結(jié)直腸癌患者血清中雌激素及雌激素受體β的表達(dá)和臨床意義研究*

寧偉偉，楊雪峰，謝 銘（遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院胃腸外科，貴州遵義563000）

結(jié)直腸癌是常見消化道腫瘤之一，其發(fā)生及發(fā)展表現(xiàn)出多基因、多病因、多階段的復(fù)雜特征。近年來，隨著人們生活環(huán)境及飲食習(xí)慣、結(jié)構(gòu)的改變，其發(fā)病率及病死率均呈上升趨勢(shì)[1]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，結(jié)直腸癌病死率占所有惡性腫瘤的9%[2]，在全球排名第2位[3]。Globocan2012（IARC）最新數(shù)據(jù)顯示，結(jié)直腸癌全球范圍內(nèi)男性居常見腫瘤的第3位和女性居第2位[4]。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，結(jié)直腸癌在發(fā)病率方面表現(xiàn)出性別差異，男性發(fā)病率明顯高于女性，且絕經(jīng)后婦女患病風(fēng)險(xiǎn)高于絕經(jīng)前婦女[5]。近年來，隨著雌激素受體β（ER-β）在大腸組織中被發(fā)現(xiàn)后，越來越多的學(xué)者相信，雌激素[雌二醇（E2）]及 ER-β 參與了大腸癌的發(fā)生及發(fā)展，并對(duì)大腸組織具有一定的保護(hù)作用，但針對(duì)結(jié)直腸癌患者體內(nèi)血清E2、ER-β與結(jié)直腸癌之間關(guān)系的研究目前鮮有文獻(xiàn)報(bào)道。本研究通過分析結(jié)直腸癌患者與健康體檢者血清E2、ER-β表達(dá)水平的變化，進(jìn)一步探索結(jié)直腸癌與E2、ER-β的相關(guān)性，為臨床研究E2、ER-β與結(jié)直腸癌的發(fā)生及發(fā)展的關(guān)系提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 一般資料 選取2014年9月至2015年9月本院胃腸外科住院、經(jīng)腸鏡病理檢查確診為結(jié)直腸癌患者141例作為結(jié)直腸癌組（女性均選擇絕經(jīng)后人群），年齡 21～84歲，平均（62.01±13.15）歲；其中男性 88例，年齡 21～84 歲，平均（60.28±13.64）歲；絕經(jīng)后女性53例，年齡 50～82歲，平均（63.74±12.93）歲。選取同期本院體檢中心的141例健康體檢者作為健康體檢組，年齡22～77歲，平均（61.87±12.78）歲；其中男性 88例，年齡 22～77 歲，平均（61.20±12.64）歲；絕經(jīng)后女性53例，年齡50～77歲，平均（62.62±11.68）歲。2組研究對(duì)象年齡、性別等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) （1）絕經(jīng)正在應(yīng)用更年期激素替代療法或停藥不足3個(gè)月者；（2）婦科疾病，如卵巢腫瘤、子宮肌瘤、子宮惡性腫瘤、乳腺腫瘤等；（3）曾進(jìn)行過婦科手術(shù)，如子宮或卵巢切除等；（4）婦科疾病以外的腫瘤或其他疾病，如肺癌、胸腺癌、甲狀腺功能亢進(jìn)癥、肝硬化等；（5）接受過雌激素治療的結(jié)直腸癌患者。

1.2 方法

1.2.1 測(cè)試儀器 DXI800發(fā)光分析儀（美國貝克曼庫爾特有限公司）、純水系統(tǒng)（型號(hào)：PURELAB UITRA BIOSCI，英國ELGA公司）、RT6000全自動(dòng)酶標(biāo)分析儀（深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司）、高速離心機(jī)、電子分析天平（型號(hào)：FA2004N，上海精科天平儀器廠）等。

1.2.2 主要試劑 E2發(fā)光定量檢測(cè)試劑盒（DXI800配套試劑，美國貝克曼庫爾特有限公司）、ER-β酶聯(lián)免疫分析試劑盒（美國賽默飛世爾公司）等。

1.2.3 標(biāo)本采集 采集2組研究對(duì)象清晨空腹靜脈血5.0 mL，4℃、3 000 r/min離心10 min取血清，分裝于1.0 mL的微型離心（EP）管內(nèi)，每管0.5 mL，存放于-20℃冰箱中備用。

1.2.4 化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)E2水平 取血5.0 mL，4℃、3 000 r/min離心10 min取血清0.5 mL備用，取0.5 mL血清至進(jìn)樣管，采用DXI800發(fā)光分析儀檢測(cè)E2水平，嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。

1.2.5 酶聯(lián)免疫法檢測(cè)ER-β水平 取血5.0 mL，4℃、3 000 r/min離心10 min取血清0.5 mL備用，取0.5 mL血清按ER-β酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書加樣，采用RT6000全自動(dòng)酶標(biāo)分析儀檢測(cè)血清ER-β水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以表示，組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；相關(guān)分析采用Pearson相關(guān)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 2組男性研究對(duì)象血清E2、ER-β表達(dá)比較 結(jié)直腸癌組男性患者血清E2水平明顯高于健康體檢組男性，血清ER-β水平明顯低于健康體檢組男性，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表 1。

表1 2 組男性研究對(duì)象血清E2、ER-β表達(dá)比較（±s）

表1 2 組男性研究對(duì)象血清E2、ER-β表達(dá)比較（±s）

注：-表示無此項(xiàng)

組別n E2（pmol/L）ER-β（ng/L）健康體檢組（男）結(jié)直腸癌組（男）--88 88 tP 35.30±10.72 168.89±91.35 2.48 0.000 22.98±7.41 15.02±6.03 1.44 0.000

2.2 2組女性研究對(duì)象血清E2、ER-β表達(dá)比較 結(jié)直腸癌組女性患者血清E2水平明顯高于健康體檢組女性，血清ER-β水平明顯低于健康體檢組女性，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表 2。

表2 2組女性研究對(duì)象血清E2、ER-β表達(dá)比較（±s）

表2 2組女性研究對(duì)象血清E2、ER-β表達(dá)比較（±s）

注：-表示無此項(xiàng)

組別n E2（pmol/L）ER-β（ng/L）健康體檢組（女）結(jié)直腸癌組（女）--53 53 tP 50.80±16.40 147.21±57.52 2.79 0.000 21.36±8.99 14.98±6.13 1.02 0.000

2.3 2組男女研究對(duì)象血清E2、ER-β表達(dá)比較 結(jié)直腸癌組男女患者血清E2水平明顯高于健康體檢組男女研究對(duì)象，血清ER-β水平明顯低于健康體檢組男女研究對(duì)象，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表 3、圖 1。

表3 2組男女研究對(duì)象血清E2、ER-β表達(dá)比較（±s）

表3 2組男女研究對(duì)象血清E2、ER-β表達(dá)比較（±s）

注：-表示無此項(xiàng)

組別健康體檢組（男女）結(jié)直腸癌組（男女）n 141 141 tP--E2（pmol/L）43.05±13.56 158.05±74.44 2.67 0.000 ER-β（ng/L）22.17±8.21 15.01±6.08 1.21 0.000

圖1 2組男女研究對(duì)象血清E2、ER-β表達(dá)比較

2.4 結(jié)直腸癌患者血清E2、ER-β相關(guān)性分析 男性結(jié)直腸癌患病率為62.41%，女性結(jié)直腸癌患病率為37.59%，見圖2。男性結(jié)直腸癌患病率高于女性；結(jié)直腸癌患者血清E2水平與ER-β水平呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.69，P＜0.05）。見圖 3。

圖2 結(jié)直腸癌患病率柱狀圖

圖3 結(jié)直腸癌患者血清E2、ER-β相關(guān)性分析散點(diǎn)圖

3 討 論

引起結(jié)直腸腫瘤的原因很多，結(jié)直腸癌的發(fā)生及發(fā)展可能與E2和ER-β關(guān)系密切。結(jié)合文獻(xiàn)[6-8]分析認(rèn)為，雌激素在機(jī)體內(nèi)發(fā)揮的生物學(xué)效應(yīng)可能會(huì)促進(jìn)細(xì)胞凋亡，抑制異型增生，維護(hù)細(xì)胞正常的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能，從而起保護(hù)作用，預(yù)防結(jié)直腸癌的發(fā)生。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，結(jié)直腸癌發(fā)病率和病死率呈男性高于女性的趨勢(shì)，且絕經(jīng)后婦女患病的風(fēng)險(xiǎn)高于絕經(jīng)前婦女[9]；推測(cè)可能與雌激素對(duì)結(jié)直腸黏膜具有保護(hù)作用有關(guān)。

LIMSUI等[10]關(guān)于55～69歲絕經(jīng)后婦女激素治療的回顧性研究表明，對(duì)絕經(jīng)后女性，激素治療與結(jié)直腸癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)呈負(fù)相關(guān)，有關(guān)雌激素與結(jié)腸癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的meta分析研究成果最終也得出雌激素與結(jié)腸癌發(fā)病率降低有關(guān)的結(jié)論[11]。上述研究均提示雌激素可能在結(jié)直腸癌的發(fā)生中具有阻抑作用。但另有研究卻指出，雌激素對(duì)結(jié)腸癌的保護(hù)作用只限于結(jié)腸癌發(fā)病前，一旦腫瘤發(fā)生過程啟動(dòng)，雌激素則無明顯保護(hù)作用，甚至有可能具有促進(jìn)增殖的作用[12]。

本研究探討了結(jié)直腸癌患者血清E2水平變化，結(jié)果顯示，結(jié)直腸癌組患者血清E2水平較健康體檢組明顯呈升高趨勢(shì)，與國內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌患者血清E2水平較健康者升高的結(jié)果一致[13]；表明E2與結(jié)直腸癌發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)，E2有可能在結(jié)腸黏膜發(fā)生癌變的早期過程中具有一定的阻抑作用，隨著E2水平的降低，結(jié)腸黏膜發(fā)生癌變的風(fēng)險(xiǎn)增加，最終可能導(dǎo)致結(jié)直腸癌的發(fā)生，但后期在腫瘤發(fā)展的過程中，由于體內(nèi)下丘腦-垂體-性腺軸的調(diào)節(jié)，體內(nèi)E2水平反而升高，并進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤的發(fā)展，但具體原因尚不清楚，還有待進(jìn)一步研究。另外，本研究還發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌患者血清ER-β水平明顯低于健康體檢者。在過去的研究中，國內(nèi)學(xué)者發(fā)現(xiàn)，ER-β水平與大腸癌發(fā)生及發(fā)展關(guān)系密切，并可作為其生物學(xué)及判斷預(yù)后指標(biāo)[13-14]。另有研究表明，ER-β可能為大腸癌的“抑癌基因”[15]。結(jié)合本研究直腸癌患者體內(nèi)血清ER-β表達(dá)水平明顯低于健康體檢者這一結(jié)果，進(jìn)一步說明ER-β與大腸癌的發(fā)生及關(guān)系密切，且可能是判斷大腸癌患者預(yù)后指標(biāo)之一。根據(jù)本研究結(jié)果，結(jié)直腸癌組患者血清ER-β水平較健康體檢組呈降低趨勢(shì)，推測(cè)ER-β表達(dá)水平下調(diào)的改變有可能參與了結(jié)直腸癌的發(fā)生及發(fā)展，但具體機(jī)制尚不清楚。

本研究分析結(jié)直腸癌組男性和絕經(jīng)后女性患者血清E2、ER-β水平發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌組男性和絕經(jīng)后女性患者血清E2水平均較健康體檢組增高，而ER-β水平均較健康體檢組降低，說明男性結(jié)直腸癌患者與絕經(jīng)后女性結(jié)直腸癌患者體內(nèi)E2、ER-β可能存在相似的生物學(xué)調(diào)節(jié)機(jī)制，并影響其腫瘤的發(fā)展。另外，本研究進(jìn)行的相關(guān)分析還發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌患者血清E2水平與ER-β水平呈顯著負(fù)相關(guān)，E2、ER-β可能在結(jié)直腸癌的發(fā)生及發(fā)展過程中協(xié)同發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)。

綜上所述，結(jié)直腸癌患者體內(nèi)E2、ER-β水平的改變與結(jié)直腸癌的發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)，但E2、ER-β調(diào)節(jié)并影響結(jié)直腸癌發(fā)生及發(fā)展的關(guān)鍵點(diǎn)尚不清楚，機(jī)制也不明確，類似的研究鮮見文獻(xiàn)報(bào)道，所以，對(duì)結(jié)直腸癌的發(fā)生及發(fā)展與E2、ER-β具體的調(diào)節(jié)關(guān)系尚需增加體內(nèi)外試驗(yàn)進(jìn)一步進(jìn)行研究。本研究僅探索了結(jié)直腸癌與E2、ER-β的關(guān)系，為臨床進(jìn)一步研究結(jié)直腸癌的發(fā)生及發(fā)展提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。