早期膀胱癌的篩查中具有很好的應用價值[14]。

楊青等[15]的研究表明，尿脫落細胞學檢查對膀胱癌診斷的敏感性為42.6%，特異性為86.7%。在本研究中分別采用尿脫落細胞檢查和NMP22檢測兩種方法對189例可疑膀胱癌患者尿液標本進行了檢查，結(jié)果表明NMP22檢測在陽性率和敏感度上均相對較高，證明NMP22可以作為膀胱癌檢測的敏感指標。因此可將NMP22列入體檢項目中，可以排除高危人群，對出現(xiàn)血尿或疑似膀胱癌患者，NMP22檢測能快速輔助醫(yī)生進行診斷。NMP22也可適用于長期吸煙史、化工職業(yè)等高危因素人群篩查、有臨床血尿的患者以及中低危非肌層浸潤性膀胱癌患者術(shù)后的隨診。但NMP22的檢測結(jié)果特異性比較低，僅為40.4%，因此不能作為確診膀胱癌的唯一手段。任何可以導致核基質(zhì)蛋白在尿液中出現(xiàn)的疾病均可以產(chǎn)生陽性結(jié)果。陽性結(jié)果也可見于某些患泌尿道良性疾病，前列腺癌和活動癌癥治療期的患者。單獨使用NMP22檢測試劑盒（膠體金法）的結(jié)果不能被看作是膀胱惡性疾病有或無的證據(jù)。在疾病診斷和患者護理中要綜合考慮其他臨床認可的試驗和檢查手段。

尿脫落細胞學作為常用傳統(tǒng)方法，其對分級低的膀胱癌敏感性較低，一方面是由于腫瘤細胞分化較好，其特征與正常細胞相似，不易鑒別。另一方面由于癌細胞之間粘結(jié)相對緊密，無足夠多的癌細胞脫落到尿中而被檢測到，所以尿細胞學陰性并不能排除低級別尿路上皮癌的存在。但細胞脫落學檢查特異性高達94.2%，可與NMP22聯(lián)合檢測，提高檢出率和特異性的同時減少膀胱鏡有創(chuàng)檢測給患者帶來的痛苦。

總之，尿NMP22檢測在膀胱癌的篩查中具有較高的敏感度，可以將其作為膀胱癌的首選篩查方法，在臨床上可聯(lián)合細胞脫落學檢查，減少漏診，做到早發(fā)現(xiàn)、早治療。

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（收稿日期：2018-02-05）