輔助生殖技術治療不孕不育癥的研究

莎如拉 云志中 田瀟峰 任宇 孫文芳 馬玉珍

近年來不孕不育癥患者呈逐年增長趨勢, 給患者帶來了巨大的精神壓力和家庭的不穩(wěn)定。自從1978年世界上首例“試管嬰兒”誕生以來, 輔助生殖技術應用于不孕不育癥的治療, 到目前為止, 出生的試管嬰兒已經達到500萬人, 輔助生殖技術成為了不孕不育夫婦重要的治療手段。本研究回顧性分析了2010年6月～2012年12月在內蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院用輔助生殖技術治療不孕不育癥患者的情況, 比較不同助孕方案下卵母細胞的成熟率、優(yōu)胚率、著床率、妊娠率以及出生嬰兒的健康情況, 研究輔助生殖技術治療的優(yōu)越性和安全性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年6月～2012年12月在內蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院就診的不孕不育癥患者118例, 其中63例行常規(guī)IVF-ET助孕；52例行單精子卵胞漿內注射(ICSI-ET)(其中15例行Half-ICSI)助孕, 其中3例取卵后卵母細胞未受精, 取消移植。115例輔助生殖助孕患者平均年齡為32.22歲,平均不孕年限為3.76年, 基礎卵泡刺激素(FSH)、促黃體生成素 (LH)、雌二醇 (E2)平均值分別為 4.51 mIU/ml、3.37 mIU/ml、40.50 pg/ml；取卵日 E2平均為 2868.81 pg/ml。

1.2 實驗方法

1.2.1 促排卵方案 控制性促排卵方案采用促性腺激素釋放激素(GnRHa, 商品名：達菲林)長/短方案, 微刺激方案,促排卵藥物為重組FSH(商品名：果納芬)及尿促性腺激素(HMG)。1～2 個主導卵泡直徑≥18 mm 時 , 注射 hCG 10000 IU或重組 hCG(商品名 ：艾澤 )250 μg, 34～36 h 行陰道 B 超引導下穿刺取卵。

1.2.2 體外受精 取出成熟卵母細胞復合體于1 ml受精液中, 5.5% CO2、37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)。同時取出精液梯度離心分離活精子, 將適量前向運動的精子加入卵母細胞中, 受精4 h,顯微鏡下去顆粒細胞, 將卵母細胞移到發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng), 觀察原核確定受精情況。

1.2.3 卵胞漿內單精子顯微注射 取出成熟卵母細胞復合體于 1 ml受精液中 , 5.5%CO2、37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2 h, 10% 透明質酸酶去顆粒細胞, 再將卵母細胞培養(yǎng)2 h, 在顯微鏡下挑選前向運動精子尾部制動后, 將其注射卵母細胞胞漿中, 移入發(fā)育液中繼續(xù)培養(yǎng)。

1.2.4 胚胎移植 根據(jù)胚胎中細胞數(shù)、胞質碎片以及細胞均一性將胚胎分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級。35歲以下患者移植胚胎2枚, 35歲以上患者移植3枚, 有卵巢過度刺激風險者,取消胚胎移植。

1.2.5 胚胎的冷凍保存 移植后剩余胚胎經玻璃化冷凍技術冷凍保存于液氮中。

1.3 觀察指標 胚胎移植后14 d測血hCG, 確定是否妊娠,移植后28～30 d B超確定孕囊。并且對于試管嬰兒進行隨訪。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示, 采用t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 輔助生殖助孕患者的基本特征 卵母細胞成熟率為 85.77%, 受精率為 79.78%, 優(yōu)胚率為 61.21%, 著床率為35.66%, 妊娠率為 55.65%, 累積妊娠率為 62.61%, 其中生化妊娠為5例, 流產7例, 宮外孕1例, 持續(xù)妊娠率為51.30%,至2013年8月56例孕婦出生試管嬰兒72例, 雙胎率為28.57%, 活產率為 97.22%, 男嬰 34 例 , 女嬰 38 例 , 所有嬰兒均身體健康, 發(fā)育正常。

2.2 不同助孕方式胚胎及妊娠情況分析 115例患者在助孕方式上分別選擇了IVF、ICSI或IVF/ICSI三種方案, 三種助孕方案患者在卵母細胞成熟率、受精率、優(yōu)胚率比較差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。IVF/ICSI方案著床率、妊娠率和持續(xù)妊娠率均顯著高于IVF方案和ICSI方案, 差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表1。

2.3 不同促排卵方案助孕患者胚胎及妊娠情況 三種促排卵方案患者卵母細胞成熟率、受精率、優(yōu)胚率、著床率比較差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05), 長方案和微刺激方案妊娠率和持續(xù)妊娠率明顯高于短方案, 差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。微刺激方案與長方案妊娠率、持續(xù)妊娠率比較差異均無統(tǒng)計學意義 (P＞0.05)。見表 2。

表1 不同受孕方式輔助生殖情況比較(%)

表2 不同促排卵方案輔助生殖情況比較

2.4 試管嬰兒出生情況比較 56例患者經輔助生殖技術生產試管嬰兒72例, 雙胎率為28.57%, 其中早產4例, 56例分娩患者中, 剖宮產47例。胎兒平均體重2911.06 g, 平均身長50.04 cm, Apgar評分 8.46 分。

3 討論

IVF和ICSI是目前人類輔助生殖領域最常用的技術。通過數(shù)據(jù)比較發(fā)現(xiàn)IVF、ICSI以及IVF/ICSI方案在受精率、優(yōu)胚率和胚胎著床率等方面沒有顯著性差異, 而IVF/ICSI方案的妊娠率顯著高于IVF和ICSI方案, 因此, 針對獲卵數(shù)較多且不明原因不孕多年以及IVF受精失敗的患者采用部分ICSI, 避免了周期失敗率 , 獲良好的臨床妊娠結局［1-3］。

臨床上常用的超促排卵方案包括長、短、超短、超長、1/5長方案各有其優(yōu)勢［4,5］。長方案因其對LH的抑制迅速并持久而被用于年輕、月經周期規(guī)律的婦女；短方案因其有上調節(jié)作用而用于年齡偏大和既往有排卵障礙的婦女。但短方案促排卵周期中卵泡發(fā)育同步性較差, 可能造成獲卵數(shù)較少；微刺激方案不抑制內源性FSH的升高, 模擬生理狀態(tài)下卵子的生長, 減少外源促性腺激素(Gn)的作用, 降低卵巢過度刺激綜合征(OHSS)的發(fā)生, 減少出生缺陷及出生后的遠期風險, 是卵巢儲備能力不足患者的優(yōu)先之選；在本中心115例試管嬰兒周期中長、短、微刺激方案的采用率分別為79.46%、8.93%和6.25%, 在獲卵數(shù)方面長方案顯著優(yōu)于短方案、微刺激方案, 在妊娠率、持續(xù)妊娠率方面短方案較長方案與微刺激方案更高, 長方案與微刺激方案之間比較, 差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。由此可見長方案的使用具有優(yōu)越性,獲得了55%以上的臨床妊娠率, 而在處理特殊患者時采用個體化的短方案、微刺激方案等能夠很大限度地改善助孕效果,使更多患者獲得生育的機會。

試管嬰兒的健康狀況是人們關注的焦點。目前, 國外的研究認為試管嬰兒的生長和健康與自然受孕兒并無顯著性差異, 慢性疾病和常見病的發(fā)生率未見增加, 其智力、情感和心理發(fā)育也與自然受孕相似；同時, 臨床數(shù)據(jù)統(tǒng)計顯示試管嬰兒的早產率和流產率也接近自然妊娠, 但多胎妊娠率較高［6,7］。本中心 56例分娩患者出生試管嬰兒 72例 , 其中男嬰34例, 女嬰38例。雙胎率為28.57%, 高于自然受孕。新生試管嬰兒的平均出生身長, 體重均達到正常標準, 并且胎兒出生后的生長及健康狀況良好。與同期出生的自然受孕胎兒比較均沒有顯著性差異。雙胎率顯著高于自然受孕婦女。

綜上所述, 試管嬰兒技術作為一種積極的人工助孕手段不僅能夠實現(xiàn)不孕不育夫婦孕育生命的愿望, 而且能夠獲得一個與自然受孕兒童相同的健康后代。