載脂蛋白E基因多態(tài)性與Alzheimer病和血管性癡呆的關(guān)系研究

邢麗菲 王敏 檀素娟 王艷紅

【摘要】目的 本次實驗課題主要探討載脂蛋白E基因多態(tài)性與血管性癡呆和Alzheimer病的關(guān)系。

方法 選取2013年2月～2018年2月我院住院以及門診收治的血管性癡呆患者80例（VD組）與Alzheimer病患者75例（AD組）作為研究對象，另選取健康人群120例作為正常組，均采用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性方法進行檢測，對比三組等位基因頻率和載脂蛋白E基因型。結(jié)果 AD組載脂蛋白Eε4等位基因頻率、ε3/ε4基因型頻率分別為17.8%、24%，VD組為 20.6%、26.25%，正常組為5.8%、10.83%，AD組、VD組載脂蛋白Eε3/ε4基因型、ε4等位基因頻率明顯高于正常組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論 載脂蛋白Eε4等位基因是Alzheimer病和血管性癡呆疾病的危險因素。

【關(guān)鍵詞】載脂蛋白E基因多態(tài)性；Alzheimer?。谎苄园V呆

【中圖分類號】R749.13 【文獻標識碼】B 【文章編號】ISSN.2095-6681.2018.22..02

在老年期癡呆疾病中，發(fā)病率最高的是血管性癡呆疾病和Alzheimer病，載脂蛋白E基因是散發(fā)性、遲發(fā)性Alzheimer病最主要的遺傳易感因素，也是作為影響人體老化的重要因素，還是腦血管疾病、動脈粥樣硬化的易患病因素，還與人體認知功能存在緊密的相關(guān)性，本文主要對Alzheimer病、血管性癡呆疾病的載脂蛋白E基因多態(tài)性進行分析和

檢測，并與健康人群進行對比，從而探討兩者之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年2月～2018年2月我院住院以及門診收治的血管性癡呆患者80例（VD組）與Alzheimer病患者75例（AD組）作為研究對象，均符合語言機能障礙、美國神經(jīng)病學、AD以及VD疾病的臨床診斷標準，另選取健康人群120例作為正常組。其中，VD組女32例，男48例，年齡58～84歲，平均年齡（72.4±1.41）歲，病程1.4～6.5年，平均病程（4.29±1.25）年，排除缺血缺氧性腦病史、遺傳性血管病者，所有患者均合并動脈粥樣硬化性腦血管疾病；AD組男42例，女33例，年齡64～80歲，平均年齡（73.5±4.96）歲，病程2.2～8.3年，平均病程（4.96±1.42）年；正常組女69例，男51例，年齡61～85歲，平均年齡（71.6±8.22）歲，排除糖尿病、腦血管病、認知功能障礙者。三組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

1.2 方法

①提取DNA：取全部參研樣本5 mL靜脈血，抗凝處理后，提取血液中外周血白細胞基因組DNA[1]；②載脂蛋白E基因多態(tài)性檢測：應用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性方法進行檢測，采用ABIPE公司生產(chǎn)的9700型PCR儀器，在25 μL PCR反應體系中主要包含了25 μL 10×PCR反應緩沖液，0.5 μL DMSO，0.5 μL下游引物和上游引物（50 μmol/L），0.5～1 μg DNA模板，25 μL MgCl2

（25 mmol/L），Phamacia公司生產(chǎn)的1.5 μL dNTPs

（2 mmol/L），欣經(jīng)科生物技術(shù)公司生產(chǎn)的1UTaq DNA聚合酶。載脂蛋白E基因進行酶解、PCR擴增以及電泳檢測（使用北京六一儀器廠生產(chǎn)的垂直電泳儀，配合Bio-Rad公司生產(chǎn)的凝膠成像系統(tǒng)進行檢測），根據(jù)載脂蛋白E基因擴增的產(chǎn)物進行多態(tài)分析[2]。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 23.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行處理，計量資料以“x±s”表示，采用t檢驗；計數(shù)資料以百分數(shù)（%）表示，采用x2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 載脂蛋白E基因頻率

AD組、VD組攜帶ε4基因型的頻率高于正常組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），但VD組和AD組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），見表1。

2.2 載脂蛋白E等位基因頻率

VD組ε2、ε3、ε4等位基因頻率分別為5.1%、74.2%、20.6%，AD組ε2、ε3、ε4等位基因頻率依次為6.2%、76.1%、17.8%，正常組依次為10.4%、84.2%、5.8%，正常組ε4等位基因頻率低于VD組、AD組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），AD組與VD組ε4等位基因頻率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

2 討 論

散發(fā)性或家族性Alzheimer病中一個至關(guān)重要的危險因素是載脂蛋白Eε4等位基因，β淀粉樣蛋白能夠與載脂蛋白E進行結(jié)合，呈現(xiàn)出特異性，且ε4的特異性小于ε3、ε2的特異性[3]。人體神經(jīng)元在攝取載脂蛋白E受體的同時，還將攝入Aβ，從而減少了細胞的外毒性。從超微結(jié)構(gòu)以及細胞免疫研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，軸突中載脂蛋白Eε4和神經(jīng)元細胞體能夠抑制軸突生長，引起微管解聚，細胞微管蛋白在經(jīng)過載脂蛋白Eε4處理后會變少[4]。載脂蛋白Eε4能夠阻止重建正常神經(jīng)元，同時還能夠加快聚集成神經(jīng)原纖維纏結(jié)的速度和雙螺旋絲的形成，同樣的載脂蛋白E與膽堿能神經(jīng)元損害和腦淀粉樣血管病變的關(guān)系較為密切。非癡呆性認知功能障礙會受到載脂蛋白Eε4的影響，同樣載脂蛋白Eε4也是認知功能障礙的重要危險因素[5]。

綜上，載脂蛋白E基因多態(tài)性可能是血管性疾病以及腦病變疾病中的相關(guān)因素之一，與癡呆疾病的關(guān)系需要更多的研究進行證實。

參考文獻

[1] 張 斌，陳 偉，張 嶸，徐 芳，李 蔚.中國人載脂蛋白E基因多態(tài)性與輕度認知功能損害關(guān)系的Meta分析[J].東南大學學報（醫(yī)學版），2015，34（01）：83-87.

[2] 孟 強，張雪海，張新衛(wèi).中國人群載脂蛋白E基因多態(tài)性與高脂血癥關(guān)系的Meta分析[J].中國預防醫(yī)學雜志，2015，16（04）：304-307.

[3] 魏法權(quán)，王 帥，劉學謙，程希富，何 毅.中國人群載脂蛋白E基因多態(tài)性與他汀類藥物療效關(guān)系的Meta分析[J].臨床薈萃，2015，30（05）：486-491.

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[5] 謝愛玲，張玉榮，劉小慶.載脂蛋白E基因多態(tài)性與動脈粥樣硬化性腦梗死關(guān)系的Meta分析[J].中國醫(yī)學創(chuàng)新，2016，13（26）：100-103.

本文編輯：劉欣悅