淺析微生物標(biāo)本培養(yǎng)前涂片革蘭染色鏡檢的臨床研究意義

胡品

貴航貴陽(yáng)醫(yī)院，貴州貴陽(yáng) 550000

微生物培養(yǎng)、檢驗(yàn)對(duì)患者臨床治療有著指導(dǎo)作用，近年來(lái)，隨著細(xì)菌耐藥性不斷升高，微生物檢測(cè)在臨床中的應(yīng)用率越來(lái)越高。微生物檢測(cè)能夠?qū)颊呒膊≡\斷、治療進(jìn)行指導(dǎo)，微生物檢驗(yàn)結(jié)果直接影響患者用藥合理性和治療效果，而微生物標(biāo)本培養(yǎng)前開(kāi)展革蘭染色鏡檢直接影響檢驗(yàn)結(jié)果，同時(shí)能夠降低資源浪費(fèi)[1]。該次研究在2017年4月—2018年4月間以136份微生物標(biāo)本為樣本，調(diào)查微生物標(biāo)本培養(yǎng)前涂片革蘭染色鏡檢的意義，旨在為臨床提供參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以該院送檢的136份微生物標(biāo)本為樣本，包括門(mén)診樣本和住院部樣本。其中痰液標(biāo)本32份、尿液標(biāo)本53份、分泌物標(biāo)本41份，其他標(biāo)本10份。金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌來(lái)自我省檢驗(yàn)中心。

1.2 方法

涂片染色鏡檢：于載玻片中心滴一滴生理鹽水，用無(wú)菌棉簽蘸取少許標(biāo)本混入生理鹽水中，而后采用無(wú)菌針將標(biāo)本與生理鹽水混勻，放在通風(fēng)處自然風(fēng)干。標(biāo)本風(fēng)干后放在酒精燈上加熱干燥，而后進(jìn)行革蘭染色、鏡檢。

培養(yǎng)與鑒定：將標(biāo)本接種在不同的平板上，包括血平板、巧克力板等，將接種后的平板放在5.0%二氧化碳、33～37℃環(huán)境中培養(yǎng)24～48 h。而后觀察培養(yǎng)菌、優(yōu)先致病菌，并提取上述菌落進(jìn)行涂片、染色、鏡檢。

1.3 判定標(biāo)準(zhǔn)

合格標(biāo)準(zhǔn)：痰液標(biāo)本為膿性、粘稠性或血性樣，低倍鏡視野中白細(xì)胞數(shù)量不低于25個(gè)，鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)量不高于10個(gè)視為合格標(biāo)本。部分標(biāo)本白細(xì)胞數(shù)量會(huì)低于25。如若發(fā)現(xiàn)形態(tài)明顯的致病菌或致病菌的染色形態(tài)要立刻進(jìn)行培養(yǎng)并回報(bào)結(jié)果[2]。

尿液標(biāo)本在油視鏡觀察下平均每個(gè)視野有一個(gè)以上細(xì)菌則證明感染可能性非常高，需要進(jìn)行進(jìn)一步篩查。若油視鏡下視野達(dá)到平均每個(gè)視野有一個(gè)以上的細(xì)菌標(biāo)準(zhǔn)則視為合格標(biāo)本。

涂片、培養(yǎng)結(jié)果符合性：涂片中疑似致病菌形態(tài)、性質(zhì)與培養(yǎng)結(jié)果基本相同視為符合。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

文中數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 標(biāo)本合格率以及菌種

136份標(biāo)本中合格標(biāo)本125份，不合格的標(biāo)本9份。有4份為痰液標(biāo)本，有3份為尿液標(biāo)本，有2份為其他標(biāo)本。痰液標(biāo)本中肺炎克雷伯菌檢測(cè)數(shù)量最多，13個(gè)；尿液標(biāo)本中屎腸球菌檢測(cè)數(shù)量最多，6個(gè)；分泌物標(biāo)本中大腸埃希菌檢測(cè)數(shù)量最多，8個(gè)；其他標(biāo)本中大腸埃希菌檢測(cè)數(shù)量最多，4個(gè)。見(jiàn)表1。

表1 菌落培養(yǎng)狀況

2.2 合格涂片與培養(yǎng)結(jié)果符合率

痰液標(biāo)本鏡檢結(jié)果與培養(yǎng)結(jié)果的符合率為66.7%、尿液標(biāo)本符合率為77.8%、分泌物標(biāo)本符合率為 85.0%、其他標(biāo)本符合率為 100.0%（χ2=1.25、1.17、1.09、1.00，P＜0.05），詳見(jiàn)表 2。

表2 涂片與培養(yǎng)結(jié)果符合率

3 討論

涂片鏡檢是將微生物標(biāo)本制成涂片進(jìn)行革蘭染色而后在顯微鏡下觀察微生物形態(tài)確定是否存在致病菌以及致病菌種類(lèi)[3-4]。涂片鏡檢能夠?qū)?xì)菌種類(lèi)進(jìn)行鑒別，了解細(xì)菌耐藥類(lèi)型以及耐藥程度，對(duì)患者疾病進(jìn)行診斷，對(duì)需要補(bǔ)充的檢查進(jìn)行提示，判斷標(biāo)本合格率，更有利于細(xì)菌的鑒定[5-6]。

結(jié)果可見(jiàn)，136份標(biāo)本中合格標(biāo)本125份，不合格的標(biāo)本9份。有4份為痰液標(biāo)本，有3份為尿液標(biāo)本，有2份為其他標(biāo)本。不合格的涂片均符合上述標(biāo)準(zhǔn)，因此，在開(kāi)展培養(yǎng)前需要對(duì)涂片進(jìn)行鏡檢，針對(duì)不合格的標(biāo)本進(jìn)行篩除。篩除不合格的標(biāo)本不僅能夠提升檢驗(yàn)準(zhǔn)確率，有利于患者疾病診斷，同時(shí)能夠指導(dǎo)臨床合理用藥，同時(shí)也能夠降低患者經(jīng)濟(jì)損失，也能夠減少醫(yī)療資源浪費(fèi)[7-9]。

在表2中可見(jiàn)，痰液標(biāo)本鏡檢結(jié)果與培養(yǎng)結(jié)果的符合率為66.7%、尿液標(biāo)本符合率為77.8%、分泌物標(biāo)本符合率為85.0%、其他標(biāo)本符合率為100.0%，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。針對(duì)不符合的標(biāo)本進(jìn)行分析后我們認(rèn)為，導(dǎo)致結(jié)果誤差的因素與以下原因有關(guān)。①涂片過(guò)薄或標(biāo)本取材部位不當(dāng)；②細(xì)菌在鏡下呈現(xiàn)的狀態(tài)不同，容易混淆；③接種過(guò)程中標(biāo)本被污染或標(biāo)本保存不當(dāng)受到污染。

在張國(guó)英等[10]的研究中可見(jiàn)，365份送檢標(biāo)本中不合格標(biāo)本17份，348份合格標(biāo)本中培養(yǎng)陽(yáng)性93份，痰液標(biāo)本、尿液標(biāo)本、分泌物標(biāo)本和其他標(biāo)本的涂片與培養(yǎng)結(jié)果符合率分別為76.6%、62.5%、87.1%、80.0%。與該院的結(jié)果基本相同，證明了該院獲得的研究數(shù)據(jù)和結(jié)果可靠。也證明了在標(biāo)本培養(yǎng)前開(kāi)展涂片鏡檢會(huì)直接影響微生物檢驗(yàn)結(jié)果，為臨床提供感染信息，對(duì)疾病用藥、預(yù)防進(jìn)行指導(dǎo)。

綜上所述，在微生物標(biāo)本培養(yǎng)前開(kāi)展革蘭染色鏡檢能夠有效保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，具有非常重要的應(yīng)用價(jià)值。