鹽堿脅迫下噴施BR對(duì)甜菜光系統(tǒng)Ⅱ和氮代謝關(guān)鍵酶的影響

李彩鳳，劉 丹，鄒春雷，劉 磊，武沛然，楊芳芳，王 彬，王玉波

（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，哈爾濱 150030）

土壤過(guò)度利用已成為農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境問(wèn)題，尤其在我國(guó)干旱和半干旱地區(qū)，土壤鹽堿化頻發(fā)[1]。土壤鹽堿化是影響作物生長(zhǎng)、發(fā)育、生產(chǎn)力和地理分布最重要環(huán)境因素之一[2-3]。土壤鹽堿化使作物生長(zhǎng)遭受脅迫，作物產(chǎn)量降低影響因子中，土壤鹽堿化占20%[4]。

甜菜（Beta vulgaris L.）是我國(guó)北方經(jīng)濟(jì)作物，是極少的耐鹽堿作物之一，對(duì)鹽堿土具有強(qiáng)適應(yīng)性[5]。耿貴等研究表明，低濃度鹽堿脅迫下，甜菜對(duì)NO3-吸收增強(qiáng)，葉面積增大；但高濃度鹽（土壤電導(dǎo)率大于7 mΩ·cm-1）會(huì)產(chǎn)生鹽害，影響甜菜體內(nèi)離子平衡，抑制其正常生長(zhǎng)[6]。

油菜素內(nèi)酯是植物體內(nèi)的類(lèi)固醇類(lèi)激素，與其他植物激素一樣，對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育起重要調(diào)節(jié)作用[7]?？芙瓭妊芯勘砻鳎珺R在提高作物抵抗逆境、增強(qiáng)光合作用、促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育和增加產(chǎn)量等方面效果顯著[8]。目前BR人工合成類(lèi)似物等已廣泛應(yīng)用于各種蔬菜、農(nóng)作物生產(chǎn)[9-10]。BR在緩解甜菜鹽堿脅迫研究未見(jiàn)報(bào)道。因此，本試驗(yàn)通過(guò)在不同時(shí)期噴施BR，研究其對(duì)甜菜葉綠素?zé)晒馓匦院偷x關(guān)鍵酶影響，探索噴施BR最佳時(shí)期，為今后研究和應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

甜菜品種為KWS0143，產(chǎn)于德國(guó)艾恩貝克，由卡韋埃斯種子歐洲股份有限公司引進(jìn)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2017年在黑龍江省哈爾濱市東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院作盆栽試驗(yàn)。供試基礎(chǔ)土壤為自然黑鈣土。土壤基礎(chǔ)肥力：有機(jī)質(zhì)35.66 g·kg-1，堿解氮176.27 mg·kg-1，速效磷83.3 mg·kg-1，速效鉀153.2 mg·kg-1。

盆栽桶上徑30.0cm，下徑24.0cm，高26.5cm，每桶裝10 kg風(fēng)干土壤。土壤中加入含Na+質(zhì)量濃度為3 g ·kg-1中性鹽和堿性鹽（NaCl：Na2SO4：NaHCO3：Na2CO3=4：2：2：1）模擬大田鹽堿土?；适┯昧堪凑誑180kg·hm-2、P2O590kg·hm-2、K2O 90 kg ·hm-2，按面積施肥。將試驗(yàn)土、鹽堿和化肥混勻裝入桶中。

4月31日播種，每桶播50粒種子，試驗(yàn)設(shè)對(duì)照（CK）、葉叢快速生長(zhǎng)期（Q）、塊根膨大期（Z）、糖分積累期（H）共四個(gè)處理。分別在甜菜葉叢快速生長(zhǎng)期（6～8片葉）、塊根膨大期、糖分積累期，選擇晴朗天氣上午9:00～9:30，噴施0.15 mg·L-1BR，以吐溫-20作展著劑在葉片正反兩面均勻噴施。噴施BR 10 d后取樣，兩次取樣時(shí)間間隔為18 d，共5次。取樣時(shí)間為上午9:00～10:00，各處理隨機(jī)取3株，選出葉齡一致功能葉片，測(cè)量葉綠素?zé)晒鈪?shù)。然后剪下葉片，迅速液氮處理后于-80℃冰箱保存，備用。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 葉綠素含量測(cè)定

葉綠素含量測(cè)定采用乙醇提取法[11]，取新鮮葉片測(cè)定，每個(gè)處理重復(fù)3次。

1.3.2 葉綠素?zé)晒鈪?shù)測(cè)定

利用PAM-2500便攜式脈沖調(diào)制葉綠素?zé)晒鈨x，上午9:00～10:00測(cè)定各處理葉片（葉片選擇生長(zhǎng)時(shí)期一致完全的功能葉片）PSⅡ最大光合速率Fv/Fm、PSⅡ?qū)嶋H光能轉(zhuǎn)換效率（YⅡ）、光化學(xué)淬滅（qL）、非光化學(xué)淬滅（NPQ）和PSⅡ相對(duì)電子傳遞速率[rETR（Ⅱ）]，專(zhuān)用葉片夾夾持葉片（避開(kāi)葉脈部分），暗處理20 min后測(cè)量，每個(gè)處理重復(fù)3次，各指標(biāo)參照Klughammer等公式計(jì)算處理[12]。

1.3.3 氮代謝相關(guān)酶測(cè)定

1.3.3.1 硝酸還原酶（NR）測(cè)定

參考于海濱等方法[13]，測(cè)定內(nèi)源NR活力，以μg NO2-（生成）·g-1FW·h-1表示，每個(gè)處理重復(fù)3次。

1.3.3.2 谷氨酰胺合成酶（GS）測(cè)定

酶提取液按照Z(yǔ)hang等方法[14]，活性測(cè)定按照Lea等方法[15]，利用分光光度計(jì)在540 nm下測(cè)定吸光值，用γ-谷胺?；u虧酸作標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線確定酶活性。

1.3.3.3 谷氨酸合成酶（GOGAT）測(cè)定

酶提取液與測(cè)定GS酶液相同。谷氨酸合成酶活性測(cè)定參照Singh等方法[16]，由L-谷氨酰胺啟動(dòng)反應(yīng)，利用分光光度計(jì)在340 nm下測(cè)定吸光值變化，以每min下降0.001個(gè)吸光值為1個(gè)酶活單位。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

Excel 2010數(shù)據(jù)分析軟件處理數(shù)據(jù)和制圖，表中數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，采用SPSS22.0作差異顯著性分析及相關(guān)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同時(shí)期噴施BR對(duì)甜菜葉綠素含量影響

通過(guò)分析表1葉綠素各項(xiàng)指標(biāo)變化情況，整體來(lái)看，對(duì)照處理葉綠素含量隨時(shí)間呈先降后升再降趨勢(shì)。葉叢快速生長(zhǎng)期噴施BR，提高甜菜葉片葉綠素含量。7月4日和7月22日取樣中，Q處理葉片葉綠素a含量比CK分別高38.44%和72.34%，葉綠素b含量分別高38.57%和53.38%；甜菜塊根膨大期和糖分積累期，Q處理葉綠素a和葉綠素b含量比CK略低，差異均不顯著。塊根膨大期噴施BR降低葉片葉綠素含量。8月10日和8月28日取樣中，Z處理葉綠素a含量分別低于CK 46.05%和44.34%，葉綠素b含量分別低于CK 77.06%和85.23%。9月15日取樣中，Z處理葉綠素a和葉綠素b含量分別高出CK 43.19%和25.96%，塊根膨大期噴施BR后葉綠素a和b含量均與CK處理差異顯著。甜菜糖分積累期噴施BR顯著提高葉片葉綠素含量，H處理葉綠素a和b含量分別高出CK處理33.99%和16.74%。噴施BR在提高葉綠素含量同時(shí)，也提高葉綠素a相對(duì)含量，葉叢快速生長(zhǎng)期噴施BR后，第一次取樣（7月4日）結(jié)果顯示，各處理葉綠素a/b均為3.94，無(wú)明顯差異；在第二次取樣（7月22日）時(shí)Q處理葉綠素a/b為4.56，顯著高于CK處理的3.36，且在甜菜整個(gè)生長(zhǎng)過(guò)程中Q處理始終高于CK。塊根膨大期和糖分積累期噴施BR后，Z與H處理葉綠素a相對(duì)含量也呈升高趨勢(shì)。

表1 不同時(shí)期噴施BR對(duì)甜菜葉綠素含量影響Table1 Effect of spraying BR on chlorophyll content of sugar beet at different stages (mg·g-1 FW)

2.2 不同時(shí)期噴施BR對(duì)甜菜葉綠素?zé)晒庀禂?shù)影響

2.2.1 噴施BR對(duì)葉片光能轉(zhuǎn)換效率影響

由圖1可知，最大光能轉(zhuǎn)換效率在甜菜整個(gè)生長(zhǎng)期變化呈先升后降再升趨勢(shì)。葉叢快速生長(zhǎng)期噴施BR后，7月4日與7月22日測(cè)定中Q處理分別高出CK 2.05%和0.04%；塊根膨大期噴施BR后Z處理在第一次取樣（8月10日）時(shí)測(cè)量系數(shù)與CK無(wú)明顯差異，而在8月28日和9月15日測(cè)定中大幅度降低，與各處理差異顯著，分別低于CK 2.85%和2.28%，低于Q處理1.82%和2.03%，；糖分積累期噴施BR后H處理葉片的最大光能轉(zhuǎn)換效率均高于其他處理，且差異顯著。

圖1 不同時(shí)期噴施BR對(duì)葉綠素最大光能轉(zhuǎn)換效率影響Fig.1 Effect of spraying BR on chlorophyll Fv/Fm at different stages

圖2 不同時(shí)期噴施BR對(duì)葉綠素實(shí)際光能轉(zhuǎn)換效率影響Fig.2 Effect of spraying BR on chlorophyll YⅡat different stages

圖2 顯示，葉片實(shí)際光能轉(zhuǎn)換率隨甜菜生長(zhǎng)期呈先升后降變化，CK在8月10日出現(xiàn)峰值，Q處理在7月22日出現(xiàn)峰值。7月4日、7月22日和8月28日Q處理實(shí)際光能轉(zhuǎn)換系數(shù)分別高出CK 8.65%、1.86%和2.40%，但9月15日顯著低于CK，僅為其66.99%；塊根膨大期噴施BR后，8月10日Z(yǔ)處理低于CK，但8月28日高于CK，與最大光能轉(zhuǎn)換效率趨勢(shì)不同；糖分積累期噴施BR的H處理顯著低于CK，但略高于Q處理。

圖1和圖2說(shuō)明不同時(shí)期噴施外源BR對(duì)葉片光能轉(zhuǎn)換效率均有影響，噴施時(shí)期不同，作用效果不同，且對(duì)最大光能轉(zhuǎn)換效率和實(shí)際光能轉(zhuǎn)化率影響不同。

2.2.2 噴施BR對(duì)葉片光化學(xué)淬滅系數(shù)影響

圖3和圖4分別表示甜菜葉片葉綠素光化學(xué)淬滅和非光化學(xué)淬滅系數(shù)變化情況。由圖3可知，CK處理光化學(xué)淬滅系數(shù)變化趨勢(shì)隨生長(zhǎng)時(shí)間呈先升后降趨勢(shì)，Q處理光化學(xué)淬滅系數(shù)隨生長(zhǎng)時(shí)間逐漸下降。7月4日和7月22日Q處理光化學(xué)淬滅系數(shù)最高，分別高于CK 30.40%和32.32%，與其他處理差異顯著，葉叢快速生長(zhǎng)期噴施BR提高葉叢快速生長(zhǎng)期葉綠素光化學(xué)淬滅系數(shù)。塊根膨大期噴施BR后，8月10日測(cè)定時(shí)Z處理光化學(xué)淬滅系數(shù)顯著低于CK，8月28日和9月15日取樣顯著高于CK和Q處理，糖分積累期噴施BR后H處理光化學(xué)淬滅系數(shù)降低，與CK處理差異不顯著。

圖4顯示，甜菜整個(gè)生長(zhǎng)期葉片葉綠素非光化學(xué)淬滅系數(shù)變化呈先降后升趨勢(shì)，7月22日最低（均低于0.25），9月15日最高（均高于0.9）。Q處理顯示，葉叢快速生長(zhǎng)期噴施BR后，除8月28日測(cè)定系數(shù)略低于CK（差異不顯著），其他生長(zhǎng)時(shí)期均高于對(duì)照，且差異顯著，5次取樣中Q處理分別為CK處理142.64%、148.74%、369.57%、89.57%和206.06%。Z處理顯示，塊根膨大期噴施BR后并未立即提高甜菜葉片非光化學(xué)淬滅系數(shù)，與CK處理差異不顯著，8月28日和9月15日測(cè)定中，Z處理顯著高出CK 24.16%和15.58%；糖分積累期數(shù)據(jù)顯示，在甜菜生長(zhǎng)三個(gè)時(shí)期噴施BR均顯著提高葉片非光化學(xué)淬滅系數(shù)。

2.2.3 噴施BR對(duì)葉片電子傳遞速率影響

如圖5所示，葉叢快速生長(zhǎng)期噴施BR提高葉片葉綠素相對(duì)電子傳遞速率。7月4日和7月22日測(cè)定數(shù)據(jù)顯示，Q處理高出CK 8.7%、26.4%，8月10日Q處理是CK的84.72%，顯著低于CK；塊根膨大期噴施BR后，塊根膨大期未明顯提高葉片相對(duì)電子傳遞速率；噴施BR三個(gè)處理在糖分積累期葉片相對(duì)電子傳遞速率均低于對(duì)照，9月15日測(cè)定中，Q、Z、H三個(gè)處理相對(duì)電子傳遞速率分別為CK 90.2%、80.4%和71.3%。噴施越晚，對(duì)糖分積累期葉片相對(duì)電子傳遞速率抑制越顯著。

圖3 不同時(shí)期噴施BR對(duì)葉綠素光化學(xué)淬滅影響Fig.3 Effect of spraying BR on chlorophyll qL at different stages

圖4 不同時(shí)期噴施BR對(duì)葉綠素非光化學(xué)淬滅影響Fig.4 Effect of spraying BR on chlorophyll NPQ at different stages

圖5 不同時(shí)期噴施BR對(duì)葉綠素相對(duì)電子傳遞速率影響Fig.5 Effect of spraying BR on thechlorophyll r ETR(Ⅱ)at different stages

2.2.4 噴施BR對(duì)葉片光保護(hù)能力影響

葉綠素在強(qiáng)光照射下光保護(hù)能力參數(shù)指標(biāo)變化見(jiàn)圖6，其變化趨勢(shì)與非光化學(xué)淬滅參數(shù)基本一致，在甜菜生長(zhǎng)過(guò)程中呈先降后升趨勢(shì)。葉叢快速生長(zhǎng)期噴施BR除8月28日測(cè)定數(shù)據(jù)外，其他時(shí)間均顯著高于對(duì)照，Q處理在甜菜生長(zhǎng)期葉片光保護(hù)能力高于CK；塊根膨大期噴施BR后，Z處理在塊根膨大期葉片光保護(hù)能力并未顯著提高；9月15日測(cè)定結(jié)果顯示，三個(gè)時(shí)期噴施BR均顯著提高甜菜糖分積累期葉片光保護(hù)能力，Q、Z和H處理參數(shù)分別是CK 171.17%、181.98%和180.18%。

圖6 不同時(shí)期噴施BR對(duì)葉綠素光保護(hù)能力影響Fig.6 Effect of spraying BR on chlorophyll photoprotective ability at different stages

2.3 不同時(shí)期噴施BR對(duì)甜菜氮代謝關(guān)鍵酶活性影響

2.3.1 噴施BR對(duì)甜菜葉片NR活性影響

由圖7可知，甜菜葉片NR活性在7月4日最高，隨生長(zhǎng)期遞進(jìn)降低并趨于穩(wěn)定。葉叢快速生長(zhǎng)期噴施BR后，Q處理NR活性在7月4日至7月22日顯著高于CK，分別高出15.4%、57.2%，且在生長(zhǎng)期一直高于CK；塊根膨大期噴施BR后，Z處理顯示，NR活性顯著降低并一直低于CK；糖分積累期噴施BR后葉片NR活性顯著低于CK處理。結(jié)果表明葉片噴施BR影響甜菜NR活性，葉叢快速生長(zhǎng)期噴施提高NR活性，其他生長(zhǎng)時(shí)期噴施抑制葉片NR活性。

2.3.2 噴施BR對(duì)甜菜葉片GOGAT活性影響

如圖8所示，噴施BR后對(duì)甜菜葉片NADHGOGAT活性影響顯著。CK處理葉片GOGAT變化隨生長(zhǎng)期呈先降后升趨勢(shì)；葉叢快速生長(zhǎng)期噴施BR后，葉片GOGAT活性先降后升，生長(zhǎng)期活性逐漸遞增，5次取樣分別為CK 21.99%、78.38%、205.18%、134.94%和138.89%；Z處理顯示，塊根膨大期噴施BR后NADH-GOGAT活性降低，8月10日和8月28日活性均顯著低于CK處理，9月15日活性升高并顯著高于CK；糖分積累期噴施BR后，H處理的葉片GOGAT活性下降。試驗(yàn)結(jié)果顯示，在甜菜生長(zhǎng)各時(shí)期外源噴施BR后，葉片NADH-GOGAT活性均呈先降后升趨勢(shì)。

圖7 不同時(shí)期噴施BR對(duì)葉片NR活性影響Fig.7 Effectsof spraying BR on leaves NR activity at different stages

2.3.3 噴施BR對(duì)甜菜葉片GS活性影響

圖9為葉片GS活性隨生長(zhǎng)時(shí)期變化趨勢(shì)。由CK處理可知，葉片GS活性隨甜菜生長(zhǎng)時(shí)期推進(jìn)呈緩慢上升趨勢(shì)，葉叢快速生長(zhǎng)期和塊根膨大期變化不顯著，在糖分積累期達(dá)最高。葉叢快速生長(zhǎng)期噴施BR后，顯著提高GS活性，在7月4日、7月22日和8月28日分別高出CK 15.1%、33.0%、16.5%；糖分積累期Q處理與CK變化趨勢(shì)不同，GS活性不升反降，并顯著低于其他處理；塊根膨大期噴施BR后GS活性略降低，與CK相比變化不明顯；糖分積累期噴施BR后GS活性升高。葉叢快速生長(zhǎng)期噴施BR提高該時(shí)期和塊根膨大期葉片GS活性，降低糖分積累期活性；其他兩個(gè)時(shí)期噴施BR對(duì)甜菜葉片GS活性無(wú)顯著影響。

圖8 不同時(shí)期噴施BR對(duì)葉片GOGAT活性影響Fig.8 Effect of spraying BR on leaves GOGAT activity at different stages

圖9 不同時(shí)期噴施BR對(duì)葉片GS活性影響Fig.9 Effect of spraying BR on leaves GSactivity at different stages

2.4 葉綠素a與熒光參數(shù)和氮代謝關(guān)鍵酶活性相關(guān)性分析

葉綠素是與甜菜葉片熒光特性相關(guān)重要指標(biāo)，分析葉綠素a與熒光參數(shù)相關(guān)性，結(jié)果如表2所示，通過(guò)比較兩處理與葉綠素a相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)除Fv/Fm外，其他熒光參數(shù)YⅡ、qL、NPQ、rETR（II）和Y（NPQ）/Y（NO）與葉綠素a相關(guān)系數(shù)均在噴施BR后升高，可能因葉面噴施BR后緩解脅迫，葉綠素光合能力恢復(fù)。噴施BR前qL與葉綠素a含量相關(guān)程度僅為0.875，噴施BR后達(dá)極相關(guān)（0.996），表明噴施BR可緩解鹽堿對(duì)葉綠素a傷害，提高PSⅡ光化學(xué)反應(yīng)。整體來(lái)看，通過(guò)噴施BR，可提高甜菜葉片葉綠素a含量，同時(shí)提高葉片PSⅡ?qū)饽芪?、轉(zhuǎn)化效率和光保護(hù)能力。

通過(guò)分析兩處理氮代謝關(guān)鍵酶與葉綠素a含量相關(guān)系數(shù)發(fā)現(xiàn)，噴施BR后，硝酸還原酶（NR）活性與葉綠素a相關(guān)程度提高，相關(guān)系數(shù)由0.388提高到0.694，表明噴施BR可提高鹽堿脅迫下葉片NR活性；鹽堿脅迫下，GS活性與葉綠素a含量呈負(fù)相關(guān)（-0.727），噴施BR后，GS活性與葉綠素a含量呈正相關(guān)（0.429）；噴施BR前，GOGAT活性與葉綠素a含量相關(guān)系數(shù)僅為-0.146，外源噴施BR后葉片GOGAT活性與葉綠素a含量呈顯著負(fù)相關(guān)（-0.900），可能因葉片GOGAT活性直接受外源BR限制。

表2 葉綠素與熒光參數(shù)相關(guān)性分析Table 2 Correlation analysis of chlorophyll and fluorescenceparameters

3 討論與結(jié)論

鹽堿脅迫降低葉片葉綠素含量，影響植物光合作用。本研究發(fā)現(xiàn)，甜菜葉叢快速生長(zhǎng)期葉面噴施BR顯著提高鹽堿脅迫下葉片葉綠素含量，與劉強(qiáng)等研究結(jié)果一致[17]；在塊根膨大期噴施BR后葉綠素含量下降，與劉海英等研究結(jié)果相反[18]，可能是植物差異所致。本試驗(yàn)中，甜菜葉片噴施BR后，葉片葉綠素含量和光合能力均顯著提高。葉綠素a和b是參與葉片光合作用重要物質(zhì)，葉綠素a是光合作用中心色素分子，一般情況下，葉綠素a/b值越高，說(shuō)明葉片光照下光合能力越強(qiáng)。本試驗(yàn)噴施BR處理葉綠素a/b值均高于鹽堿處理（CK），與馬野等研究結(jié)果一致[19]。三個(gè)時(shí)期噴施BR后均顯著提高糖分積累期葉綠素b含量，可能是甜菜生長(zhǎng)后期光照變?nèi)醐h(huán)境下提高葉片光能吸收利用能力所致，其他研究目前尚未見(jiàn)同類(lèi)報(bào)道。

研究表明，高濃度鹽脅迫下，植物光合效率降低主要原因之一是Fv/Fm、光化學(xué)淬滅、電子傳遞速率下降[20-21]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，鹽堿脅迫下噴施BR提高甜菜葉片F(xiàn)v/Fm、YⅡ、qL和相對(duì)電子傳遞速率，提高葉片光合能力。光照強(qiáng)度是影響植物光合作用重要因素，植物在強(qiáng)光下光合作用受到抑制，但可通過(guò)非光輻射熱耗散途徑散發(fā)剩余光能降低強(qiáng)光脅迫[22]，相關(guān)研究表明，其他環(huán)境脅迫會(huì)降低葉片對(duì)強(qiáng)光適應(yīng)能力[23]。研究顯示，鹽堿脅迫限制甜菜葉片葉綠素a活性，環(huán)境光照較強(qiáng)情況下，葉片吸收光能能力下降，光耗散能力降低，噴施BR后，PSⅡ?qū)嶋H光能轉(zhuǎn)換率和光保護(hù)能力均顯著增強(qiáng)，同時(shí)各熒光指標(biāo)（除Fv/Fm）與葉綠素a含量相關(guān)性均有所提高，說(shuō)明外源噴施BR可緩解鹽堿對(duì)葉片葉綠素a破壞，提高甜菜光合作用，與Shu等研究結(jié)果一致[24]。

氮代謝途徑是葉片內(nèi)氮素轉(zhuǎn)化關(guān)鍵途徑?？芙瓭芯拷Y(jié)果顯示，鹽脅迫下噴施BR提高苜蓿幼苗體內(nèi)NR、GS和GOGAT活性[25]，扈雪歡等研究認(rèn)為，外源施入水楊酸可提高鹽脅迫下顛茄葉片氮代謝關(guān)鍵酶活性[26]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，葉叢快速生長(zhǎng)期噴施BR可提高鹽堿脅迫下甜菜生長(zhǎng)期葉片NR和GS活性，但每次噴施BR后NADH-GOGAT活性均呈先降后升趨勢(shì)，與寇江濤和扈雪歡等研究結(jié)果不同，可能是本試驗(yàn)濃度BR抑制NADHGOGAT活性，隨時(shí)間推移BR濃度降低，NADHGOGAT活性逐漸升高并高于對(duì)照，也說(shuō)明BR直接影響葉片NADH-GOGAT活性，這種影響不受作物生長(zhǎng)期限制，但未見(jiàn)其他研究報(bào)道。

本研究通過(guò)分析鹽堿脅迫下甜菜各時(shí)期噴施BR處理葉綠素、熒光參數(shù)和氮代謝關(guān)鍵酶變化數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)各時(shí)期噴施外源BR對(duì)甜菜生理指標(biāo)均有影響，同一時(shí)期噴施BR不同生理指標(biāo)變化影響不同，不同時(shí)期噴施BR對(duì)同一生理指標(biāo)影響也存在差異。整體來(lái)看，在葉叢快速生長(zhǎng)期（六葉期）噴施BR與其他兩個(gè)時(shí)期相比對(duì)甜菜生長(zhǎng)更有效。