精加力復(fù)合肉堿聯(lián)合左卡尼汀口服液治療精子DNA損傷的臨床分析

陸鵬榮

上海市紅房子?jì)D產(chǎn)科醫(yī)院/復(fù)旦大學(xué)附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院，上海 200011

精子DNA在繁衍后代中發(fā)揮重要作用，因此一旦精子DNA受損會(huì)對(duì)受精過程、受精卵的分裂以及胚胎的發(fā)育帶來嚴(yán)重影響，最終導(dǎo)致不孕不育、流產(chǎn)、胎兒或者嬰幼兒發(fā)育異常等。臨床研究發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致精子DNA損傷可能跟精子染色質(zhì)組裝缺陷、氧化應(yīng)激、凋亡異常等有關(guān)[1]。因此導(dǎo)致精子DNA損傷可能是多因素的綜合作用，因此針對(duì)精子DNA受損患者，要積極給予治療措施[2]。2016年1月—2018年1月，該院將精加力復(fù)合肉堿和左卡尼汀口服液聯(lián)合應(yīng)用于31例精子DNA受損患者中，臨床療效顯著，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析該院門診收治的62例精子DNA受損患者臨床資料。根據(jù)患者掛號(hào)的先后順序，將前31例患者作為參照組；將后31例患者作為聯(lián)合組。參照組：共31例，其中最小年齡為24歲，最大年齡為43歲，中位年齡為（28.5±4.3）歲；聯(lián)合組：共 31 例，其中最小年齡為25歲，最大年齡為41歲，中位年齡為（28.3±4.1）歲。運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)參照組和聯(lián)合組患者基本資料統(tǒng)計(jì)分析，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），對(duì)比性充分。所有患者均符合以下納入和排除標(biāo)準(zhǔn)。①納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者夫妻雙方同居時(shí)間≥1年，性生活正常且不曾采取任何避孕措施；排除因?yàn)榕揭蛩匾鸬牟挥辉?；?duì)所有患者精液進(jìn)行常規(guī)檢查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)異常，精子DNA完整性異常（DFI＞15%），所有患者均自愿參與該次研究，并簽署知情同意書。該次研究經(jīng)過了倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。②排除標(biāo)準(zhǔn)：排除伴有精索靜脈曲張、隱睪、睪丸發(fā)育不良、合并有生殖道感染以及其他全身性疾病患者，排除在治療過程中不嚴(yán)格遵醫(yī)用藥和資料不全的患者[3-4]。

1.2 方法

參照組患者單獨(dú)服用左卡尼汀口服液 （批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字號(hào) H20113215；規(guī)格：6 支×10 mL），1 支/次，2支/d；聯(lián)合組則是在參照組基礎(chǔ)上聯(lián)合精加力復(fù)合肉堿（生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)：GB/T29602；規(guī)格：15 g×30 包），1包/次，2次/d。兩組患者均連續(xù)資料3個(gè)月。在治療過程中，所有患者均必須嚴(yán)格戒煙戒酒，注意休息，在晚上11點(diǎn)之前必須睡覺，適當(dāng)開展運(yùn)動(dòng)（如慢跑、打太極等有氧運(yùn)動(dòng)），要注意避免接觸有害、有毒、放射性物質(zhì)。

1.3 觀察指標(biāo)

治療3個(gè)月后，檢測(cè)兩組患者精子總存活率、精子濃度、向前運(yùn)動(dòng)精子所占比例、DFI，統(tǒng)計(jì)兩組患者臨床總有效率和不良反應(yīng)發(fā)生率。精子DNA損傷療效判定標(biāo)準(zhǔn)方法為：在治療前及治療后3個(gè)月檢查患者精液相關(guān)指標(biāo)和精子DNA碎片判定。將配偶懷孕且DFI＜30%判定為痊愈；將配合懷孕但是DFI＜30%判定為顯效；將DFI至少30%判定為有效；但是與治療前相比有所下降；將治療后DFI無降低甚至上升判定為無效[5]。臨床總有效率=（痊愈+顯效+有效）/總例數(shù)×100.00%。

1.3.1 精液獲取方法 患者禁欲2～7 d，通過手淫法獲得精液，將其放在室溫環(huán)境下30 min后再檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)。

1.3.2 精液檢查 ①精液常規(guī)參數(shù)檢測(cè)。在室溫環(huán)境下，使用微量吸管吸取待測(cè)的精液標(biāo)板共15 μL，然后將其置于Markler，然后利用該院計(jì)算機(jī)輔助精子分析系統(tǒng)（CASA）檢測(cè)精子常規(guī)參數(shù)。②精子DNA完整性檢測(cè)。采取精液優(yōu)化處理和精子核完整性染色試劑盒對(duì)精液染色，再應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)患者的DFI，試劑盒選擇由浙江星博生物科技有限公司生產(chǎn)的[6]。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

在該文中，應(yīng)用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，其中計(jì)量資料以（±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，進(jìn)行 χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者精液常規(guī)參數(shù)和DNA碎片率對(duì)比

在給予不同治療方法后，聯(lián)合組精子總存活率、精子濃度、向前運(yùn)動(dòng)精子所占比例高于參照組，而DFI低于參照組，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表 1。

表1 兩組患者精液常規(guī)參數(shù)和DNA碎片率對(duì)比（±s）

表1 兩組患者精液常規(guī)參數(shù)和DNA碎片率對(duì)比（±s）

組別精子總存活率（%）精子濃度（×1 0 6/m L）向前運(yùn)動(dòng)精子所占比例（%） D F I（%）聯(lián)合組（n=3 1）參照組（n=3 1）t值P值3 4.1 5±1 0.2 3 2 8.3 4±9.5 5 2.3 1 1＜0.0 5 2 0.3 3±9.2 5 2 5.6 7±1 1.5 1 2.0 1 2＜0.0 5 3 0.6 4±1 1.8 1 2 0.8 5±1 0.4 6 3.4 5 5＜0.0 5 1 8.8 5±6.3 2 2 3.5 5±8.1 3 2.5 4＜0.0 5

2.2 兩組患者臨床總有效率對(duì)比

3個(gè)月后，聯(lián)合組、參照組臨床總有效率分別為90.23%、77.42%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表 2。

表2 兩組患者臨床總有效率對(duì)比[n（%）]

2.3 兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況對(duì)比

在治療過程中，聯(lián)合組有3例患者出現(xiàn)了不良反應(yīng)，不良反應(yīng)發(fā)生率為9.68%，其中腹瀉0例、腹脹2例、惡心嘔吐1例；參照組有2例患者出現(xiàn)了不良反應(yīng)，其中腹瀉0例、腹脹1例、惡心嘔吐1例，不良反應(yīng)發(fā)生率為6.45%；由此可見兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.194；P＞0.05）。

3 討論

男性精子質(zhì)量下降是導(dǎo)致生殖力降低的主要因素，精子DNA主要位于精子的頭部，其結(jié)構(gòu)的完整性是受精、妊娠、胚胎發(fā)育的前提[7]。精子DNA完整性主要包含精子DNA碎片率（DFI）和核蛋白不成熟度兩項(xiàng)，臨床上主要檢測(cè)患者精子DNA的碎片率。大量臨床研究顯示DNA損傷不孕癥存在緊密關(guān)系，相比于正常人，不孕癥患者精子的受損率明顯較高[8]。將精子DNA碎片率超過27%時(shí)，宮腔內(nèi)人工受精，體外授精和卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射治療均難以懷孕或妊娠率很低。因此，針對(duì)精子DNA受損患者，積極采取治療措施降低精子DNA碎片率具有重要意義。

在上文中，研究了精加力復(fù)合肉堿聯(lián)合左卡尼汀口服液治療精子DNA損傷的臨床療效，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)精加力復(fù)合肉堿+左卡尼汀口服液治療的精子DNA受損患者的精子總存活率、精子濃度、向前運(yùn)動(dòng)精子所占比例高于單純左卡尼汀口服液治療患者，而精加力復(fù)合肉堿+左卡尼汀口服液治療的精子DNA受損患者DFI純左卡尼汀口服液治療患者，聯(lián)合用藥治療的臨床總有效率90.23%高于單純卡尼汀口服液治療的總有效率77.42%（P＜0.05）。其中左卡尼汀又可以被稱為肉堿，幾年來該藥物已經(jīng)被開始應(yīng)用于男性不育、勃起功能障礙等男科疾病的治療中，臨床療效顯著。左卡尼汀在人類附睪組織中含量較多，也是促進(jìn)精子在睪丸內(nèi)成熟以及獲得運(yùn)動(dòng)能力的重要物質(zhì)。左卡尼汀也是脂肪酸代謝的重要輔助因子，具有轉(zhuǎn)運(yùn)長(zhǎng)鏈脂輔酶A進(jìn)入線粒體內(nèi)部的重要輔助因素，在精子獲取能量過程中，直接參與到精子的能量代謝過程中，從而為精子的運(yùn)動(dòng)提供所需的能量支持。除此之外，左卡尼汀還是一類抗氧化劑，能夠抑制活性氧產(chǎn)生，減少體內(nèi)自由基含量，減少對(duì)精子的氧化應(yīng)激損傷，實(shí)現(xiàn)了精子DNA結(jié)合蛋白以及精子外膜的完整性[9]。而精加力復(fù)合肉堿主要是昭遠(yuǎn)制藥美國(guó)實(shí)驗(yàn)室研發(fā)團(tuán)隊(duì)經(jīng)長(zhǎng)達(dá)7年的研發(fā)而用于治療男性不育的專利品種。精加力復(fù)合肉堿的主要配方為左旋肉堿和N-乙酰神經(jīng)氨酸（唾液酸、燕窩酸、燕窩），含有大量的微量元素，在促進(jìn)男性生精和提高精子的質(zhì)量的基礎(chǔ)上，降低精子DNA碎片率[10]。而聯(lián)合應(yīng)用精加力復(fù)合肉堿和左卡尼汀口服液，發(fā)揮轉(zhuǎn)運(yùn)脂質(zhì)酸酸線粒體氧化工程重要因子的作用，并且還能夠參與到患者機(jī)體能量代謝中，從而發(fā)揮通過降低活性氧來增強(qiáng)患者精細(xì)胞的穩(wěn)定性，因此將其聯(lián)合用于精子DNA損傷治療中，療效顯著。