生活飲用水總大腸菌群兩種不同檢驗(yàn)方法對(duì)比研究

趙學(xué)峰

【摘要】目的：探討生活飲用水總大腸菌群紙片法與多管發(fā)酵法兩種不同檢驗(yàn)方法的操作過(guò)程及不同時(shí)段的檢驗(yàn)效果。方法：從2017年1月-2018年1月收集的生活飲用水標(biāo)本中選出80份，開(kāi)展水總大腸菌群實(shí)驗(yàn)，將其分為不同檢驗(yàn)方法的兩組，分別為觀察組40份和對(duì)照組40份，觀察組采用多管發(fā)酵法檢驗(yàn)，對(duì)照組采用紙片法檢驗(yàn)，比較兩種檢測(cè)方法應(yīng)用下2018年1月總大腸桿菌的檢出率以及2018年6月總大腸桿菌的檢出率。結(jié)果：在2018年1月進(jìn)行的檢驗(yàn)中，采用紙片法檢驗(yàn)的對(duì)照組標(biāo)本檢出陽(yáng)性29例，檢出率為72.5%，低于采用多管發(fā)酵法檢驗(yàn)的觀察組標(biāo)本的37例和檢出率的92.5%，P<0.05。在2018年6月的檢驗(yàn)中，觀察組標(biāo)本檢驗(yàn)陽(yáng)性為32例，檢出率為80%，依舊高于對(duì)照組標(biāo)本的22例和55%，P<0.05。結(jié)論：針對(duì)生活飲用水開(kāi)展的檢驗(yàn)總大腸菌群的實(shí)驗(yàn)中，采用多管發(fā)酵法進(jìn)行檢驗(yàn)，其檢出率明顯比采用紙片法檢驗(yàn)的檢出率更好，能夠提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與科學(xué)性，更能確保生活飲用水的安全，值得在實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)工作中廣泛應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】生活飲用水；總大腸菌群；多管發(fā)酵法；紙片法

當(dāng)前，我國(guó)的水污染情況越來(lái)越嚴(yán)重，我國(guó)相關(guān)部門及社會(huì)各界人士紛紛加大了對(duì)飲用水污染情況的重視力度。在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)方面，總大腸桿菌用以判斷飲用水是否受到嚴(yán)重污染，成為檢驗(yàn)的重要因素，也是當(dāng)前我國(guó)相關(guān)部門進(jìn)行飲用水安全衛(wèi)生管理的重要手段。伴隨著相關(guān)部門的大力整頓與改善，人們生活的飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)取決于總大腸桿菌范圍的鑒定，因此相關(guān)的檢測(cè)工作非常重要，做好對(duì)生活飲用水總大腸桿菌的檢測(cè)，很大程度上能夠確定飲用水的指標(biāo)符合健康飲用范圍[1]。目前，檢驗(yàn)總大腸桿菌的方法比較多，應(yīng)用的方法不同，其對(duì)應(yīng)的應(yīng)用特點(diǎn)也各不相同，比如當(dāng)下廣泛應(yīng)用的紙片法，這種方法的操作過(guò)程相對(duì)簡(jiǎn)單和便捷，但其結(jié)果準(zhǔn)確性存在不確定的因素，因此需要改進(jìn)，而更多檢驗(yàn)人員提倡應(yīng)用多管發(fā)酵法，其全面的操作與適宜的方法更能提高檢驗(yàn)質(zhì)量[2]。為了探討生活飲用水總大腸菌群的有效檢驗(yàn)方法，本研究現(xiàn)選擇80份生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行專業(yè)的檢測(cè)對(duì)比分析，現(xiàn)將具體的分析過(guò)程整理為以下的報(bào)告。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院在2017年1月～2018年1月期間收集的80份生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)作為本研究的研究對(duì)象，進(jìn)行總大腸桿菌的檢驗(yàn)，隨機(jī)將其分為觀察組與對(duì)照組各40例，分別采用多管發(fā)酵法和紙片法，對(duì)比研究不同檢驗(yàn)方法的檢驗(yàn)過(guò)程以及檢驗(yàn)結(jié)果，以確定采用不同檢驗(yàn)方法在不同時(shí)期的結(jié)果準(zhǔn)確性。

1.2 研究方法

對(duì)照組的40例標(biāo)本檢驗(yàn)方法為紙片法，在采用紙片法進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)，檢驗(yàn)人員要確保儀器及使用試劑得到充分消毒，根據(jù)規(guī)定要求進(jìn)行霉菌消毒操作，進(jìn)一步保證檢驗(yàn)結(jié)果更為準(zhǔn)確。結(jié)合紙片法的要求制定檢驗(yàn)計(jì)劃，并根據(jù)說(shuō)明書的操作標(biāo)準(zhǔn)操作實(shí)驗(yàn)，預(yù)防出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)信息遺漏的情況。在開(kāi)展檢驗(yàn)以前，檢驗(yàn)人員要通過(guò)微生物實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)細(xì)菌，做好實(shí)驗(yàn)室消毒工作，采用生理鹽水將紙浸濕，確保紙片貼在需要進(jìn)行檢驗(yàn)的飲用水中保持30s時(shí)間，隨后將其放入到恒溫培育箱進(jìn)行18～24h的增菌處理，保持（36±1）℃的溫度，采用9ml生理鹽水稀釋大腸埃希菌菌苔，稀釋到10-3，采用無(wú)菌棉簽蘸取被稀釋的菌液，蘸取到試紙上，確定結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)，則在無(wú)菌濾紙上有發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸紙片變成黃色或是有紅色斑點(diǎn)出現(xiàn)的情況。

觀察組的40例標(biāo)本檢驗(yàn)方法為多管發(fā)酵法，取10ml的不同標(biāo)本水樣，同時(shí)準(zhǔn)備10ml乳糖蛋白胨培養(yǎng)液將其注入其中，再抽取lml樣本放置到9ml霉菌0.85%生理鹽水當(dāng)中，使之與生理鹽水混合，再?gòu)幕旌系囊后w中取出1ml，與單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)接種，再通過(guò)恒溫培育箱培養(yǎng)，將溫度調(diào)控為（3611）℃，時(shí)間調(diào)控為（2412）h，再對(duì)處理過(guò)的樣本進(jìn)行專業(yè)的檢測(cè)，與10ml樣本接種，培養(yǎng)細(xì)菌，對(duì)整體操作的結(jié)果進(jìn)行觀察。完成培育工作后，檢驗(yàn)分析結(jié)果，比如在檢驗(yàn)時(shí)乳糖蛋白胨培養(yǎng)館當(dāng)中無(wú)氣體產(chǎn)生，或是無(wú)酸性位置，則結(jié)果顯示呈現(xiàn)陰性，如試管內(nèi)有氣體，有酸性位置則結(jié)果表示陽(yáng)性。針對(duì)檢測(cè)出問(wèn)題的標(biāo)準(zhǔn)種到伊紅美蘭瓊脂板當(dāng)中，再持續(xù)18止24h的培養(yǎng)，對(duì)菌群所發(fā)生的變化進(jìn)行觀察和記錄，直到確定是菌群以后通過(guò)顯微鏡進(jìn)行進(jìn)一步的查實(shí)，最后驗(yàn)證結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo)

同實(shí)驗(yàn)均在2019年1月和2018年6月進(jìn)行，采用多管發(fā)酵法與紙片法對(duì)比總大腸桿菌的檢出率，最終的菌群總數(shù)判斷方法參照國(guó)家衛(wèi)生檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)飲用水的指標(biāo)，菌群總數(shù)低于100CFH/ML表示結(jié)果呈陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究采用18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)比分析，計(jì)量資料通過(guò)均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，通過(guò)t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料通過(guò)%表示，以X2檢驗(yàn)，P<0.05表示比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2018年1月總大腸桿菌檢出率

觀察組在2018年1月總大腸桿菌檢出率為92.5%，明顯高于對(duì)照組的72.5%，P<0.05。如表1所示。

2.2 2018年6月總大腸桿菌檢出率

觀察組2018年6月總大腸桿菌檢出率為80%，高于對(duì)照組檢出率的55%，P<0.05。如表2所示。

3 討論

飲用水是居民的必須品，對(duì)人體的機(jī)體有很好的吸收作用，從而促進(jìn)血液循環(huán)，保持機(jī)體體內(nèi)酸堿平衡，調(diào)節(jié)體溫等等，由此可見(jiàn)，飲用水對(duì)于人們生活生存有著非常重要的應(yīng)用[3]。這些年來(lái)，飲用水的安全威脅逐漸出現(xiàn)，其主要的感染細(xì)菌就是大腸桿菌，在環(huán)境的進(jìn)一步污染和生態(tài)的破壞背景下，飲用水受到整體水質(zhì)下降的影響，其凸顯的問(wèn)題越來(lái)越多，對(duì)人們的身心健康構(gòu)成嚴(yán)重的威脅，因此相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室檢查人員必須結(jié)合飲用水含有的大腸桿菌情況進(jìn)行嚴(yán)格準(zhǔn)確的檢測(cè)，科學(xué)檢查菌群的具體數(shù)量，加強(qiáng)檢驗(yàn)管理和方法的規(guī)范，確定更準(zhǔn)確的結(jié)果，才能及時(shí)發(fā)現(xiàn)飲用水存在的問(wèn)題，將安全威脅降至最低[4]。在檢驗(yàn)總大腸菌群的工作中，目前應(yīng)用的方法較多，本研究主要探討采用多管發(fā)酵法及紙片法在檢出率上的優(yōu)劣，采用多管發(fā)酵法檢驗(yàn)的40例觀察組標(biāo)本2018年1月檢出陽(yáng)性37例，檢出率為92.50%，采用紙片法檢驗(yàn)的對(duì)照組同時(shí)段的陽(yáng)性檢出率僅為29例，檢出率72.5%，P<0.05。而在2018年6月進(jìn)行的檢測(cè)中，觀察組標(biāo)本的檢出率依舊高于對(duì)照組，檢出率分別是80%與55%，P<0.05。原因可能如下：

（1）采用紙片法檢測(cè)的過(guò)程比較便捷，花費(fèi)的時(shí)間短，檢驗(yàn)人員不需要過(guò)高的技術(shù)就可以操作，但這個(gè)過(guò)程很容易受到外部環(huán)境影響，其結(jié)果也會(huì)發(fā)生變化；

（2）多管發(fā)酵法的應(yīng)用步驟相對(duì)復(fù)雜，有較長(zhǎng)的操作時(shí)間，整個(gè)過(guò)程很少受到外部環(huán)境影響，因此結(jié)果的準(zhǔn)確性得到保障，也避免了單一檢驗(yàn)結(jié)果影響結(jié)果的情況；

（3）兩種檢驗(yàn)方法均具有一定的優(yōu)勢(shì)，檢驗(yàn)人員可以通過(guò)紙片法快速確定標(biāo)本是否存在總大腸菌群，采用多管發(fā)酵法進(jìn)一步保障結(jié)果的科學(xué)準(zhǔn)確性，進(jìn)行結(jié)合應(yīng)用[5-6]。

綜上所述，多管發(fā)酵法比紙片法在檢測(cè)生活飲用水總大腸菌群中具有更高的準(zhǔn)確性，檢驗(yàn)人員要根據(jù)需要合理選擇檢驗(yàn)方法，才能提高檢驗(yàn)的效率與準(zhǔn)確率。

參考文獻(xiàn)

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