飼料添加凝結(jié)芽孢桿菌及枯草芽孢桿菌對生長豬的生長性能影響

王乙茹，白華毅，王桂瑛，楊保和，廖國周，竇舒民，魏麗萍，劉元述，李云輝，程志斌*

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，云南 昆明 650201；2.云南快大多畜牧科技有限公司，云南 玉溪 653100;3.昆明三正生物科技（集團）有限公司，云南 昆明 650217；4.云南省西雙版納州勐臘縣農(nóng)業(yè)和科技局，云南 勐臘 666300）

飼用凝結(jié)芽孢桿菌具有飼用乳酸菌（產(chǎn)酸、抑菌）與飼用芽孢桿菌（耐熱、抗逆）的共同優(yōu)勢[1-3]。2013年12月我國農(nóng)業(yè)部頒布的《飼料添加劑品種目錄》規(guī)范凝結(jié)芽孢桿菌可應(yīng)用于生長育肥豬[4-5]。然而，目前凝結(jié)芽孢桿菌應(yīng)用于生長育肥豬飼料中的試驗報道較少[6-7]。這顯然不利于凝結(jié)芽孢桿菌這一新型飼用微生態(tài)制劑的應(yīng)用推廣。

此外，枯草芽孢桿菌是我國飼料工業(yè)與養(yǎng)殖業(yè)推廣最早、使用最廣的飼用微生態(tài)產(chǎn)品[8-10]。當前應(yīng)用的飼用微生態(tài)商品往往是多菌種的復(fù)合（組合）產(chǎn)品[11-12]。因此，本試驗探索性研究單一或組合使用飼用凝結(jié)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌對30～60 kg生長豬的效果，為安全飼用微生態(tài)制劑及應(yīng)用方案推廣，奠定科學(xué)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

飼用凝結(jié)芽孢桿菌制劑80×108cfu·g-1，飼用枯草芽孢桿菌制劑200×108cfu·g-1，均由昆明三正生物科技（集團）有限公司提供。

1.2 試驗動物與試驗設(shè)計

本試驗挑選體重相近（30.2±0.3 kg）的杜×長×大（DLY）健康商品閹公豬28頭，隨機分為4個處理組，每個處理組7頭，代謝籠單籠飼養(yǎng)。依據(jù)添加劑使用的不同，試驗設(shè)計見表1。

表1 試驗設(shè)計

1.3 試驗飼糧

試驗飼料參照國家農(nóng)業(yè)部《豬飼養(yǎng)標準NT/T 65-2004》，同時考慮云南省市場實際情況，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2。試驗飼料為顆粒飼料，制粒溫度75℃，由云南快大多畜牧科技有限公司生產(chǎn)。

表2 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平

1.4 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗在云南省祿勸縣畜牧獸醫(yī)總站豬場進行。試驗期間每天8:00、12:30、18:00定時飼喂，自由飲水，免疫、消毒、衛(wèi)生等飼養(yǎng)管理按常規(guī)進行。飼養(yǎng)試驗至對照組平均體重約達60 kg結(jié)束，試驗期42 d。

1.5 測定指標

1.5.1 生長性能

測定豬體重、采食量，計算平均日增重、平均日采食量、飼料增重比等指標。

1.5.2 飼料表觀消化率試驗

采用內(nèi)源指示劑法測定試驗豬對飼料主要營養(yǎng)組分的表觀消化率[13]。試驗35 d開始，預(yù)飼期3 d，之后連續(xù)收集4 d糞樣，-20℃保存。待試驗結(jié)束后，糞樣統(tǒng)一解凍，于60±3℃烘干，粉碎后待檢測。實驗室分析測定飼料干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、總能等表觀消化率，在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)云南省動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)重點實驗室完成。

1.6 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SAS統(tǒng)計軟件進行單因素統(tǒng)計分析，并進行Duncan's多重比較，結(jié)果以“平均值±標準誤”表示。

2 試驗結(jié)果

2.1 飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌對生長豬生長性能的影響

飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌對生長豬生長性能的影響見表3。

由表3可知，試驗組1豬的平均日增重顯著高于其他3個處理組（P＜0.05），且其他3個處理組平均日增重差異不顯著（P＞0.05）。試驗組1飼料增重比顯著低于其他3個處理組（P＜0.05），且其他3個處理組飼料增重比差異不顯著（P＞0.05）。此外，試驗全期4個處理組的末重和平均日采食量差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌對生長豬飼料養(yǎng)分表觀消化率的影響

飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌對生長豬飼料養(yǎng)分表觀消化率的影響見表4。

由表4可知，試驗組1干物質(zhì)表觀消化率與試驗組3差異不顯著（P＞0.05），但顯著高于對照組和試驗組2（P＜0.05）。試驗組1總能表觀消化率最大（P＜0.05），試驗組2最小（P＜0.05），試驗組3與對照組差異不顯著（P＞0.05）。此外，4個處理組粗蛋白質(zhì)、粗脂肪的表觀消化率指標，差異不顯著（P＞0.05）。

表3 飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌對生長豬生長性能的影響

表4 飼用凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌對生長豬飼料養(yǎng)分表觀消化率的影響

3 討論

理論上30～60 kg的生長豬腸道消化生理、免疫系統(tǒng)發(fā)育已較完善，和幼齡仔豬相比較不易發(fā)生飼料消化不良及腹瀉等腸道疾病[14-16]。因此無需在生長豬飼料中添加飼用抗生素及化學(xué)合成抑菌藥物[17-18]。由于飼料原料品質(zhì)不穩(wěn)定、養(yǎng)殖條件及飼養(yǎng)管理水平參差不齊等客觀因素，迫使廣大飼料企業(yè)配方師還是在飼料中使用飼用抗生素或化學(xué)合成抑菌藥物，以保障企業(yè)飼料產(chǎn)品的市場競爭力[2,6]。這顯然不符合未來“減抗、無抗”生豬養(yǎng)殖的發(fā)展趨勢[19-20]。依據(jù)農(nóng)業(yè)部《飼料添加劑品種目錄（2013）》，飼用凝結(jié)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌應(yīng)用于生長育肥豬飼料的規(guī)范，本試驗以桿菌肽鋅為對照組，探索性研究單一或組合添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌，對30～60 kg階段生長豬生長性能的影響，為高效“無抗”豬的養(yǎng)殖飼料提供借鑒方案。

本試驗基礎(chǔ)飼糧采用云南地區(qū)的典型商業(yè)飼料，對照組飼糧的桿菌肽鋅添加量為40 g·t-1，符合安全使用規(guī)范[21]?？茖W(xué)考慮試驗結(jié)果的可比性，試驗組1飼用凝結(jié)芽孢桿菌添加劑量、試驗組2飼用枯草芽孢桿菌添加劑量，均設(shè)置為2×106cfu·g-1（全價配合飼料），以比較觀察兩個飼用微生態(tài)制劑的實際養(yǎng)殖效果。在平均日采食量差異不顯著的條件下，單一添加凝結(jié)芽孢桿菌的試驗組1豬只平均日增重最高、飼料增重比最低，且兩個指標顯著優(yōu)于添加桿菌肽鋅的對照組。結(jié)果表明，選擇品質(zhì)穩(wěn)定的飼用凝結(jié)芽孢桿菌產(chǎn)品，并在30～60 kg的生長豬飼料中添加量達2×106cfu·g-1（全價配合飼料），能夠保障生長豬正常的生長性能。本試驗研究結(jié)果與課題組前期的報道及李建國研究結(jié)果一致[6-7]。凝結(jié)芽孢桿菌在豬腸道內(nèi)增殖、增生的過程中，產(chǎn)生L-乳酸，不僅具有直接殺菌抑菌功效，而且凝結(jié)芽孢桿菌能夠分泌消化酶，有利于補充和提高腸道消化酶，改善飼料轉(zhuǎn)化效率[22-27]。據(jù)此，本試驗進一步分析了試驗豬對飼糧養(yǎng)分的表觀消化率，試驗組1飼料干物質(zhì)和總能的表觀消化率兩個指標顯著優(yōu)于對照組。說明在30～60 kg生長豬的一般商業(yè)性顆粒飼料產(chǎn)品中，單一使用飼用凝結(jié)芽孢桿菌2×106cfu·g-1能夠獲得較好的實際養(yǎng)殖效果。

此外，本試驗還發(fā)現(xiàn)，總體上添加相同劑量飼用枯草芽孢桿菌（2×106cfu·g-1）的試驗組2（單一添加枯草芽孢桿菌）和試驗組3（同時添加枯草芽孢桿菌和凝結(jié)芽孢桿菌）的豬生長性能與對照組差異不顯著，甚至試驗組2和試驗組3的飼料增重比數(shù)值還略高于對照組。綜合分析可能是以下原因影響了本次試驗結(jié)果：飼用微生態(tài)制劑的菌株特性影響使用效果的發(fā)揮。

本試驗采用的商業(yè)飼料產(chǎn)品由麥麩、油米糠、DDGS等多種非常規(guī)飼料原料組成，存在有害細菌、霉菌感染較高的風(fēng)險。桿菌肽鋅是目前使用最為普遍的飼用抗生素，有較好的抑菌效果，這可能是對照組豬保持較好生長性能的主要原因[21]。研究表明，飼用枯草芽孢桿菌調(diào)控腸道菌群平衡的機理基于“腸道占位”理論[10,12]。雖有研究表明特定的枯草芽孢桿菌菌株具有抑菌功效，但至今枯草芽孢桿菌分泌的抑菌物質(zhì)及其作用機理不明確，這也證明并非所有的枯草芽孢桿菌菌株都具有直接抑菌作用[10,28,29]。因此，企業(yè)選用不同枯草芽孢桿菌菌株生產(chǎn)的飼用枯草芽孢桿菌添加劑產(chǎn)品，其效果的差異性顯而易見。因此本次試驗的試驗組2和試驗組3總體生長性能略低于對照組。林維雄等研究飼糧中添加飼用枯草芽孢桿菌1×106cfu·g-1對20～100 kg生長育肥豬的生長性能效果，結(jié)果表明，20～45 kg階段，飼用枯草芽孢桿菌提高了豬的平均日增重，但未改善飼料增重比指標；45～75 kg階段與75～100 kg階段，飼用枯草芽孢桿菌對豬的平均日增重及飼料增重比指標均無顯著改善效應(yīng)[30]。姜軍坡等進一步增加了枯草芽孢桿菌在飼糧中的添加量（10倍），研究飼用枯草芽孢桿菌1×107cfu·g-1對50～80 kg生長育肥豬生長性能的影響，結(jié)果表明，高劑量的飼用枯草芽孢桿菌提高了平均日增重，但也沒有改善飼料增重比[31]。以上試驗證明，商業(yè)飼用微生態(tài)制劑的菌株特性影響了不同飼糧條件下的應(yīng)用效果。

不同飼用微生態(tài)制劑之間的協(xié)同效應(yīng)與頡頏效應(yīng)決定了飼用微生態(tài)制劑產(chǎn)品的應(yīng)用效果。與對照組相比，單一添加凝結(jié)芽孢桿菌的試驗組1改善了生長豬的生長性能，但同時添加凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌的試驗組3卻未能改善生長豬的生長性能。綜合分析發(fā)現(xiàn)，本試驗使用的凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌兩個菌株之間可能存在頡頏效應(yīng)，這一現(xiàn)象類似飼用抗生素之間的配伍。本試驗得到了姚曉紅等和趙鈺等的體外實驗支持，采用牛津杯法幾乎同一時間研究并報道了凝結(jié)芽孢桿菌與枯草芽孢桿菌的頡頏效應(yīng)，這與本次動物試驗的試驗組3效果總體低于試驗組1相吻合[22-23]。以上結(jié)果進一步表明，當前市場大量銷售的凝結(jié)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌、甚至包括其他復(fù)合飼用微生態(tài)制劑產(chǎn)品的組合方案，其確切效果及協(xié)同或頡頏機理有待試驗科學(xué)評估。如果將兩種或多種益生菌簡單組合使用，不科學(xué)考慮多種菌之間的頡頏效應(yīng)，在實際養(yǎng)殖生產(chǎn)中未必能夠獲得良好的生產(chǎn)效益與經(jīng)濟效益[32]。

4 結(jié) 論

本試驗結(jié)果表明，不添加飼用抗生素及任何化學(xué)合成抑菌藥物的基礎(chǔ)上，生長豬商品全價顆粒飼料中添加飼用凝結(jié)芽孢桿菌2×106cfu·g-1能夠獲得較好的生長性能，表現(xiàn)在平均日增重與飼料增重比的改善。然而，與使用桿菌肽鋅相比，單一添加同樣劑量的飼用枯草芽孢桿菌、或組合添加枯草芽孢桿菌與凝結(jié)芽孢桿菌，沒有獲得生長性能的進一步改善。因此，在充分了解單一飼用微生態(tài)制劑功效的基礎(chǔ)上，深入研究不同益生菌株之間的協(xié)同與頡頏效應(yīng)，不僅具有科學(xué)理論意義，更具商業(yè)應(yīng)用價值。