雄性獼猴去勢操作技術(shù)

謝金東, 周建華, 李志雄, 楊燕燕, 俞春英, 王訓(xùn)立

(1. 福建中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心, 福州 350122;2. 福建省計劃生育科學(xué)技術(shù)研究所, 福州 350011)

在醫(yī)學(xué)生命科學(xué)研究中, 去勢手術(shù)是制作某些疾病動物模型的常用手段。例如, 制作大鼠、犬前列腺增生動物模型需要摘除睪丸; 骨質(zhì)疏松癥動物模型需要摘除老年雌性動物卵巢等。不同種類、不同大小的實驗動物, 因其體質(zhì)量、解剖結(jié)構(gòu)等不同, 對去勢手術(shù)的要求也不一樣。獼猴(Macaca Nulatta), 在生物進化、生殖生理等方面與人類較為相似, 是研究人類疾病機制的理想動物模型[1]。在研究獼猴前列腺增生動物模型過程中, 我們對12只雄性獼猴實施了睪丸切除手術(shù)(去勢手術(shù)), 現(xiàn)把手術(shù)操作方法, 介紹如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

普通級雄性獼猴, 12只, 年齡8～12歲, 體質(zhì)量7～12 kg，由福建省計劃生育科學(xué)技術(shù)研究所提供[閩林馴繁(2008-7)號, SCXK(閩)2015-0002]。動物單籠懸掛飼養(yǎng)，籠具規(guī)格: 75 cm×80 cm×90 cm,[SYXK(閩)2015-0007]。適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后開始實驗，所有實驗操作符合動物福利和倫理原則。

1.2 主要器械和藥物

常規(guī)手術(shù)器械和消毒藥品。鹽酸氯胺酮注射液(2 mL、含0.3 g氯胺酮)，沈陽市獸藥廠出品;陸眠寧II注射液(40 mg/2 mL/支)(主要成分: 鹽酸塞拉嗪)，鹿醒寧注射液(250 mg/2 mL/支)(主要成分:尼可剎米)，吉林省華牧動物保健品有限公司出品;注射用頭孢拉定(粉劑、1 g/瓶)，浙江海正藥業(yè)股份有限公司出品。

1.3 操作方法

1.3.1 術(shù)前準備 預(yù)先清潔消毒手術(shù)室。徹底清潔墻壁、天花板及地面粉塵，保持手術(shù)臺及手術(shù)用具干凈整潔，不放置與手術(shù)無關(guān)物品; 提前1 h開啟手術(shù)室紫外燈進行消毒; 保持室內(nèi)溫度20～25 ℃。手術(shù)者(主刀與助手)2～3人，戴一次性(已滅菌的)口罩帽子與乳膠手套，穿手術(shù)衣，嚴格無菌操作。術(shù)前動物禁食12 h，麻醉前檢查動物精神狀況、排泄物等正常后，方可安排手術(shù)。

1.3.2 麻醉與手術(shù) 按8 mg/kg氯胺酮注射液肌肉注射, 同時肌肉注射陸眠寧II注射液0.07 mL/kg, 協(xié)同麻醉后, 仰躺, 四肢固定于手術(shù)臺上。此麻醉劑量下動物在無催醒劑催醒的情況下, 一般在1.5 h后會自然蘇醒。術(shù)中觀察動物的呼吸、心跳及體溫。陰囊剃毛備皮, 0.5%碘伏消毒, 75%消毒酒精脫碘后, 暴露陰囊中隔皮膚, 放置消毒好的方巾及洞巾, 用皮鉗固定。采用陰囊中隔皮膚切口, 切口長度3～4 cm(以睪丸大小可剛好能用手擠出為佳), 切開皮膚, 注意不要傷及睪丸(圖1左)。分離睪丸與陰囊腔, 用手把一側(cè)睪丸往切口輕輕拉出, 用力不宜太大, 以免扯動腹股溝管環(huán), 引起疝氣。依次分離并鉗夾輸精管、睪丸、附睪的動靜脈和輸精管動脈, 用3-0號PGLA可吸收縫線雙重結(jié)扎后, 切除睪丸及附睪。同法切除對側(cè)睪丸及附睪(圖1右)。最后觀察處理陰囊腔內(nèi)無出血及異物后, 灑上頭孢拉定粉約0.5 g?？p合陰囊中隔皮膚切口, 用3-0號PGLA縫線全層圓針連續(xù)內(nèi)縫，整齊創(chuàng)面, 涂0.5%碘伏消毒。最后，在腿部肌注頭孢拉定1 g，防感染。術(shù)后均不放置引流條，無需拆線。

圖1 獼猴睪丸摘除手術(shù)

1.3.2 術(shù)后護理 手術(shù)完后, 可肌注與陸眠寧II注射液同劑量的鹿醒寧注射液, 使動物早些蘇醒, 恢復(fù)體溫, 以便于觀察術(shù)后動物體況, 并密切觀察手術(shù)部位愈合情況。術(shù)后單籠懸掛飼養(yǎng), 飼喂方式不變。觀察室保持室溫20～26 ℃。本手術(shù)是小型手術(shù), 術(shù)后無使用鎮(zhèn)痛藥。手術(shù)第2日始, 每日肌注頭孢拉定1 g, 手術(shù)部位0.5%碘伏消毒, 防感染; 連續(xù)3 d。

2 結(jié)果

實施手術(shù)12例，其中3只猴第2日見陰囊有腫脹現(xiàn)象, 說明有術(shù)后陰囊出血或發(fā)生疝氣。經(jīng)按壓觸摸, 有一只腫脹較軟，有波動感, 是出血引起。用10 mL注射器吸取約15 mL血樣液體后，注入0.5 g(2 mL)頭孢拉定注射液。另二只腫脹較硬，應(yīng)為發(fā)生疝氣。我們于下午再次麻醉手術(shù)，切開有腫脹一側(cè)陰囊皮膚，注意不要傷及腫脹內(nèi)容物。發(fā)現(xiàn)一只是腸系膜漏出，另一只為腸管漏出。腸系膜漏出者，慢慢用手指回納至腹腔; 腸管漏出者，擴大(剪開)一點腹股溝管環(huán)，慢慢用手指回納至腹腔。之后，用3-0號PGLA縫線包裹陰囊內(nèi)精索殘端，行疝囊口“8”字縫合閉合。陰囊皮膚切口縫合及抗炎同上，再手術(shù)后，恢復(fù)良好。

3 討論

本實驗采用的獼猴睪丸切除術(shù)與其它動物的手術(shù)方法有所不同[2-6], 與人的傳統(tǒng)睪丸切除術(shù)相似[7,8],但另有其特點。為了特定的科研要求, 本文中12只實驗猴均切除睪丸及附睪, 術(shù)后恢復(fù)觀察2個月后開始給予藥物制作動物模型。所有手術(shù)遵守?zé)o菌操作原則。特別是做疝氣手術(shù), 與人的手術(shù)有異[9], 不采用腹部切口, 而是在疝氣一邊的陰囊做切口復(fù)位,主要是考慮獼猴不宜在清醒狀態(tài)下輸液, 連續(xù)手術(shù),腹部切口創(chuàng)傷較大, 術(shù)后護理難度大, 不利受試動物恢復(fù)體況。再者, 采用二種麻醉藥合用方法[10](同時肌肉內(nèi)注身8 mg/kg氯胺酮注射液和0.07 mL/kg陸眠寧II注射液), 較適用于獼猴手術(shù)操作, 簡便且效果好。